制备细胞膜

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-07-02
制备细胞膜的方法

首先是制备一定量的细胞,细胞的来源可以是培养细胞,也可以是某种组织。培养细胞的收集相对简单一些,直接用胰酶将细胞从培养瓶上消化下来,制成细胞悬浮液。比较易碎的组织细胞的收集如肝、脾等,可采用匀浆的方法,稍加研磨就可制成细胞悬液。有些结缔组织,直接研磨不易分离出细胞,可先用适量的胶原酶处理。

细胞制备出来后,进行匀浆处理。匀浆的方法有多种,如用高速打碎机破碎,低渗,玻璃珠与细胞共振荡,冻融法,超声波打碎等。可根据实验需要和实验室条件来选择。无论选择哪种方法,都要尽可能保持膜的完整性。整个操作过程要避免过于激烈,pH、离子强度和渗透压等条件要适中,一般常用中性和等渗溶液。

匀浆产生的细胞裂解物,可通过一系列差速离心再加上一个梯度离心来分离细胞膜与细胞器,梯度是根据细胞器的大小、密度和沉降特性来设计的。匀浆分步分离的第一步是差速离心,在一系列的离心过程中离心力逐渐加大,并且将细胞器加入到具有密度梯度的介质中离心,常用的分离介质有蔗糖、甘油、葡聚糖等。由于每种细胞器的大小和沉降特性不同,因此可被分离出来。如果只是分离细胞中的某种细胞器,可直接根据那种细胞器所对应的相对离心力,在细胞匀浆后进行离心分离。哺乳动物红细胞的结构比较简单,其细胞膜可用低渗离心的方法分离出来。如果是独特的细胞膜,可根据表面电荷的密度采用电泳的方法分离,也可根据大小采用凝胶过滤的方法分离

首先是制备一定量的细胞,细胞的来源可以是培养细胞,也可以是某种组织。培养细胞的收集相对简单一些,直接用胰酶将细胞从培养瓶上消化下来,制成细胞悬浮液。比较易碎的组织细胞的收集如肝、脾等,可采用匀浆的方法,稍加研磨就可制成细胞悬液。有些结缔组织,直接研磨不易分离出细胞,可先用适量的胶原酶处理。
细胞制备出来后,进行匀浆处理。匀浆的方法有多种,如用高速打碎机破碎,低渗,玻璃珠与细胞共振荡,冻融法,超声波打碎等。可根据实验需要和实验室条件来选择。无论选择哪种方法,都要尽可能保持膜的完整性。整个操作过程要避免过于激烈,pH、离子强度和渗透压等条件要适中,一般常用中性和等渗溶液。
匀浆产生的细胞裂解物,可通过一系列差速离心再加上一个梯度离心来分离细胞膜与细胞器,梯度是根据细胞器的大小、密度和沉降特性来设计的。匀浆分步分离的第一步是差速离心,在一系列的离心过程中离心力逐渐加大,并且将细胞器加入到具有密度梯度的介质中离心,常用的分离介质有蔗糖、甘油、葡聚糖等。由于每种细胞器的大小和沉降特性不同,因此可被分离出来。如果只是分离细胞中的某种细胞器,可直接根据那种细胞器所对应的相对离心力,在细胞匀浆后进行离心分离。哺乳动物红细胞的结构比较简单,其细胞膜可用低渗离心的方法分离出来。如果是独特的细胞膜,可根据表面电荷的密度采用电泳的方法分离,也可根据大小采用凝胶过滤的方法分离

制备细胞膜一般使用活的,成熟的红细胞。
因为我们研究细胞膜的性质需要的是纯净的细胞膜.为了这个目的我们需要做的是去除细胞内细胞器和细胞核的膜的干扰
选择红细胞的原因是红细胞在细胞分化的过程中,细胞核和细胞器大都已经退化消失,相比于其他结构复杂的细胞来说,分离的工作要简单很多。
我们所要做的是将红细胞浸在清水中,使它吸水涨破.然后就可以用离心的方法提纯了。
现在我们可以知道为什么一定要用活的细胞了.只有活着的细胞才可以吸水涨破.而且,死亡的细胞的细胞膜不再有流动性和半透性,对于研究细胞膜性质也是不利的

对的。因为还要观察细胞膜的生物膜特性。要活的才知道细胞膜在外界条件改变的时候会做出什么样的反应。

1。哺乳动物成熟红细胞;因为哺乳动物红细胞发育到第六阶段成熟后,细胞质中的细胞器(包括细胞核)会消失,以全力运输氧气,这样经涨破分离后得到较纯净的细胞膜,不存在其他膜系统干扰。
2。涨破(外界浓度低于细胞内部,即低渗状态);不变(等渗。。);皱缩(高渗)
3。新鲜血液中加入抗凝剂(如柠檬酸钠等),血液分层,最下层为红细胞(中间是血小板及白细胞,上为血浆),分离出红细胞后用适量生理盐水稀释。。。

肯定啦.细胞死了膜就失去选择透过性了.而选择透过性是细胞膜最重要的功能特性.

纯属哗扑

  • 制备细胞膜.(1)选材:___.原因:这样的红细胞中没有___和众多的___.(2...
    答:可用于提取纯净的细胞膜.(2)细胞膜相当于半透膜,根据渗透作用,可将细胞放入清水中,细胞由于吸水涨破,通过离心可获得较纯的细胞膜.(3)细胞膜主要成分是脂质和蛋白质,含有少量的糖类,脂质主要是磷脂.故答案为:(1)哺乳动物成熟的红细胞 细胞核 细胞器(2)清水 涨破 (3)①脂...
  • 制备细胞膜选用的实验材料最好是( )A.鸡的成熟红细胞B.蛙的成熟红细胞...
    答:制备细胞膜选用的实验材料最好是哺乳动物成熟红细胞,因为它没有细胞核和细胞器,因而就没有核膜和细胞器膜,放在蒸馏水中使哺乳动物红细胞吸水涨破,流出血红蛋白,就能制备纯净的细胞膜,而鸡、蛙、鱼都不是哺乳类,只有狗是哺乳类,所以C正确.故选:C.
  • 制备细胞膜时除选择哺乳动物成熟红细胞外,以下材料哪种也...
    答:【答案解析】试题分析:制备较纯净的细胞膜,通常不能含有生物内膜系统,而A.B.D均为真核生物细胞,细胞内均有内膜系统,大肠杆菌是原核生物,细胞内没有核膜和各种细胞器的膜,所以C选项符合题意。考点:考查获取较纯净细胞膜的材料。意在考查考生理解所学知识的要点,把握知识间的内在联系的能力。
  • 下列关于制备细胞膜的说法,正确是( )A.制备时应该选用成熟的动物红细...
    答:A、制备细胞膜时应该选用哺乳动物成熟的红细胞,A错误;B、制备原理是红细胞在蒸馏水中过度吸水涨破,B错误;C、实验中用的引流法使细胞吸水涨破,C正确;D、取得的红细胞应该用生理盐水稀释,以观察细胞保持正常形态,作对照,D错误.故选:C.
  • 制备细胞膜的方法
    答:红细胞吸水涨破。然后将红细胞放入蒸馏水中,使内容物流出然后差速离心。2.酶解法 用胶原酶/EDTA 释放细胞 是用硅胶包裹住细胞,然后使用酶裂解细胞,使细胞释放内容物,然后使用差速离心,由于细胞膜上附着这硅胶,密度较大,会沉到试管最底部。取出后使用Nycodenz70%沉淀,最后得到细胞膜。
  • 制备细胞膜选用的实验材料最好是哺乳动物成熟红细胞 处理方法是将细胞置...
    答:因为它没有细胞核和细胞器,因而就没有核膜和细胞器膜,放在蒸馏水中使哺乳动物红细胞吸水涨破,流出血红蛋白,就能制备纯净的细胞膜,而鸡、蛙、鱼都不是哺乳类,只有狗是哺乳类,所以C正确.故选:C. 点评: 本题考查细胞膜的制备取材缘由,意在考查学生识记和理解能力,属于基础题.
  • 制备细胞膜的实验时,用来稀释血液的液体是( )A.生理盐水B.1.5%的氯化...
    答:A、制备细胞膜的实验时,用来稀释血液的液体一定要保持细胞形态,即和细胞内部的液体环境相似,生理盐水是0.9%的氯化钠溶液,和人体环境相似,A正确;B、1.5%的氯化钠溶液,浓度过高,细胞会失水皱缩,B错误;C、蒸馏水浓度过低,细胞会吸水张破,C错误;D、0.3g/ml的葡萄糖溶液,浓度过高,细胞失水...
  • 制备细胞膜的过程中所用的生物学原理和科学方法?
    答:实验原理 1、动物细胞没有细胞壁,不但省去了去除细胞壁的麻烦,而且没有细胞壁的支持和保护,细胞易吸水涨破。2、哺乳动物成熟的红细胞中没有细胞核和具有有膜的细胞器,可以避免细胞膜与其它膜结构混在一起。3、红细胞放入清水中,细胞吸水膨胀直至胀破,细胞内的物质流出,从而得到细胞膜。
  • 制备细胞膜
    答:1.稀释后,可以减少血液中的血浆蛋白等杂物。2.保持渗透压,防止在稀释的时候就发生细胞破裂。3.蒸馏水就是清水啦。红细胞在清水中会吸水胀破,你用其他的比细胞内液浓度低的液体当然也可以,但是通常用的是清水,既方便又效果好。4.因为正常的成熟红细胞是内凹的,吸水之后,里面水多了,当然先是...
  • 为什么制备细胞膜应先利用吸水涨破法,再利用差速离心获取是对的?不要...
    答:细胞的细胞质浓度是高于清水的浓度的,使用清水浸泡细胞,细胞吸水张破便会释放出细胞质,细胞器,细胞器中含有线粒体等密度和大小都不相同的物质,所以在不同速度的离心作用下,便可以分离出不同的细胞器,细胞膜,还可以去除细胞质,所以制备细胞膜先用清水张破,再用 ...