ms固体培养基污染的原因

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-07-04
MS固体培养基不能凝固的原因有哪些

不能凝固首先考虑琼脂的量够不够,然后调节ph为5.8-6.2左右,最后是控制灭菌参数,不要在灭菌锅中放太久!

(1)植物组织培养常用的MS培养基属于固体培养基.菊花组织培养过程中,自身内源激素即可调节其生长,无需添加植物激素,但每日必须12h的日光灯照射.
(2)植物组织培养中,用体积分数为70%的酒精和质量分数为0.l%的氯化汞对外植体消毒,用无菌水清洗,接种时每次使用器械后都需要灼烧灭菌;接种3-4d后,观察外植体的生长情况,若发现外植体被污染,其原因可能是外植体消毒不彻底,培养基灭菌不彻底.
(3)生长素与细胞分裂素的比值低,有利于芽的分化;生长素与细胞分裂素的比值高,有利于根的分化.愈伤组织在诱导生根的培养基中未形成根,但分化出了芽,其原因可能是培养基中生长素类物质和细胞分裂素类物质用量的比值偏低.
(4)植物的芽尖、茎尖生组织分裂快,很少被病毒感染甚至无病毒,故常用作培育无病毒植株的材料.
故答案为:
(1)固体 不必
(2)消毒 灼烧 外植体消毒不彻底、培养基灭菌不彻底
(3)培养基中生长素类物质和细胞分裂素类物质用量的比值偏低
(4)花芽、叶芽

可能是细菌。
细胞培养中常见的污染情况总结如下,常见的污染如下,细菌、细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状,根据感染细菌的不同,可有不同的外形,培养液一般会浑浊变黄,对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况,是否在高压灭菌时放气时间足够,压力足够尤其是和储存培养液接触的移液管等物品,连续两次污染的话有可能造成储存液污染,一定要注意,下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象,可在培养液中加相应的抗生素处理。
霉菌,培养液是清亮的,倒置显微镜下无杂质,37度孵箱培养2至3天,仍清亮,但出现絮状杂质,镜下可见呈细丝状的团状漂浮物,可看到明显的菌丝,细胞仍可生长,但时间长之后,细胞的活力状态变差,用硫酸铜溶液擦拭C02孵箱内,再把水盘里也加上饱和量的硫酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒磷酸氢二钠高盐液体,可以防止霉菌污染C02孵箱被霉菌污染后,可把所有细胞暂时转移,采用过氧乙酸擦洗孵箱包括隔板,箱壁。并把过氧乙酸放置在孵箱内一个小时,使其蒸汽弥漫。待过氧乙酸的气味消散后,再移入细胞。孵箱应定期清洁2月左右,尤其在多雨的季节。
其它培养箱清洗方法是:用84液擦洗一清水擦洗或酒精擦洗一紫外灯照。预防霉菌污染,可在培养基里加3um1的两性霉素或制霉菌素或放线菌素D或双抗,但细胞一旦污染,很难挽救,制霉菌素或放线菌素D或双抗都于事无补,建议舍弃该污染细胞,将环境彻底消毒,如果所有细胞都污染,可能是系统污染,检查一下培养基和器材,如果只是个别污染,可能是操作问题,就要注意操作。

  • ms固体培养基污染的原因
    答:可能是细菌。细胞培养中常见的污染情况总结如下,常见的污染如下,细菌、细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状,根据感染细菌的不同,可有不同的外形,培养液一般会浑浊变黄,对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况,是否在高压灭菌时放气时间足够,压力足够尤其是和储存培养液接触的移液管等物品,...
  • ms固体培养基的配制培养基污染的原因
    答:污染的可能原因,可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等关于培养基的无菌状况,取培养基至培养瓶中不加细胞,37度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长就是操作的问题。也可以在培养基中事先加入双抗硫酸链霉素和氨苄青霉素。但双抗有时会影响细胞的状态,所以在做转染、检测细胞某项指标...
  • 为什么灭菌后MS培养基颜色变深(变黄)?
    答:植物组织培养基灭完菌后变黄有两个主要原因,一个就是你所说的与培养基的PH值有关,如果PH 值过低的话就会变黄。另一个原因就是培养基污染了,例如支原体污染就表现为培养基变黄。所以建议你把培养基放到培养箱中,在26℃培养几天,然后再进行观察,确定下是不是培养基污染。如果不是的话,那...
  • ms培养基灭菌后发黄能用吗
    答:发黄能用,MS培养基是植物组织培养中常用的一种培养基。
  • MS培养基加硝酸银灭菌为什么会变黄
    答:可能是硝酸银浓度太高,和NAA在细菌裂解物的催化下和 NAA反应生成了硝基NAA 。因为我没做过这个实验,我只是说可能。NAA中有个萘基,它连了一个致活基团—CH2COOH,因此容易被空气中的氧气氧化成萘醌(黄色)。
  • MS培养基表面有一层白色的东西是怎么回事
    答:恭喜你,那是染菌了,在培养基中添加150mg/L的特美啶直至情况改善后浓度减半。头孢霉素和羧苄青霉素虽然能在一定程度上抑菌,但是你这个真的很严重,很像我之前遇到的慢生菌,很难除去的。
  • 为什么MS培养基在高温灭菌后会变色?
    答:确实有可能……一定要调pH。稍有变色也没办法了,可能是水质或者琼脂问题
  • 连续多次制作的MS培养基灭菌三四天后就会发现被污染了,请求哪位专家帮...
    答:你们这做实验的连封口膜都不用,不会污染才怪呢。本来培养基这东西放置不用的话就用保鲜膜包好放到无菌室里,就这有时候还有污染的。你们这什么措施都没有啊。
  • 我做的MS培养基灭菌后过了十几天后为什么瓶子底部会变成白色,请高手指 ...
    答:由于一个是固体一个是液体,灭菌的温度压力异常可能导致琼脂/植物琼脂最后析出产生沉淀。一般来说发生沉淀不会造成很大的影响,所以不用很担心,但是如果想排除这个现象,最好的方法就是用那种高温高压一段时间后能显色的纸连同你的培养基一起灭菌,如果纸显色了,理论上你灭菌锅的温度压力就没问题了。
  • 植物组织培养培养失败长出杂菌
    答:(1)由以上分析可知,图中①表示脱分化过程,②表示再分化过程.(2)进行菊花组织培养的基本实验步骤是:制备MS固体培养基、外植体消毒、接种、培养、移栽、栽培.固体培养基常用的凝固剂是琼脂.(3)接种若干天后,若发现有的锥形瓶长出菊花幼苗,有的锥形瓶培养失败还长出杂菌菌落,原因可能是外植体...