如何提取细胞核蛋白
kuaidi.ping-jia.net 作者：佚名 更新日期：2024-06-29
怎样提取细胞质或细胞核中的蛋白
，比如分离核组分，常用NP40，因为其对核膜的破坏作用更小；
2，分离mitochondria组分，可以使用digitonin，因为线粒体外膜非常脆弱，极容易在分离时破裂，导致内外膜间许多成分释放出来；
如何提取细胞核蛋白
答：如何提取细胞核蛋白 ，比如分离核组分，常用NP40，因为其对核膜的破坏作用更小；2，分离mitochondria组分，可以使用digitonin，因为线粒体外膜非常脆弱，极容易在分离时破裂，导致内外膜间许多成分释放出来；
如何从组织中提取核蛋白
答：从组织中提取核蛋白的具体步骤如下：1、用生理盐水洗涤组织细胞。2、向其中加入400微升由氯化钾等配成的A液，匀浆，彻底研磨。3、将其在冰上膨胀裂解15分钟，之后震荡10秒。4、在转速为1200转每秒的离心机上离心1分钟。5、倒去上清液，加入30微升由甘油等配成的B液，重悬浮细胞核。6、重新在冰上裂...
如何从组织中提取核蛋白
答：1． 用冷-PBS洗两次细胞 2． 刮除细胞入1ml -PBS中 3． 离心细胞3000rpm，5分钟 4． 用400ul Buffer A重悬细胞，并上肿胀细胞10分钟，vortex10秒 5． 1000rpm离心10秒，弃上清 6． 12000rpm离心5分钟，弃上清 7． 重悬细胞在50-100ul Buffer C中，置于冰上20分钟 8． 12000rpm离心5分钟...
哪一种裂解液对核蛋白的提取好点
答：ripa裂解液对核蛋白的提取好点。加到细胞培养皿里面，摇15分钟，然后刮下来吸出来，是做western的话加Loading buffer 再95°煮10分钟。裂解液裂解是一种比较温和的红细胞去除方法,主要用于经酶消化分散的组织细胞的分离纯化，淋巴细胞的分离纯化以及组织细胞蛋白与核酸提取等实验中红细胞的去除。经红细胞裂...
核蛋白的提取方法
答：9. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到核蛋白。B． 组织蛋白提取1. 取适量组织样本剪碎，加冷PBS，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体（或用液氮研磨），冰上静置5分钟，小心将上清吸入另一预冷的干净离心管。2. 在4℃，500×g条件下离心2-3分钟，弃上清。3. 按照细胞蛋白的提取...
动物组织可以同时提取核蛋白和总蛋白(包膜和胞浆)嘛?
答：一般胞浆蛋白是最先提取出来的，裂解细胞离心后，上清内是胞浆蛋白，沉淀中是细胞核和细胞膜，然后再加强裂解程度，就可以提取核蛋白，最后才能提取出膜蛋白。网上有细胞不同组分的蛋白提取方法，你可以查一下
膜蛋白、核蛋白、糖蛋白和脂蛋白的异同点,怎样分离这四种蛋白,并说明采 ...
答：制备的膜蛋白，核蛋白和胞浆蛋白能保持天然活性，并且纯度较高。提取的蛋白可用于进一步的转录因子活性分析、凝胶阻滞实验(Gel Shift Assay)、免疫共沉淀、Western Blotting、酶活性测定等后续蛋白质研究，可以用于培养细胞或动物组织中蛋白质的提取。每次可以处理107个细胞或100mg动物组织，由溶液溶液A，溶液...
如何从细胞核里提P53蛋白
答：将含有断裂链的DNA注入细胞，可检测到P53蛋白浓度的这种变化。P53蛋白的浓度变化不是由于p53基因的表达的提高，而是由于P53蛋白降解速度的下降。P53蛋白的降解受MDM2蛋白的控制，该蛋白与P53蛋白结合，并将P53蛋白由细胞核输出到细胞质，并经遍在蛋白化途径被降解。DNA损伤如何导致P53蛋白的稳定？这与ATM...
核蛋白的详细内容
答：可从细胞核中提取得到，能溶解于1mol/L NaCl溶液中。核蛋白中的蛋白质包括组蛋白(或精蛋白)和非组蛋白蛋白质。组蛋白含碱性氨基酸如精氨酸、赖氨酸等丰富的碱性蛋白，带正电荷。精蛋白仅出现于真核细胞中，含较多的天门冬氨酸、谷氨酸等酸性氨基酸，是酸性蛋白，带负电荷。核蛋白在遗传及蛋白质合成里...
1%tritonx-100的细胞裂解液能不能释放出细胞核内的蛋白
答：细胞核内蛋白除了需要高浓度的去垢剂外还需要物理破碎
细胞比较简单，只有细胞膜，抽提过程中，很容易破坏细胞膜，从而得到蛋白，相应蛋白中受到其他物质干扰也比较少，样品较为干净。
但是用组织的时候，组织由细胞组成，但是从组织中抽提丹巴就要复杂，做组织匀浆以后，再分离组织碎片和蛋白，但是分离过程可能没有那么好，组织中含有的各种杂质，杂蛋白就比细胞中要多，要复杂。因此选择适当的方法提取组织蛋白，对于后续的Western来说还是非常重要的，这也是为什么细胞的蛋白做WB挺好，但是换到组织，可能有些条件就需要进一步优化了。
细胞质蛋白和细胞核蛋白怎么分离
核蛋白是指在细胞质内合成， 然后运输到核内起作用的一类蛋白质。如各种组蛋白、DNA合成酶类、RNA转录和加工的酶类、各种起调控作用的蛋白因子等。核蛋白一般都含有特殊的氨基酸信号序列， 起蛋白质定向、定位作用。
1.核定位序列（核定位信号，NLS）：亲核蛋白一般都含有特殊的氨基酸序列，这些内含的短肽保证了整个蛋白质能够通过核孔复合体转运到细胞核内，这段具有“定向”、“定位”作用的序列被称为核定位序列。
2.核输出信号（NES）：作为核内物质输出细胞核的信号，帮助核内某些分子迅速通过核孔进入细胞质，位于核内合成然后被运输到细胞质工作的分子中。
，比如分离核组分，常用NP40，因为其对核膜的破坏作用更小；
2，分离mitochondria组分，可以使用digitonin，因为线粒体外膜非常脆弱，极容易在分离时破裂，导致内外膜间许多成分释放出来；
答：如何提取细胞核蛋白 ，比如分离核组分，常用NP40，因为其对核膜的破坏作用更小；2，分离mitochondria组分，可以使用digitonin，因为线粒体外膜非常脆弱，极容易在分离时破裂，导致内外膜间许多成分释放出来；
答：从组织中提取核蛋白的具体步骤如下：1、用生理盐水洗涤组织细胞。2、向其中加入400微升由氯化钾等配成的A液，匀浆，彻底研磨。3、将其在冰上膨胀裂解15分钟，之后震荡10秒。4、在转速为1200转每秒的离心机上离心1分钟。5、倒去上清液，加入30微升由甘油等配成的B液，重悬浮细胞核。6、重新在冰上裂...
答：1． 用冷-PBS洗两次细胞 2． 刮除细胞入1ml -PBS中 3． 离心细胞3000rpm，5分钟 4． 用400ul Buffer A重悬细胞，并上肿胀细胞10分钟，vortex10秒 5． 1000rpm离心10秒，弃上清 6． 12000rpm离心5分钟，弃上清 7． 重悬细胞在50-100ul Buffer C中，置于冰上20分钟 8． 12000rpm离心5分钟...
答：ripa裂解液对核蛋白的提取好点。加到细胞培养皿里面，摇15分钟，然后刮下来吸出来，是做western的话加Loading buffer 再95°煮10分钟。裂解液裂解是一种比较温和的红细胞去除方法,主要用于经酶消化分散的组织细胞的分离纯化，淋巴细胞的分离纯化以及组织细胞蛋白与核酸提取等实验中红细胞的去除。经红细胞裂...
答：9. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到核蛋白。B． 组织蛋白提取1. 取适量组织样本剪碎，加冷PBS，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体（或用液氮研磨），冰上静置5分钟，小心将上清吸入另一预冷的干净离心管。2. 在4℃，500×g条件下离心2-3分钟，弃上清。3. 按照细胞蛋白的提取...
答：一般胞浆蛋白是最先提取出来的，裂解细胞离心后，上清内是胞浆蛋白，沉淀中是细胞核和细胞膜，然后再加强裂解程度，就可以提取核蛋白，最后才能提取出膜蛋白。网上有细胞不同组分的蛋白提取方法，你可以查一下
答：制备的膜蛋白，核蛋白和胞浆蛋白能保持天然活性，并且纯度较高。提取的蛋白可用于进一步的转录因子活性分析、凝胶阻滞实验(Gel Shift Assay)、免疫共沉淀、Western Blotting、酶活性测定等后续蛋白质研究，可以用于培养细胞或动物组织中蛋白质的提取。每次可以处理107个细胞或100mg动物组织，由溶液溶液A，溶液...
答：将含有断裂链的DNA注入细胞，可检测到P53蛋白浓度的这种变化。P53蛋白的浓度变化不是由于p53基因的表达的提高，而是由于P53蛋白降解速度的下降。P53蛋白的降解受MDM2蛋白的控制，该蛋白与P53蛋白结合，并将P53蛋白由细胞核输出到细胞质，并经遍在蛋白化途径被降解。DNA损伤如何导致P53蛋白的稳定？这与ATM...
答：可从细胞核中提取得到，能溶解于1mol/L NaCl溶液中。核蛋白中的蛋白质包括组蛋白(或精蛋白)和非组蛋白蛋白质。组蛋白含碱性氨基酸如精氨酸、赖氨酸等丰富的碱性蛋白，带正电荷。精蛋白仅出现于真核细胞中，含较多的天门冬氨酸、谷氨酸等酸性氨基酸，是酸性蛋白，带负电荷。核蛋白在遗传及蛋白质合成里...
答：细胞核内蛋白除了需要高浓度的去垢剂外还需要物理破碎
