T细胞增殖实验和细胞毒实验各有哪些常用方法并简述其原理和特点?

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-08-12
【答案】:T细胞增殖实验常用3H-TdR掺入法和MTT法。前者是根据3H-TdR能掺入细胞合成的DNA中,细胞增殖水平越高,掺入的3H-TdR越多,细胞培养结束后,用液体闪烁仪测定样品中的放射活性,用于判断细胞的增殖状况。该法灵敏可靠,应用广泛,但需特殊仪器,并有放射性污染。后者是根据细胞增殖时可利用MTT作为细胞内线粒体琥珀酸脱氢酶的底物,形成褐色的甲瓒颗粒并沉淀于细胞内或细胞周围,甲瓒生成量与细胞增殖水平正相关。MTT法敏感性不如3H-TdR掺入法,但操作简单,无放射性污染。
细胞毒实验常用51Cr释放法、凋亡细胞检查法。前者是用Na251CrO4,标记靶细胞,若待检效应细胞能杀伤靶细胞,则51Cr从靶细胞内释出,靶细胞被破坏越多,51Cr释放越多,用γ计数仪测定释出的51Cr放射活性,可计算出待检效应细胞的杀伤活性。后者是根据靶细胞被效应细胞杀伤后,可发生细胞凋亡、DNA断裂的原理,用琼脂糖电泳等方法测定细胞凋亡,用于效应细胞杀伤活性的判断。

  • 毒理学试验设计应包含哪几个部分
    答:如果是急性毒性实验,一般包括:1、实验动物的选择。2、实验动物的喂养环境。3、实验动物的染毒途径。4、剂量选择及分组。5、实验期限及观察指标。6、LD50的计算。生殖毒性试验:生殖毒性试验是评价受试物对哺乳动物(啮齿类大鼠为首选)生殖的影响。与其他的药理学、毒理学研究资料综合比较,以推测受试物...
  • 记忆cd8 t细胞和细胞毒性cd8t细胞的区别
    答:记忆CD8 T细胞和细胞毒性CD8 T细胞的区别 一、记忆CD8 T细胞和细胞毒性CD8 T细胞在功能、特性及作用机制上有所不同。二、1. 记忆CD8 T细胞:定义与功能:记忆CD8 T细胞是一种具有记忆能力的T细胞亚群。它们在初次接触抗原后,能够长期存留并记住这些抗原信息。当再次遇到相同的抗原时,它们能够迅速增殖并...
  • 免疫学的检测方法
    答:3.T细胞亚群检测。4.细胞毒试验。Tc细胞、NK细胞、LAK细胞、TIL细胞等对其靶细胞有直接的细胞毒(杀伤)作用。抗体制备常用的检测方法是51Cr(铬)释放法,将51Cr-Na2CrO4盐水溶液与靶细胞(不同的细胞需不同的靶细胞,如NK细胞的靶细胞为K562),于37℃培养1小时左右,51Cr即进入靶细胞,与胞浆结合,洗去游离的51Cr...
  • 效应细胞毒T细胞与细胞毒性T细胞是一样的么
    答:效应T细胞:初始T细胞经抗原刺激后发生增殖、分化而形成,能合成、表达并分泌多种膜分子和可溶性分子而发挥效应。辅助T细胞:表面有抗原接受器,可以辨识抗原呈递细胞的MHC Class II 分子呈递的抗原片段的T细胞。一旦受到抗原刺激,辅助T细胞就增殖和分化成效应T细胞和记忆T细胞。细胞毒T细胞也称为“杀伤T细胞”...
  • 细胞毒性t细胞代谢特点有哪些
    答:2、对葡萄糖的需求较高:细胞毒性T细胞对葡萄糖的需求较高,在缺氧的环境下,它们可以通过糖酵解来获取能量,同时产生乳酸。3、对线粒体功能有特殊要求:细胞毒性T细胞的活化需要线粒体的正常功能,因为线粒体提供了细胞存活和增殖所需的三磷酸腺苷(ATP)。
  • 具有细胞毒作用的细胞有哪些
    答:具有细胞毒作用的细胞主要包括免疫细胞(如T细胞、巨噬细胞等)和肿瘤细胞。以下是详细的解释:免疫细胞 免疫细胞是机体执行免疫功能的关键细胞。其中,T细胞是一种重要的免疫细胞,能够识别并攻击外来病原体和异常细胞。在某些情况下,T细胞会过度激活或错误地识别自身细胞,从而释放出有毒物质,对正常细胞...
  • 效应T细胞辅助性T细胞细胞毒T细胞什么区别
    答:当Tc 细胞通过其表面的T细胞受体识别与MHC蛋白结合的抗原时,被激活,增值分化成效应T细胞.与TH细胞不同,Tc 细胞一般不分泌淋巴因子,但获得胞毒活性.Tc 细胞在监视身体的细胞和消灭任何显示不正常的抗原细胞如病毒感染细胞、肿瘤细胞和外来移植组织细胞方面有重要作用.
  • 辅助t细胞,抑制t细胞,细胞毒t细胞属于效应还是记忆t细胞?
    答:处女或天然T细胞(Virgin or Natural T cells),他们和抗原接触后分化成效应T细胞和记忆T细胞;记忆T细胞(Memory T cell,Tm),有记忆特异性抗原刺激的作用。T细胞在体内存活的时间可数月至数年。其记忆细胞存活的时间则更长。因此,辅助T细胞、抑制T细胞、细胞毒T细胞、效应T细胞、记忆T细胞是属于不同类...
  • 细胞毒性T细胞和效应细胞毒性T细胞有什么区别吗?
    答:没有区别的。细胞毒性T细胞,也称杀伤性T细胞,是在效应阶段的效应T细胞。它能特异性杀伤带抗原的靶细胞,如移植细胞、肿瘤细胞及受微生物感染的细胞等。Tc细胞的杀伤力较强,可反复杀伤靶细胞,而且在杀伤靶细胞的过程中本身不受损伤。
  • 实验方法|细胞毒CCK-8
    答:吸光度(OD值)的测定,与细胞活力成正比,使得CCK-8的检测效能远超同类试剂如MTT、XTT、MTS或WST-1。实验验证一:细胞毒性与治疗潜力 在验证iZAK2对衰老相关自身免疫的治疗效果时,研究者使用CCK-8对小鼠原代CD4+ T细胞进行评估。实验结果显示,iZAK2处理并未影响细胞活力或细胞质DNA积累,反而在老龄...