MTT法测细胞活度的原理具体是怎样的?

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-08-12
MTS法测定细胞增殖的原理?该方法与MTT法有何不同?

MTS法原理:被测物质溶液的颜色或加入显色剂后生成的有色溶液的颜色,颜色深度和物质含量成正比,则根据光被有色溶液吸收的强度,即可测定溶液中物质的含量。
跟MTT法区别如下:
一、指代不同
1、MTT法:利用有色物质对特定波长光的吸收特性来进行定性分析的一种方法。
2、MTS法:是一种检测细胞存活和生长的方法。
二、原理不同
1、MTT法:为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臜(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。
2、MTS法:以生成有色化合物的显色反应为基础,比色分析对显色反应的基本要求是:反应应具有较高的灵敏度和选择性,反应生成的有色化合物的组成恒定且较稳定,它和显色剂的颜色差别较大。选择适当的显色反应和控制好适宜的反应条件,是比色分析的关键。

三、用途不同
1、MTT法:方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。它的特点是灵敏度高、经济。
2、MTS法:采用具有分光系统(单色器)及检测器的分光光度计,使测定结果准确、省时,选择性好。
参考资料来源:百度百科-比色法
参考资料来源:百度百科-MTT法

要看你流式用的是哪种方法了. 如果单用PI染色,阳性的就是死细胞.细胞膜受损. 如果用Invitrogen的Live/Dead方法,死细胞和活细胞都能分别染色.活细胞内ATP充分.酶还有活性.可以产生荧光物质.死细胞的细胞膜损坏,导致DNA被染色. 理论上比例应该接近。

MTT比色法,是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒,用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。

我做过很多MTT的实验, 心得是: 种细胞一定要均匀;最好有96孔板离心机,不然最后一步吸走培养液的时候吸走了细胞就会影响实验结果。

  • MTT法测细胞活度的原理具体是怎样的?
    答:MTT比色法,是一种检测细胞存活和生长的方法。其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒,用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。在一...
  • MTT法测24孔板时 细胞数多 二甲基亚砜(DMSO)溶解甲瓒后溶液颜色深的孔...
    答:\x09MTT比色法,是一种检测细胞存活和生长的方法.其检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能.二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒,用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量.在一...
  • 细胞活力测定常用的简便方法是
    答:活力测定可以和细胞计数合起来进行,但要考虑到染液对原细胞悬液的加倍稀释作用。 三、MTT法测细胞相对数和相对活力  活细胞中的琥珀酸脱氢酶可使MTT分解产生兰色结晶状甲赞颗粒积于细胞内和细胞周围。其量与细胞数呈正比,也与细胞活力呈正比。 1.  细胞悬液以1 000 rpm离...
  • ...OriginLab 0204】Origin细胞存活率柱状图绘制
    答:       一般,我们使用MTT法测细胞的生存率时,需要测试多个浓度下(此篇设定了对照组0和浓度分别为31.25、62.5、125、250、500 μg/mL的细胞)的细胞存活率,而为了提高检测准确性和稳定性,每个浓度的细胞在96孔板中要测三个孔。而酶标仪的原理是通过检测穿过每个孔的...
  • MTT法测细胞毒活性的时候,需要阳性对照吗
    答:一般除了处理组外,需要设置调零孔(培养基、MTT、二甲基亚砜),对照孔(细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、二甲基亚砜),因为是用吸光值检测的,一般不需要阳性对照。
  • MTT测定药物对肿瘤细胞的影响,为何药物浓度为80时反而OD值比60时高...
    答:MTT是测试细胞数量和活度的方法。我觉得你可能在控制细胞数量的时候没有做到等同,因为很多操作上的因素会影响。比如,你操作时间太长会让大量的细胞贴壁,而你还认为细胞密度是一样的,就会使后面加到的样品细胞数量减少。所以我建议你看看细胞数量上的问题。当然,也不排除染菌了。其实相当于变相增加细胞...
  • mtt法测脾淋巴细胞增殖实验中的培养基需要加双抗吗
    答:day1:筛选第一天,去除旧的培养基,加入一定量MOI的病毒颗粒;(加入无血清培养基的总量必须充分覆盖住细胞。)(4)病毒转导后约6-8h,再添加1ml完全培养基(血清和双抗,如果已经使用双抗。)到细胞内,然后孵育过夜;(5)病毒转导后48h,使用嘌呤霉素筛选培养基替换旧的完全培养基。孵育。(...
  • 在细胞衰老过程中,半乳糖苷酶活性增强的机理是什么?
    答:APS)对衰老人胚肺二倍体成纤维细胞(HDF)衰老相关β半乳糖苷酶(SAβgal)活性的影响.方法 MTT法测细胞活力;免疫组化法测衰老相关β半乳糖苷酶染色阳性细胞数.结果 黄芪多糖可以增强细胞活力,降低SAβgal染色阳性细胞数.结论 黄芪多糖延缓HDF细胞衰老的机制...
  • 请设计一个实验证明某种药物对肿瘤细胞的抑制,说明实验原理,方法几可 ...
    答:细胞培养,加药,MTT法测IC50值,然后通过可以表达肿瘤细胞多少的VEGF(血管内皮生长因子)检测,如果细胞上清液中VEGF浓度降低,说明药物有抑制肿瘤的作用,检测VEGF浓度常用ELISA双抗体夹心法。
  • 用origin 算IC50 值?
    答:两篇文献可以参考下,用SPSS算①用 S P S S软件计算新药的 L D 50 周 一平②小议在 MT T法测细胞增殖抑制率中 I C 5 0 的计算方法 赵 斌, 葛金芳, 朱娟娟, 黄晓晖, 李 俊