我想问一下荧光定量PCR法用2-△△Ct计算相对定量的问题

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-07-09
我想问一下荧光定量PCR法用2-△△Ct计算相对定量时结果的标准差是如何计算的

这个很简单啊。你做了一次实验,得到的样本做了一次PCR,得到了一次的相对定量(设对照组为1)。然后重新做实验,再做PCR,又得到一组,这样至少重复3次,就有3组相对定量了。计算标准差

对照组的标准差:取对照组的平均CT值设为1, 3次试验的CT值根据2-△△Ct计算相对量,可以算出对照组的标准差。

因为基本每个样本都是三个复孔,所以用目的基因CT平均减去内参的平均,再算其2-△△CT,EXCEL即可。柱状图的error bar是你作图的时候,软件会自动给出,因为你每组会重复三次

做了一个实验,内部参考电压可以得到几个CT值,会得到多个目标基因。在这种情况下,根据CT值的平均值,将得到的比率(相对量)。

实验肯定不是唯一的一次,至少重复3次。这将是一个倍数的3个或更多,得到。 3个以上的值,你可以计算平均值和标准偏差的。

你一次实验做的数据,内参可以得到几个CT值,目的基因也会得到几个。这样的话,根据平均的CT值,就会得到一个倍数(相对量)。
实验肯定不会只做一次吧,至少重复3次以上。这样就会得到3个以上的倍数了。3个以上的数值就可以算均数和标准差了。

三次独立实验,每次至少三个重复,统计结果自然就是那样了。

  • 我想问一下荧光定量PCR法用2-△△Ct计算相对定量时结果的标准差是如何...
    答:这个很简单啊。你做了一次实验,得到的样本做了一次PCR,得到了一次的相对定量(设对照组为1)。然后重新做实验,再做PCR,又得到一组,这样至少重复3次,就有3组相对定量了。计算标准差 对照组的标准差:取对照组的平均CT值设为1, 3次试验的CT值根据2-△△Ct计算相对量,可以算出对照组的标准...
  • 我想问一下荧光定量PCR法用2-△△Ct计算相对定量的问题
    答:做了一个实验,内部参考电压可以得到几个CT值,会得到多个目标基因。在这种情况下,根据CT值的平均值,将得到的比率(相对量)。实验肯定不是唯一的一次,至少重复3次。这将是一个倍数的3个或更多,得到。 3个以上的值,你可以计算平均值和标准偏差的。
  • 您好,我想问一下实时荧光定量pcr的数据分析!
    答:实验组2/Test3:30 这时候要设对照了,假设Test1为对照组(普通组),当然是以普通组为对照 那么,相对含量为:普通组/Test1:1 实验组1/Test2:2^-(28-29)=1/2=0.5 实验组2/Test3:2^-(28-30)=1/4=0.25 A基因在实验组1和实验组2中的表达量,分别下降2倍和4倍!所以,就出来啦,...
  • 请问:做荧光定量PCR时,△△Ct值是什么意思,它的计算公式是什么?_百度...
    答:2 -△△Ct =2 -(-1.2)= 2.30
  • 用2-△△CT法处理荧光定量PCR数据时,SD值应该怎么算
    答:因为基本每个样本都是三个复孔,所以用目的基因CT平均减去内参的平均,再算其2-△△CT,EXCEL即可。柱状图的error bar是你作图的时候,软件会自动给出,因为你每组会重复三次
  • 急急急 荧光定量PCR中相对定定量方法ΔΔCt法的条件及计算过程!!!_百...
    答:△△Ct = △Ct(试验样品) — △Ct(基准样品)△Ct(试验样品) = Ct(试验样品,目的基因) — Ct(试验样品,内参基因)△Ct(基准样品) = Ct(基准样品,目的基因) — Ct(基准样品,内参基因)2 -△△Ct =2 -(-1.2)= 2.30 ...
  • 相对荧光定量PCR中,2(-ΔΔCt)是怎么回事?
    答:耐药菌A,B,C的ct值分别先减去它们各自的内参基因T的ct值,这是ΔCt1,敏感菌的也一样,得到ΔCt2,用ΔCt1-ΔCt2就是ΔΔCt,然后求负倒数就是2(-ΔΔCt)了,这个数值就是你耐药菌和敏感菌不同基因的表达量差异倍数
  • 实时荧光定量PCR结果无法分析,求助
    答:用已知浓度的DNA样本(通常是质粒)梯度稀释成一系列的样本。做实验的时候,这些标准品和待测样本加在同样一块96孔盘的不同孔内。一起做PCR。用2-△△ ct法算的话,应如何算? 假设检测A基因,CT分别为(这里记住CT越大,表明相对含量越低) 普通组/Test1:28 实验组1/Test2:29 实验组2/Test3...
  • 相对定量PCR中的对照组指什么?2-△△C中处理前和处理后什么意思_百度知 ...
    答:我想你说的“对照样品”应该是用于制作标准曲线的标准品(常用质粒构建的重组DNA),稀释4-5个梯度,可以做标准曲线。所谓双曲线,就是用这个所谓的“对照样品DNA”,一个用来做目的基因的标准曲线,一个用来做内参基因的标准曲线。2-△△C中处理前和处理后,我没有明白。
  • 看家基因作用是什么?实时荧光定量PCR技术中为什么要用它?
    答:看家基因的意思是稳定表达的一种基因 所以他的作用就是用来做内参 比如在做PCR的时候,初始的模板量的不同直接导致扩增后的量的差别,那么看家基因的作用就出现了,要在看家基因的表达水平相同的情况下,比较其他基因的表达是否有升高或降低。