鸡胚成纤维细胞培养实验的步骤
kuaidi.ping-jia.net 作者：佚名 更新日期：2024-06-28
鸡胚成纤维细胞培养实验的步骤
鸡胚绒毛尿囊膜血管形成(CAM)试验方法 1)．鸡胚准备和接种组织：选择北京白鸡种蛋，洗净，用l：1000苯扎溴铵(新洁尔灭)液浸泡3分钟，置37．8土0．5℃培养箱中孵育。鸡胚发育第7天，蛋壳消毒后，标记制作2cmX3cm左右观察窗。接种组织视研究目的而定，一定要在接种当日取材，充分清洗除去血污和粘液，再剪成1～2mm组织小块。
(2)组织接种：在制备鸡胚观察窗的次日，即鸡胚发育第8天进行组织接种。每个鸡胚可接种5—7个组织小块于接种部位CAM表面，再用透明胶纸封好，继续孵育。
(3)接种组织的收获与观察：组织接种后每12小时观察一次，到组织接种第11天(鸡胚发育第18天)收获接种组织，取出鸡胚，置接种组织连同周围的CAM于解剖显微镜下观察，并用10％甲醛固定保存，部分组织可作石蜡切片，用作血管生成研究的免疫组化染色等。
(4)CAM的血管生成表现：组织接种24小时后，CAM血管开始向接种组织生长，随培养时间的延长，血管数目及直径均明显增加；第2天，新细小血管直接趋向组织；第3天，新生血管形成以接种组织为中心，10～20条放射状血管网；尔后，CAM血管继续明显增加。非接种部位与接种部位比较，CAM血管数目少，大血管与小血管呈脉样均匀分布；而接种部位的CAM血管在接种组织周围弥散样增加，以组织为中心向周围呈放射状分布，在首先与组织发生联系的区域CAM血管更多。第4天，可见新生细小CAM血管生长形成中、粗血管，并在中、粗血管继续分支出细小血管，形成新的血管网。CAM血管管腔结构清晰，可区别动、静脉。
(5)CAM血管生成实验模型的用途：CAM血管生成模型用于血管生成的研究，可取得两方面结果：①检测评价接种物刺激CAM血管增生的血管生成作用，用于分析研究血管生成促进因子、抑制因子的活性和作用的检测，如肿瘤血管生成的研究等；②对接种物，如肿瘤组织、自身的血管生成进行研究，用于分析不同组织的血管生成活性和作用，如肿瘤组织有引发新生血管生成的作用，但肺癌与其他癌组织的血管生成活性和作用可能不同。
尽管血管生成的体内动物模型研究更为接近人体的生理状态，使研究结果更为可靠，但仍有一些不足之处，如操作繁琐，耗时过长；另外，在该类模型中，血管生成物必须植入眼角膜囊、颊囊、或绒毛尿膜囊使之诱导血管生成，难免产生人为因素诱导的血管生成；血管生成促进因子、抑制因子等需要从多聚载体中释放出来；操作方法和测定其结果的技术较为复杂
鸡胚卵用o．1％新洁尔灭消毒，在37．6℃(上下浮动 o．2℃），60％湿度的隔水式恒温孵箱内孵育c每日翻动2次，孵育第7天时(满24h为1天)，在绒毛尿囊膜体表投影距胚头1cm处上划定开窗位置。无菌条件下，磨切暴露绒毛尿囊膜，制出假气室。透明胶带封闭窗口。鸡胚开窗后24h，甲基纤维素盘放人假气室(避开大血管)，对照组盘中加入 20微升灭菌PBS，实验组盘中各加入待测物20微升，透明胶带封闭假气室，继续孵育。每日加样一次，第十二天取材。假气室注入丙酮甲醇混合液固定20分钟后，取假气室一侧的蛋壳后固定20分钟，剥离CAM膜．铺在滤纸上，阴干保存。
成纤维细胞一般都很好养的。注意灭菌和观察培养液颜色变化，及时更换。检查培养箱有没有受到污染。最好自己灭菌比较放心。
强烈推荐来这下载，很不错的一篇肝细胞应用分析论文：
http://www.cqvip.com/qk/90001A/200201/5863960.html
可 实 验 发现，从STO饲养层培养的ICM 细胞
分离的胚胎干细胞嵌合力、存活率均低于PMEF,
且核型异常的ES细胞的比率比PMEF的高。不同
动物的胚胎对饲养层的选择不同，羊全胚或分离的
1CM在STO上不扩展，在同源胚胎成纤维细胞上
能扩展，但未得到ES细胞。猪全胚或分离的ICM
只有在STO或STO+BRL(大鼠肝细胞饲养层)一
CM 上能附着增殖，并迁移到饲养层上形成类ES细
胞。山羊和绵羊的类ES细胞只能用BFLF(胎牛肝
成纤维细胞)分离得到。鸡的PGCs培养在STO饲
养层和LEFs鸡胚成纤维细胞)上，7^-10 d就可传
代一次。
3.2 早期胚胎及基本培养基的选择和外源性物质
的添加
以下 的 早 期胚胎都可作为建立ES细胞系的材
料:牛的桑棋胚(6-7日龄)，囊胚(7^-8日龄);山羊
的囊胚(7^-8日龄);绵羊的囊胚(7^-9日龄);猪的
囊胚(7^10日龄);兔的囊胚(4^-5日龄)等。而对
PGCS来说，牛取29^-35 d胚胎生殖蜻，猪取23-
25 d胚胎生殖岭等。
ES 的 基 本培养基一般采用】〕MEM，因为它比
较适用于生长速度快、呈集落生长而又贴壁性差的
细胞。由于DMEM的各种成分不一定能保证ES细
胞处于最佳生长状态，因此还需添加一定的外源性
物质，如p-琉基乙醇、硒酸钠、非必需氨基酸和生长
因子等物质。p一琉基乙醇可促进胚胎细胞的分裂增
殖，并促进DNA的合成，防止过氧化物对培养细胞
的损害，促进胚胎贴壁。硒酸钠是一种附加的营养成
分，是细胞生长所必需的。1993年Sims等在培养牛
的ES细胞过程中加人硒酸钠后提高了传代过程中畜禽胚胎千细胞的应用价值及前景分析
199 9 年 ，美国《科学》杂志将ES细胞研究成果
评为该年度世界十大科技进展之首，可见人们已预
见到干细胞尤其是ES细胞在医学乃至整个生命科
学中的巨大发展潜力。
4.1 ES细胞是细胞分化和发育生物学研究的重要
材朴
利用 ES 细胞的多潜能性，能诱导ES细胞发生
定向分化。类视素(又称维生素A酸)能诱导ES细
胞分化成体壁内胚层，NGF(神经生长因子)又能使
之分化成神经细胞，而LIF,DIA等细胞因子却能使
之保持未分化状态，或分化成中胚层。而细胞分化又
是发育生物的重要课题，因此诱导分化必将为发育
生物学中细胞分化的决定作用以及恶性肿瘤的深人
研究提供新的材料和思路。而且如果用胚胎干细胞
进行实验.就可以避开许多障碍，直接观察细胞的分
化、发育的荃因调控，推动理论科学的发展。
参考资料：http://service.ilib.cn/File
成纤维细胞一般都很好养的。注意灭菌和观察培养液颜色变化，及时更换。检查培养箱有没有受到污染。最好自己灭菌比较放心。
鸡胚成纤维细胞培养实验的步骤
答：鸡胚绒毛尿囊膜血管形成(CAM)试验方法 1)．鸡胚准备和接种组织：选择北京白鸡种蛋，洗净，用l：1000苯扎溴铵(新洁尔灭)液浸泡3分钟，置37．8土0．5℃培养箱中孵育。鸡胚发育第7天，蛋壳消毒后，标记制作2cmX3cm左右观察窗。接种组织视研究目的而定，一定要在接种当日取材，充分清洗除去血污和粘液，再...
过夜消化法制备鸡胚成纤维细胞
答：1.2 鸡胚成纤维细胞的制备 取 1 0 1 3龄鸡胚 2个 ， 用无菌方法将胚提出放入无菌平皿中，去喙、爪 、 翅和内脏 ， 剪成小块以 H a nk s 液洗 2～3次 ，移入无菌内含磁力搅拌棒的5 0 mL锥形瓶中， 再用 Ha n k s 搅拌洗涤 2 -3次， 然后以每个鸡胚 1 0 mL的量加入 2....
作业:简述细胞原代培养的过程。
答：1、一般取出组织之后，先要对组织块进行修剪，去除有害物质。以鸡胚为例，取出鸡胚之后，去除头部和内脏，用BSS也进行清洗两次。2、将组织进行剪碎处理，加入一定量的胰酶进行消化，多放入37°二氧化碳培养箱中静止5分钟左右。3、轻轻的倒掉上清液，并加入一定量的DMEM溶液。4、用纱布进行过滤，滤除大的...
鸡胚成纤维细胞如何培养我最近在培养鸡胚成纤维细胞
答：采用组织块法则大约在接种后2~3天到1周左右，在接种的皮肤组织块周围长出细胞。待细胞融合成片，铺满培养容器底壁大部分时即可进行传代。一般都采用胰蛋白酶(trypsin)，将成纤维细胞从底壁消化下来后分瓶作传代培养。成纤维细胞在体外培养条件下能保持良好的分裂增殖能力。细胞分裂时变为球形;分裂后又平...
鸡胚成纤维细胞培养实验的步骤
答：1．准备蛋胚 2.接种 3.收获 1．病毒痘苗病毒（Vaccinia virus），鸡新城疫病毒（Newcastle distase virus）。2.仪器或其他用具 孵卵器，检卵灯，齿钻，磨壳器，钢针，蛋座木架，注射器，2.5％碘酒，70％乙醇，镊子，剪刀，封蜡（固体石蜡加1／4凡士林，溶化），灭菌培养板，灭菌盖玻片等。3.白...
鸡胚细胞怎样制备
答：d、0.125－0.25％胰蛋白酶消化液。B、鸡胚成纤维细胞的制备 取 1 0 1 3龄鸡胚 2个 ，用无菌方法将胚提出放入无菌平皿中，去喙、爪 、翅和内脏 ，剪成小块以 H a nk s 液洗 2～3次，然后以每个鸡胚 1 0 mL的量加入胰蛋白酶消化液，室温 30 mi n 左右。消化完毕，以 8 ...
利用培养基限定法纯化动物细胞的方法利用培养基限定法纯化动物细胞的方...
答：建立限定条件是培养基限定法的关键步骤。限定条件包括限定营养物质和添加抑制剂两种方式。a. 限定营养物质 对于某些细胞，它们的生长和分裂需要特定的营养物质。通过限制或添加特定营养物质，可以使目标细胞生长受限，从而纯化目标细胞。例如，对于鸡胚纤维细胞的分离，可以添加5-溴代脱氧尿嘧啶（BrdU）来限制...
鸡胚成纤维细胞如何培养
答：成纤维细胞一般都很好养的。注意灭菌和观察培养液颜色变化，及时更换。检查培养箱有没有受到污染。最好自己灭菌比较放心。
细胞传代培养和鸡胚成纤维细胞的制作与培养两个室友中消化终点分别如何...
答：通过控制这些参数，可以有效地传代培养细胞，并获得所需要的细胞数量和形态。相比之下，鸡胚成纤维细胞的制作和培养涉及到一系列更为复杂的步骤。首先，需要从一批健康的鸡蛋中选择出适合制作成纤维细胞的鸡蛋；然后，通过制作纤维细胞来源和移植程序对鸡蛋进行处理；最后，需要对培养阶段进行调整，并将无菌培养...
马立克病病毒该怎样培养?
答：以含病毒的细胞分散培养物接种到4日龄鸡胚卵黄囊内，在接种后12～15d可见到鸡胚的绒毛尿囊膜上有白色小斑点病灶，直接接种到11日胚龄的绒毛尿囊膜上亦可以产生病灶。新孵出的雏鸡、组织培养细胞和鸡胚，均可在实验室中增殖和测定GaHV-2。新生雏鸡于接种GaHV-2后2～4周即可在神经节、神经和某些脏器中...
动物病毒的鸡胚培养
1．准备蛋胚
2.接种
3.收获
1．病毒痘苗病毒（Vaccinia virus），鸡新城疫病毒（Newcastle distase virus）。
2.仪器或其他用具
孵卵器，检卵灯，齿钻，磨壳器，钢针，蛋座木架，注射器，2.5％碘酒，70％乙醇，镊子，剪刀，封蜡（固体石蜡加1／4凡士林，溶化），灭菌培养板，灭菌盖玻片等。
3.白壳受精卵（自产出后不超过10d，以5d以内的卵为最好）。
鸡胚成纤维细胞如何培养我最近在培养鸡胚成纤维细胞
成纤维细胞的分离培养一开始并不涉及成骨作用，而主要是用于研究细胞的老化、各种外来因子对细胞的损伤、细胞在体外条件下的恶性转化、以及某些先天性代谢异常、酶缺陷等。由于皮肤成纤维细胞易于获取，又易于在体外生长，皮肤成纤维细胞培养已在基础医学和临床医学研究中得到较广泛的运用，其分离培养技术已相对成熟，对其体外生长规律也有了较全面的认识。
原代培养
成纤维细胞的原代培养可用酶消化法或组织块法，其中组织块法又因其操作简便、条件易于控制而应用更为普遍。通常，以酶消化法获得的成纤维细胞悬液在接种后5~10min即可见细胞以伪足初期附着，与底物形成一些接触点;然后细胞逐渐呈放射状伸展，胞体的中心部分亦随之变扁平;最快者大约在接种后30min，细胞贴附底物即较为完全，呈现成纤维细胞的形态。采用组织块法则大约在接种后2~3天到1周左右，在接种的皮肤组织块周围长出细胞。待细胞融合成片，铺满培养容器底壁大部分时即可进行传代。一般都采用胰蛋白酶(trypsin)，将成纤维细胞从底壁消化下来后分瓶作传代培养。成纤维细胞在体外培养条件下能保持良好的分裂增殖能力。细胞分裂时变为球形;分裂后又平铺在附着物的表面成为有突起的扁平细胞。体外培养的成纤维细胞，其生命期限与物种等因素有关。
例如:人胚成纤维细胞约可培养50代;恒河猴皮肤成纤维细胞能传代超过40代;鸡胚成纤维细胞则只有少数能培养30代;而小鼠成纤维细胞多数只能生长8代左右。另外，从老年个体取得的成纤维细胞的寿命要比取自年轻者短。由于在细胞传代和进行体外培养时，细胞的生物学特性会逐渐发生一些不同于体内的改变，故通常只将前10代视这正常细胞，可在此时将生长旺盛的成纤维细胞冻存起来，以备将来复苏使用，这在将培养的细胞由动物实验向人体实验过渡的过程中必须给予足够的重视。
鸡胚绒毛尿囊膜血管形成(CAM)试验方法 1)．鸡胚准备和接种组织：选择北京白鸡种蛋，洗净，用l：1000苯扎溴铵(新洁尔灭)液浸泡3分钟，置37．8土0．5℃培养箱中孵育。鸡胚发育第7天，蛋壳消毒后，标记制作2cmX3cm左右观察窗。接种组织视研究目的而定，一定要在接种当日取材，充分清洗除去血污和粘液，再剪成1～2mm组织小块。
(2)组织接种：在制备鸡胚观察窗的次日，即鸡胚发育第8天进行组织接种。每个鸡胚可接种5—7个组织小块于接种部位CAM表面，再用透明胶纸封好，继续孵育。
(3)接种组织的收获与观察：组织接种后每12小时观察一次，到组织接种第11天(鸡胚发育第18天)收获接种组织，取出鸡胚，置接种组织连同周围的CAM于解剖显微镜下观察，并用10％甲醛固定保存，部分组织可作石蜡切片，用作血管生成研究的免疫组化染色等。
(4)CAM的血管生成表现：组织接种24小时后，CAM血管开始向接种组织生长，随培养时间的延长，血管数目及直径均明显增加；第2天，新细小血管直接趋向组织；第3天，新生血管形成以接种组织为中心，10～20条放射状血管网；尔后，CAM血管继续明显增加。非接种部位与接种部位比较，CAM血管数目少，大血管与小血管呈脉样均匀分布；而接种部位的CAM血管在接种组织周围弥散样增加，以组织为中心向周围呈放射状分布，在首先与组织发生联系的区域CAM血管更多。第4天，可见新生细小CAM血管生长形成中、粗血管，并在中、粗血管继续分支出细小血管，形成新的血管网。CAM血管管腔结构清晰，可区别动、静脉。
(5)CAM血管生成实验模型的用途：CAM血管生成模型用于血管生成的研究，可取得两方面结果：①检测评价接种物刺激CAM血管增生的血管生成作用，用于分析研究血管生成促进因子、抑制因子的活性和作用的检测，如肿瘤血管生成的研究等；②对接种物，如肿瘤组织、自身的血管生成进行研究，用于分析不同组织的血管生成活性和作用，如肿瘤组织有引发新生血管生成的作用，但肺癌与其他癌组织的血管生成活性和作用可能不同。
尽管血管生成的体内动物模型研究更为接近人体的生理状态，使研究结果更为可靠，但仍有一些不足之处，如操作繁琐，耗时过长；另外，在该类模型中，血管生成物必须植入眼角膜囊、颊囊、或绒毛尿膜囊使之诱导血管生成，难免产生人为因素诱导的血管生成；血管生成促进因子、抑制因子等需要从多聚载体中释放出来；操作方法和测定其结果的技术较为复杂
鸡胚卵用o．1％新洁尔灭消毒，在37．6℃(上下浮动 o．2℃），60％湿度的隔水式恒温孵箱内孵育c每日翻动2次，孵育第7天时(满24h为1天)，在绒毛尿囊膜体表投影距胚头1cm处上划定开窗位置。无菌条件下，磨切暴露绒毛尿囊膜，制出假气室。透明胶带封闭窗口。鸡胚开窗后24h，甲基纤维素盘放人假气室(避开大血管)，对照组盘中加入 20微升灭菌PBS，实验组盘中各加入待测物20微升，透明胶带封闭假气室，继续孵育。每日加样一次，第十二天取材。假气室注入丙酮甲醇混合液固定20分钟后，取假气室一侧的蛋壳后固定20分钟，剥离CAM膜．铺在滤纸上，阴干保存。
成纤维细胞一般都很好养的。注意灭菌和观察培养液颜色变化，及时更换。检查培养箱有没有受到污染。最好自己灭菌比较放心。
强烈推荐来这下载，很不错的一篇肝细胞应用分析论文：
http://www.cqvip.com/qk/90001A/200201/5863960.html
可 实 验 发现，从STO饲养层培养的ICM 细胞
分离的胚胎干细胞嵌合力、存活率均低于PMEF,
且核型异常的ES细胞的比率比PMEF的高。不同
动物的胚胎对饲养层的选择不同，羊全胚或分离的
1CM在STO上不扩展，在同源胚胎成纤维细胞上
能扩展，但未得到ES细胞。猪全胚或分离的ICM
只有在STO或STO+BRL(大鼠肝细胞饲养层)一
CM 上能附着增殖，并迁移到饲养层上形成类ES细
胞。山羊和绵羊的类ES细胞只能用BFLF(胎牛肝
成纤维细胞)分离得到。鸡的PGCs培养在STO饲
养层和LEFs鸡胚成纤维细胞)上，7^-10 d就可传
代一次。
3.2 早期胚胎及基本培养基的选择和外源性物质
的添加
以下 的 早 期胚胎都可作为建立ES细胞系的材
料:牛的桑棋胚(6-7日龄)，囊胚(7^-8日龄);山羊
的囊胚(7^-8日龄);绵羊的囊胚(7^-9日龄);猪的
囊胚(7^10日龄);兔的囊胚(4^-5日龄)等。而对
PGCS来说，牛取29^-35 d胚胎生殖蜻，猪取23-
25 d胚胎生殖岭等。
ES 的 基 本培养基一般采用】〕MEM，因为它比
较适用于生长速度快、呈集落生长而又贴壁性差的
细胞。由于DMEM的各种成分不一定能保证ES细
胞处于最佳生长状态，因此还需添加一定的外源性
物质，如p-琉基乙醇、硒酸钠、非必需氨基酸和生长
因子等物质。p一琉基乙醇可促进胚胎细胞的分裂增
殖，并促进DNA的合成，防止过氧化物对培养细胞
的损害，促进胚胎贴壁。硒酸钠是一种附加的营养成
分，是细胞生长所必需的。1993年Sims等在培养牛
的ES细胞过程中加人硒酸钠后提高了传代过程中畜禽胚胎千细胞的应用价值及前景分析
199 9 年 ，美国《科学》杂志将ES细胞研究成果
评为该年度世界十大科技进展之首，可见人们已预
见到干细胞尤其是ES细胞在医学乃至整个生命科
学中的巨大发展潜力。
4.1 ES细胞是细胞分化和发育生物学研究的重要
材朴
利用 ES 细胞的多潜能性，能诱导ES细胞发生
定向分化。类视素(又称维生素A酸)能诱导ES细
胞分化成体壁内胚层，NGF(神经生长因子)又能使
之分化成神经细胞，而LIF,DIA等细胞因子却能使
之保持未分化状态，或分化成中胚层。而细胞分化又
是发育生物的重要课题，因此诱导分化必将为发育
生物学中细胞分化的决定作用以及恶性肿瘤的深人
研究提供新的材料和思路。而且如果用胚胎干细胞
进行实验.就可以避开许多障碍，直接观察细胞的分
化、发育的荃因调控，推动理论科学的发展。
参考资料：http://service.ilib.cn/File
成纤维细胞一般都很好养的。注意灭菌和观察培养液颜色变化，及时更换。检查培养箱有没有受到污染。最好自己灭菌比较放心。
答：鸡胚绒毛尿囊膜血管形成(CAM)试验方法 1)．鸡胚准备和接种组织：选择北京白鸡种蛋，洗净，用l：1000苯扎溴铵(新洁尔灭)液浸泡3分钟，置37．8土0．5℃培养箱中孵育。鸡胚发育第7天，蛋壳消毒后，标记制作2cmX3cm左右观察窗。接种组织视研究目的而定，一定要在接种当日取材，充分清洗除去血污和粘液，再...
答：1.2 鸡胚成纤维细胞的制备 取 1 0 1 3龄鸡胚 2个 ， 用无菌方法将胚提出放入无菌平皿中，去喙、爪 、 翅和内脏 ， 剪成小块以 H a nk s 液洗 2～3次 ，移入无菌内含磁力搅拌棒的5 0 mL锥形瓶中， 再用 Ha n k s 搅拌洗涤 2 -3次， 然后以每个鸡胚 1 0 mL的量加入 2....
答：1、一般取出组织之后，先要对组织块进行修剪，去除有害物质。以鸡胚为例，取出鸡胚之后，去除头部和内脏，用BSS也进行清洗两次。2、将组织进行剪碎处理，加入一定量的胰酶进行消化，多放入37°二氧化碳培养箱中静止5分钟左右。3、轻轻的倒掉上清液，并加入一定量的DMEM溶液。4、用纱布进行过滤，滤除大的...
答：采用组织块法则大约在接种后2~3天到1周左右，在接种的皮肤组织块周围长出细胞。待细胞融合成片，铺满培养容器底壁大部分时即可进行传代。一般都采用胰蛋白酶(trypsin)，将成纤维细胞从底壁消化下来后分瓶作传代培养。成纤维细胞在体外培养条件下能保持良好的分裂增殖能力。细胞分裂时变为球形;分裂后又平...
答：1．准备蛋胚 2.接种 3.收获 1．病毒痘苗病毒（Vaccinia virus），鸡新城疫病毒（Newcastle distase virus）。2.仪器或其他用具 孵卵器，检卵灯，齿钻，磨壳器，钢针，蛋座木架，注射器，2.5％碘酒，70％乙醇，镊子，剪刀，封蜡（固体石蜡加1／4凡士林，溶化），灭菌培养板，灭菌盖玻片等。3.白...
答：d、0.125－0.25％胰蛋白酶消化液。B、鸡胚成纤维细胞的制备 取 1 0 1 3龄鸡胚 2个 ，用无菌方法将胚提出放入无菌平皿中，去喙、爪 、翅和内脏 ，剪成小块以 H a nk s 液洗 2～3次，然后以每个鸡胚 1 0 mL的量加入胰蛋白酶消化液，室温 30 mi n 左右。消化完毕，以 8 ...
答：建立限定条件是培养基限定法的关键步骤。限定条件包括限定营养物质和添加抑制剂两种方式。a. 限定营养物质 对于某些细胞，它们的生长和分裂需要特定的营养物质。通过限制或添加特定营养物质，可以使目标细胞生长受限，从而纯化目标细胞。例如，对于鸡胚纤维细胞的分离，可以添加5-溴代脱氧尿嘧啶（BrdU）来限制...
答：成纤维细胞一般都很好养的。注意灭菌和观察培养液颜色变化，及时更换。检查培养箱有没有受到污染。最好自己灭菌比较放心。
答：通过控制这些参数，可以有效地传代培养细胞，并获得所需要的细胞数量和形态。相比之下，鸡胚成纤维细胞的制作和培养涉及到一系列更为复杂的步骤。首先，需要从一批健康的鸡蛋中选择出适合制作成纤维细胞的鸡蛋；然后，通过制作纤维细胞来源和移植程序对鸡蛋进行处理；最后，需要对培养阶段进行调整，并将无菌培养...
答：以含病毒的细胞分散培养物接种到4日龄鸡胚卵黄囊内，在接种后12～15d可见到鸡胚的绒毛尿囊膜上有白色小斑点病灶，直接接种到11日胚龄的绒毛尿囊膜上亦可以产生病灶。新孵出的雏鸡、组织培养细胞和鸡胚，均可在实验室中增殖和测定GaHV-2。新生雏鸡于接种GaHV-2后2～4周即可在神经节、神经和某些脏器中...
