要做目的基因过表达的质粒转染,想在公司买质粒,请问哪家公司比较好?另外公司需要哪些信息啊

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-08-04
转染相同质粒在不同细胞中表达的分子量相同吗

不一定相同

质粒转染后pcr检测显示,基因表达量很低是怎么回事
转染(transfection):指真核细胞由于外源DNA掺入而获得新的遗传标志的过程.常规转染技术可分为瞬时转染和稳定转染(永久转染)两大类.
转染目的:研究你的目的片段到细胞内的表达.
转染一般是将目的基因构建到某个载体,将构建好的重组质粒导入细胞中,这样就能表达你所要的目的蛋白用于后续实验.

这个好像直接买不好哟,一般要订做,克隆模板可以买,或者全基因合成。但是关建技术是是要包成慢病毒或者腺病毒转染细胞效果才好。威斯腾生物可以做,你可以百度一下,询问他们/

addgene可以。
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你是要确定能表达的质粒吗?可以问一下淼灵生物保藏中心(MLCC),他们有很多这种质粒,载体啥的

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    答:这个好像直接买不好哟,一般要订做,克隆模板可以买,或者全基因合成。但是关建技术是是要包成慢病毒或者腺病毒转染细胞效果才好。威斯腾生物可以做,你可以百度一下,询问他们/
  • 细胞过表达中质粒如何构建及转染?
    答:首先确定你是要做原核过表达或是真核过表达,两种的过表达载体不一样,而且不同的细胞中过表达用的promoter也不太一样,你要自己好好查查。选定载体后,构建质粒,先放入克隆菌中大量扩增,提取质粒。原核的话,直接转化表达菌表达就行了,真核的话需要进行细胞转染,简单点可以去买转染试剂盒,再按操...
  • 1.7万bp的基因怎么过表达
    答:1.7万bp的基因过表达可以通过过表达载体转染、基因突变来实现。1、过表达载体转染:将过表达载体导入目标细胞,使其表达目标基因,常用的载体有质粒、病毒等,转染后,可通过一系列实验方法,如Westernblot、RT-PCR等检测目标基因的表达水平。2、基因突变:在目标基因的编码区或调控区域进行人工突变,使其...
  • 能不能同时转染shrna和过表达的质粒
    答:当然可以啊 ,只不过你需要改变过表达时的靶点序列,我没猜错的话你应该是想把内源性的基因kd,然后去过表达它的点突变,这个是可以做的,一般情况下你只需要在构建过表达时,把shrna靶点序列同义突变,即序列不同,氨基酸相同,就可以做
  • 如何让一个细胞过度表达某种基因,来观察此基因的作用,瞬时转染和稳定转 ...
    答:一般转染的质粒除了带有需要过表达的基因以外,还需要带有标记基因。标记基因可以被特定的抗体检测,从而判断是否有效表达。如果你要过表达的是某种蛋白,也可以直接通过该蛋白的抗体检测,对照是没有转染的同种细胞,这样表达效果就可以通过WESTERN BLOT看见了。过表达倒没什么标准,每种蛋白表达量也不一致,...
  • 质粒转染的操作步骤有哪些?
    答:具体方法大揭秘:阳离子脂质体转染: DNA/RNA/siRNA通过静电传递,LifeTechnologies™工具广泛适用,选对试剂至关重要。磷酸钙共沉淀: 利用钙离子促使DNA细胞内吞,检测基因表达效果明显。病毒转染: 适用于特定细胞,如腺病毒和逆转录病毒,涉及病毒克隆、扩增和细胞转导。电转: 电脉冲技术,适合对特定...
  • 什么是转染?为什么要质粒转染?
    答:转染是指将外源DNA或RNA片段导入细胞的过程。具体地说,通过使用特定的方法,如病毒载体或质粒载体等,将目的基因导入宿主细胞内,使这些基因在细胞内表达并产生相应的蛋白质或其他产物。在基因工程、细胞工程等领域中,转染技术是一项重要的技术工具。质粒转染的原因和重要性:1. 基因功能研究:通过质粒转染...
  • 质粒转染细胞为什么不表达,求助
    答:原因有很多可能:质粒上的目的基因被宿主系统破坏;目的基因对应蛋白对细胞有毒害作用,被细胞反馈调节到抑制表达;目的基因表达与细胞本身特点能力不符;质粒载体选择与表达系统不合适;检测方法有问题,有表达,但是没有检测出来;……
  • “基因过表达”的原理步骤和应用是什么?
    答:基因过表达的步骤是:1,构建克隆。将目的基因连接在特定的载体上,载体种类依据表达系统差异而不同。在载体上一般含有增强基因转录的promoter,不同系统中采用的promoter完全不同 2,将克隆导入表达细胞中。在大肠杆菌,酵母和哺乳动物细胞中,构建的外源质粒直接导入细胞即可,这个过程称为转化或转染。对于...
  • ...筛选含目的基因的细胞,这个质粒还含有抗氨苄霉素基因。
    答:用四环素肯定会杀死你想要的细胞滴。至于第一点所担心的纯度问题,当然也是可能有某些细胞带有空质粒啦。这只能够靠前期插入(ligation)步骤的质量控制,尽量提纯质粒以后进行转染啦。但一般没有百分百这种事吧。要想在抗药性筛选以后进一步提纯细胞,貌似只能免疫染色以后去做流式分选啥的咯。