动物细胞大规模培养的方法有哪些？各自的特点是什么
悬浮细胞的增大反应器体积，贴壁细胞增大介质总表面积，如大规模转瓶、微载体、固定床等，都要逐级放大。
反应器需搅拌，供气，控温，在线监测溶氧、pH、温度、转速等，无菌……有搅拌罐、固定床、气升式、wave……具体特点百度去吧
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在过去几十年来，动物细胞大规模培养技术经有了很大发展，从使用转瓶(roller bottle) 、CellCube等贴壁细胞培养，发展为生物反应器（Bioreactor）进行大规模细胞培养。
自70年代以来，细胞培养用生物反应器有很大的发展，种类越来越多，规模越来越大，较常见的细胞培养生物反应器有空气提升反应器，中空纤维管反应器，无泡搅拌反应器及篮式生物反应器等。八十年代以来，人们逐渐开始以生物反应器培养代替鼠腹水的方法获得单克隆抗体。
现在，由于动物细胞培养技术在规模和可靠性方面都不断发展，且从中得到的蛋白质也被证明是安全有效的，因此人们对动物细胞培养的态度已经发生了改变。许多人用和兽用的重要蛋白质药物和疫苗，尤其是那些相对较大、较复杂或糖基化（glycosylated）的蛋白质来说，动物细胞培养是首选的生产方式。60年代初，英国AVRI研究所在贴壁细胞系BHK21中将口蹄疫病毒培养成功后，从最初的200ml和800ml玻璃容器开始，很快就放大到30L和100L不锈钢罐的培养规模。使用的是基于Eagle's配方的培养基，补充5%成年牛血清和蛋白胨。1967年以后，Wellcome（现为Cooper动物保健）集团分布于欧洲、非洲和南美洲8个国家的生产厂商，应用此项技术工业规模化生产口蹄疫疫苗和兽用狂犬疫苗，已掌握了5000L的细胞罐大规模培养技术。
目前已实现商业化的产品有：口蹄疫疫苗、狂犬病疫苗、牛白血病病毒疫苗、脊髓灰质炎病毒疫苗、乙型肝炎疫苗、疱疮病毒疫苗、巨细胞病毒疫苗、α及β干扰素、血纤维蛋白溶酶原激活剂、凝血因子Ⅷ和Ⅸ、促红细胞素、松弛素、生长激素、蛋白C、免疫球蛋白、尿激酶、激肽释放酶及200种单克隆抗体等。其中，口蹄疫疫苗是动物细胞大规模培养方法生产的主要产品之一。1983年，英国Wellcome公司就已能够利用动物细胞进行大规模培养生产口蹄疫疫苗。美国Genentech公司应用SV40为载体，将乙型肝炎病毒表面抗原基因插入哺乳动物细胞内进行高效表达，已生产出乙型肝炎疫苗。英国Wellcome公司采用8000L Namalwa细胞生产α干扰素。英国Celltech公司用气升式生物反应器生α、β和γ干扰素；用无血清培养液在10000L气升式生物反应器中培养杂交瘤细胞生产单克隆抗体。美国Endotronic公司用中空纤维生物反应器大规模培养动物细胞生产出免疫球蛋白G、A、M和尿激酶、人生长激素等。
答：分瓶培养，特点：接触抑制
答：无血清悬浮培养技术， 微载体培养技术， 填充床细胞培养技术
答：悬浮培养方法：在悬浮培养前，对动物细胞的生长和生理特性进行充分的考察，是十分必要的，能为悬浮培养提供有益的参考。悬浮培养可以从两个方面入手，一是改变动物细胞的培养环境，实行阶段培养；二是进行代谢调控。 （1）阶段培养 ：一般认为，动物细胞的培养条件应尽量模拟来源动物体内的条件，而且在培养中...
答：1946-：基础培养基和无蛋白培养基 Fischer将血浆中低分子组分分离出来，发现去除低分子的血浆不能很好的维持细胞生长，随后Fischer发现氨基酸是低分子组分中维持细胞生长的必要成分。1955年，Harry Eagle采用Fischer的方法，确认低分子组分中13种氨基酸和8种维生素是必要成分。在此基础上，Eagle发明了minimum ...
答：细胞培养技术有很多用途，如生产分泌性蛋白药物、有毒物质的检测等，故D正确。考点：本题考查动物细胞培养的相关知识。点评：本题意在考查考生的识记能力和理解判断能力，属于容易题。动物细胞的大规模培养方法：根据动物细胞的类型，可采用贴壁培养、悬浮培养和固定化培养等三种培养方法进行大规模培养。
答：1、复苏，把冻存管从液氮中取出来，立即投入37℃水浴锅中，轻微摇动。液体都融化后（大概1-1.5分钟），拿出来喷点酒精放到超净工作台里。把上述细胞悬液吸到装10ml培养基的15ml的离心管中（用培养基把冻存管洗一遍，把粘在壁上的细胞都洗下来），1000转离心5分钟。把上清液倒掉，加1ml培养基把...
答：微载体细胞培养法是一种用于培养锚地依赖性细胞的大规模培养技术。这种培养技术是在生物反应器内加入培养液和一种对细胞无毒害作用的材料支撑的颗粒 (微载体) ，使细胞在微载体表面附着和生长，并通过不断搅拌使微载体保持悬浮状态。培养液中大量的微载体为细胞提供了极大的附着表面，1g微载体其比表面积...
答：(1)培养规模。由于各种固定化系统可以获得相同的细胞密度,且细胞的产率主要取决于细胞的扩散,因此反应器的体积是培养规模放大的主要决定因素。虽然微载体系统可以提供最大的单元操作,但其他系统也可以通过增加单元套数而获得放大。(2)培养方式。除了海藻酸钙包埋法外,其他固定化基质都是多孔型的,能允许大...
答：细胞或细胞聚集体悬浮于液体培养基中增殖。悬浮培养是大规模细胞培养的理想方式，可采用类似于微生物的方法进行悬浮培养。动物细胞较微生物脆弱，易受剪切力等的影响，而细胞固定化技术可较好的保护细胞免受机械力及环境变化的影响，提高细胞的耐受力，促使细胞高密度培养，提高目的产物的产率。
答：当细胞从动植物中生长迁移出来，形成生长晕并增大以后，科学家接着进行传代培养，即将原代培养细胞分成若干份，接种到若干份培养基中，使其继续生长、增殖。通过一定的选择或纯化方法，从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞称为细胞株。当培养超过50代时，大多数的细胞已经衰老死亡，但仍有部分...
