基因片段的全化学合成方法是什么？

化学合成cDNA基因片段的过程

基因合成的起点是各个片段的独立合成。每个片段由4到6个碱基的互补重叠区段构成，这些区域在退火过程中起着关键作用，使得它们能通过T4DNA连接酶以磷酸二酯键的形式紧密相连，形成一个完整的基因链。

在化学—酶促合成策略中，策略更为高效。仅需合成部分特定的寡核苷酸片段，这些片段的3'末端设计有短的互补序列。在适宜的条件下，这些片段会通过退火自动结合，形成模板—引物复合体。接着，在DNA聚合酶I的作用下，在模板的缺口处添加互补的核苷酸，直至填满整个序列。最后，T4DNA连接酶确保了这些片段间的无缝连接，并可能通过选择性的限制性内切酶处理，进一步优化了基因结构。

这种精细调控和高效连接技术，使得化学—酶促合成cDNA基因片段成为现代生物技术中的重要手段。

以mRNA为模板，经反转录酶催化，在体外反转录成cDNA，与适当的载体（常用噬菌体或质粒载体）连接后转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA，并能繁殖扩增，这样包含着细胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合称为该组织细胞的cDNA文库。