血液DNA提取纯度高吗?

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-07-03
产品特点

◎操作简便快速,20分钟左右可获得理想的DNA;

◎提取DNA纯度高,无抑制剂,1.7<A260/A280≤2.0;

◎产量更高,较国内同类产品高出20%;

◎样本范围广,可用于新鲜、冷冻或陈旧的全血样本。

产品介绍

BIOG Blood DNA Isolate Kit是我公司研发团队在综合比较了国外同类优质产品的基础上反复研制优化而成,专门用于血液DNA的提取纯化。本试剂盒采用独特的裂解液配方,可直接从新鲜、冷冻或陈旧的全血中提取高质量的基因组DNA,也可以直接提取得到血液中感染的细菌或转移的肿瘤细胞DNA, 省去了一般血液DNA提取试剂盒所需的白细胞分离步骤,操作简便快速,只需20分钟左右即可完成血液DNA提取,并且DNA提取得率较高,可在200 μl 全血中提取2-5ug左右基因组DNA。BIOG Blood DNA Isolate Kit采用了最新的优质离子膜,裂解液和洗脱液经过多次优化,提取得到的DNA纯度更高,最大限度地去除了蛋白、色素、脂类等杂质污染,可以直接应用于PCR、荧光定量PCR和各种酶切试验等。

操作步骤   ( 请自行准备无水乙醇、异丙醇和灭菌1.5mL离心管 ) :

1. 取出洗涤液,按以下操作:

a) 洗涤液A:21mL加入9mL无水乙醇;42mL加入18mL无水乙醇,混匀。

b) 洗涤液B:9mL加入21mL无水乙醇;18mL加入42mL无水乙醇,混匀。

c) 配制好的洗涤液如出现沉淀,可在37℃溶解,摇匀后使用。

2. 取1.5mL离心管,加入200μL血液样本,再加入200μL 裂解液及40μL 消化液,振荡混匀,65℃水浴10 分钟。

3. 加入150μL异丙醇(总体积的25%),混合均匀,如有半透明悬浮物,不影响DNA的提取与后续实验。

4. 将吸附柱放入收集管内,将上述溶液转入吸附柱内,12,000 rpm 离心1 分钟,弃收集管内废液;

5. 将吸附柱放回收集管内,加500μL 洗涤液A至吸附柱内,12,000 rpm 离心1 分钟,弃收集管内废液。

6. 将吸附柱放回收集管内,加500μL 洗涤液B至吸附柱内,12,000 rpm 离心1 分钟,弃收集管内废液。

7. 按每份样本40μL 取洗脱液(如10份提取样本,即取400μL 洗脱液),放置于灭菌1.5mL离心管,65℃预热。

8. 将吸附柱放回收集管内,12,000 rpm 离心2 分钟,离去残留的洗涤液。

9. 取出吸附柱,放入新的1.5 mL 灭菌离心管内,在吸附柱中心加入40 μL 预热洗脱液,静置2分钟,12,000 rpm 离心1分钟,收集DNA溶液。提取的DNA即可用于下一步实验或-20℃保存。

注意事项:

1.裂解液、洗涤液含有刺激性化学物质,操作过程请做好防护措施,避免直接接触皮肤,防止吸入口鼻。如不慎沾染皮肤或眼睛,请立即用清水或生理盐水冲洗,必要时请就医。

2.如血液量不足200μL,请用0.85% 生理盐水补至200μL;如血液量超出200μL,请使用BIOG中量血液DNA提取试剂盒或BIOG血液富集DNA提取试剂盒。

3. 如果提取的血液为鸟类、禽类的血液,因有核红细胞较多,提取血液量应适当减少,研究者应先进行优化实验,选择合适用量。

4.提取的DNA如暂不使用,应-20℃保存。

  • 血浆游离DNA提取回收效率高吗?
    答:其中,血清、血浆、腹水的提取量为0.3-1.5ml,尿液的提取量为2-10ml,水样的提取量为5-18ml。特别地,BIOG cfDNA Enri提取的DNA终浓度高,有效克服了一般试剂盒样本量大、洗脱液多、DNA提取终浓度依然较低的缺点。试剂盒提取体系经多次优化,提取DNA纯度高,可广泛用于各种PCR、荧光定量PCR、测序和...
  • 全血基因组DNA提取试剂盒的作用原理是怎样的
    答:再通过一系列快速的漂洗,离心的步骤,抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除,最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。试剂盒特点:不需要使用有毒的苯酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。快速。简捷。单个样品操作一般可在20分钟内完成。多次柱漂洗确保高纯度。典型的产量200...
  • 细胞DNA提取试剂的选择
    答:根据我们的经验,Q细胞DNA的提取得率,一般107细胞样本在40-60ug。Biog与Q公司的DNA提取得率相近,106-107细胞样本在30-60ug;T公司 106-107细胞样本DNA得率在20-50ug,都能满足下游PCR实验的要求。       二、DNA提取纯度高。我们一般采用紫外分光光度法测定...
  • DNA和RNA纯度检测的问题!
    答:样品中如果含有蛋白质及苯酚,A260/A280比值会明显下降。对于纯的样品只要读出260 nm 的A值即可以算出含量。通常以A值为1相当于50微克/ml 双螺旋DNA,或者40微克/ml 单链DNA(RNA),或者20微克/ml 寡核苷酸计算。OD260/OD280=1.9~2.0 RNA居多,纯度已经很高了。纯DNA:OD260/OD280≈1.8(...
  • 有关实验“DNA的提取及检测”的问题
    答:5. DNA检测:(1)0.8%琼脂糖凝胶电泳30-60分钟:TAE 100ml,EB 30ul,样品3-5ul,电压90V,观察A:DNA是否跑出,带型是否整齐划一;B:RNA是否除尽 (2)分光光度计检测D260/D280的比值:在1.8-2.0的范围内认为纯度较高上述方法提取的DNA比值在1.65-1.95之间。浓度=30000xOD260(DNA...
  • ffpe提取dna一般浓度和纯度是多少?
    答:rtpcr时提取rna的浓度和纯度要求:浓度20ng/ul以上足够了,如果用的是组织提取,浓度一般很高,可以达到几百甚至几千。如果你用的是病毒、少量细胞,浓度低一些也没有关系。纯度需要用仪器测一下。260/280理论值应该有2.0以上,260/230值1.2以上基本合格。RT-PCR:最重要的是RNA是否有明显降解,这个...
  • 谁知道,Promega(溶液型)提取全血DNA的原理及其试剂组成成分?
    答:◆ 结果稳定,产量高(典型的产量300μl 全血可提取出5-15μg),DNA纯度达1.7~2.0(OD260/OD280),长度可达50Kb-200kb,可直接用于PCR,Southern-blot和各种酶切反应。◆ 百泰克说明书中针对实验过程出现的疑难做出了详细的解答,帮助你解决实验过程中遇到的问题(如标本中含有血凝块、红...
  • 我提取的DNA是用试剂盒提取的,最后溶于100微升的缓冲液EB中,用紫外该...
    答:你取出1微升或2微升,用EB稀释100倍或50倍到100微升,OD260/280的比值在1.8-2.0是比较理想的,代表你的DNA纯度很高。波长260nm时,1OD值相当于双链DNA浓度为50μg/ml,算一下,再乘以你的稀释倍数,就是浓度了
  • 提取基因组DNA的方法有哪些?各有何优缺点?
    答:操作简单、用时短,整个提取流程只有裂解、结合、洗涤、洗脱四步短时间内即可完成。(3)安全无毒,不使用传统方法中的苯、氯仿等有毒试剂,对实验操作人员的伤害少,保护了实验人员的身体健康。(4)磁珠与核酸的特异性结合使得提取的核酸纯度高、浓度大。(5)灵敏度高,适合法医样本等痕量DNA提取。
  • 请问组织/细胞基因组DNA提取试剂盒都有啥特点?
    答:博凌科为的组织/细胞基因组DNA提取试剂盒采用高效缓冲液对样品进行裂解,DNA与硅胶膜特异性结合,经过漂洗,蛋白质和其他杂质被最大限度除去,实验过程中不需酚、氯仿等毒性有机溶剂抽提和乙醇沉淀等步骤,提取的DNA纯度高,适用于PCR、酶切等下游试验。试剂盒特点:·采用进口硅胶膜,基因组DNA得率高,...