细菌衣原体细胞如何培养?
衣原体为革兰氏阴性病原体,是一类能通过细菌滤器、在细胞内寄生、有独特发育周期的原核细胞性微生物。过去认为是病毒,现归属细菌范畴。衣原体广泛寄生于人类、鸟类及哺乳动物。能引起人类疾病的有沙眼衣原体、肺炎衣原体、鹦鹉热肺炎衣原体。在自然界中传播很广泛。它没有合成高能化合物ATP、GTP的能力,必须由宿主细胞提供,因而成为能量寄生物,多呈球状、堆状, 有细胞壁,有细胞膜,属原核细胞,以一般寄生在动物细胞内。从前它们被划归病毒,后来发现自成一类。它是一类在真核细胞内营专性能量寄生的G原核微生物,呈球形,直径只有0.3-0.5微米,它无运动能力,广泛寄生于人类、哺乳动物及鸟类,仅少数有致病性。1、衣原体细胞培养:对沙眼衣原体敏感的细胞株为McCoy细胞、HeLa-229细胞和BHK细胞,最常用的是经放线菌酮处理的单层McCoy细胞,孵育后,用单克隆荧光抗体染色,可迅速诊断,但操作人员一定要熟练,需专业培养。培养法的敏感性为80%-90%,阳性即可确立诊断。2、衣原体细胞学检查法:在感染细胞内可有衣原体的包涵体存在。从感染部位采取细胞标本作涂片,姬姆萨染色包涵体是蓝色或暗紫色,碘染色显示褐色。但敏感性差(40%),目前已较少采用。近年来采用荧光素标记的抗衣原体单克隆抗体,来检测细胞涂片中的衣原体,使用较为方便,目前主要用衣原体外膜蛋白(MOMP)的单克隆抗体的商品试剂(MicoTrak,Pathfinder,Monofluor)。结果判断:要衣原体数>10个才能判为阳性。
衣原体(chlamydia)是一种既不同于细菌也不同于病毒的一种微生物。原体为革兰氏阴性病原体,在自然界中传播很广泛。它没有合成高能化合物ATP、GTP的能力,必须由宿主细胞提供,因而成为能量寄生物,多呈球状、堆状,有细胞壁,以一般寄生在动物细胞内。从前它们被划归病毒,后来发现自成一类。它是一种比病毒大、比细菌小的原核微生物,呈球形,直径只有O.3-0.5微米,它无运动能力,广泛寄生于人类、哺乳动物及鸟类,仅少数有致病性。CHEMTRON衣原体检测为国内使用最广泛的衣原体检测工具。
衣原体感染需经过一定的实验室检查才能诊断。常用的检查方法是衣原体培养、直接荧光抗体检测、酶标免疫反应和分子生物学检查,如聚合酶链式反应(PCR)和连接酶链式反应(LCR)。1.衣原体培养:由于沙眼衣原体是在细胞内寄生,所以它只能在组织中培养。培养法的特异性好,但敏感性低,试验较复杂,费用高,一般临床少用,多为研究所用。2.直接荧光抗体检测:这是非培养法中应用较多的检测方法。此法操作容易,特异性好,但需要有经验的检验师检查。3.酶标免疫反应:这是目前应用最广的检测方法。该法的优点是快速、方便。但敏感性有时不够高。
答:1、衣原体细胞培养:对沙眼衣原体敏感的细胞株为McCoy细胞、HeLa-229细胞和BHK细胞,最常用的是经放线菌酮处理的单层McCoy细胞,孵育后,用单克隆荧光抗体染色,可迅速诊断,但操作人员一定要熟练,需专业培养。培养法的敏感性为80%-90%,阳性即可确立诊断。2、衣原体细胞学检查法:在感染细胞内可有衣原体...
答:在细胞培养中,衣原体能在一些特定的原代或传代细胞株中生长,比如HeLa-299、BHK-21、McCoy或HL细胞株,相比于鸡胚培养,这些细胞提供更为敏感的环境。为了提高分离培养的阳性率,科研人员通常会采取离心或使用X线照射细胞的方法,这样可以促使更多的衣原体吸附到易感细胞的表面,从而更容易进行分离和研究。
答:1、支原体 是一类没有细胞壁、高度多形性、能通过滤菌器、可用人工培养基培养增殖的最小原核细胞型微生物。由于能形成丝状与分枝形状,故称为支原体。2、衣原体 是一组极小的,非运动性的,专在细胞内生长的微生物。没有合成高能化合物ATP、GTP的能力,必须由宿主细胞提供,因而成为能量寄生物。多呈...
答:衣原体是专性细胞内寄生生物,无法在人工培养基上独立生长,通常使用鸡胚卵黄囊及特定细胞如HeLa-299、BHK-21、McCoy等进行培养。分离培养时,通常通过离心或添加二乙氨乙基葡聚糖来增强其与细胞的结合。衣原体有三种类型,分别是沙眼衣原体、肺炎衣原体和鹦鹉热衣原体,每种类型根据抗原构造、包涵体性质和对药...
答:1.衣原体细胞培养:对沙眼衣原体敏感的细胞株为McCoy细胞、Hela-229细胞和BHK细胞,最常用的是经放线菌酮处理的单层McCoy细胞,孵育后,用单克隆荧光抗体染色,可迅速诊断,但操作人员一定要熟练,需专业培养。培养法的敏感性为80%-90%,阳性即可确立诊断。 2.衣原体细胞学检查法:在感染细胞内可有衣原体的包涵体存在。从...
答:1.衣原体细胞培养:对沙眼衣原体敏感的细胞株为McCoy细胞、Hela-229细胞和BHK细胞,最常用的是经放线菌酮处理的单层McCoy细胞,孵育后,用单克隆荧光抗体染色,可迅速诊断,但操作人员一定要熟练,需专业培养。培养法的敏感性为80%-90%,阳性即可确立诊断。 2.衣原体细胞学检查法:在感染细胞内可有衣原体的包涵体存在。从...
答:衣原体检查主要通过两种方法,一是PCR检测,即利用聚合酶链式反应技术检测衣原体DNA;二是细胞培养法,即将患者分泌物进行培养,观察是否有衣原体的生长。两种方法各有优点和缺点,PCR检测速度快、敏感度高,但价格较高;细胞培养法价格较低,但需要较长的培养时间,且检出率较低。具体选择哪种方法,需要根据...
答:1、衣原体细胞培养:对沙眼衣原体敏感的细胞株为McCoy细胞、Hela-229细胞和BHK细胞,最常用的是经放线菌酮处理的单层McCoy细胞,孵育后,用单克隆荧光抗体染色,可迅速诊断,但操作人员一定要熟练,需专业培养。培养法的敏感性为80-90,阳性即可确立诊断。 2、近年来采用荧光素标记的抗衣原体单克隆抗体,来检测细胞涂片中的...
答:将接种标本的细胞培养管离心,促进衣原体粘附进入细胞;或在培养管内加入二乙氨乙基葡聚糖,以增强衣原体吸附于易感细胞,提高分离培养阳性率支原体的培养特性:可以用人工培养基生长,但营养要求比一般细菌高,除基础营养物质外还需加入10~20%人或动物血清以提供支原体所需的胆固醇。最适pH7.8~8.0之间...
答:1.原体:呈球形,小而致密,是发育成熟的衣原体,在宿主细胞外较为稳定,具有高度感染性;2.网状体(始体):大而疏松,由原体在细胞内空泡中发育而成,不具感染性,是繁殖体,以二分裂繁殖,产生新的原体。衣原体只能在活的宿主细胞内生长,常用培养衣原体有动物接种、鸡胚接种和细胞培养。