细胞纯化是原代培养前还是传代培养前

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-07-02
细胞纯化是原代培养前还是传代培养前细胞系的建立

传代培养是组织培养常规保种方法之一。也是几乎所有细胞生物学实验的基础。当细胞在培养瓶中长满后就需要将其稀释分种成多瓶,细胞才能继续生长。这一过程就叫传代。原代培养是将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。细胞系(Cell Line):原代培养舞经首次传代成功即成细胞系,由原先存在于原代培养物中的细胞世系对于人类肿瘤细胞,在体外培养半年以上,生长稳定,并连续传代的即可称为连续性株或系。细胞株(Cell Strain):通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物称为细胞株。

区别一:定义不同
原代细胞培养:原代培养是指由体内取出组织或细胞进行的首次培养,也叫初代培养。
传代细胞培养:传代培养是指需要将培养物分割成小的部分,重新接种到另外的培养器皿(瓶)内,再进行培养的过程。对单层培养而言,80%汇合或刚汇合的细胞是较理想的传代阶段。
区别二:特点不同
原代细胞培养:与体内原组织在形态结构和功能活动上相似性大。由于培养的细胞刚刚从活体组织分离出来,故更接近于生物体内的生活状态。这一方法可为研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的手段。同时也为以后传代培养创造条件。
传代细胞培养:当原代培养成功以后,随着培养时间的延长和细胞不断分裂,一则细胞之间相互接触而发生接触性抑制,生长速度减慢甚至停止;另一方面也会因营养物不足和代谢物积累而不利于生长或发生中毒。
区别三:生存率不同
原代细胞培养:过程相对复杂,培养条件要求也更高。
传代细胞培养:一般普通培养条件下都容易生存,传代细胞容易增殖。

区别四:原理不同
原代细胞培养:将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖,这一过程称原代培养。
传代细胞培养:当细胞在培养瓶中长满后就需要将其稀释分种成多瓶,细胞才能继续生长。这一过程就叫传代。传代培养可获得大量细胞供实验所需。传代要在严格的无菌条件下进行,每一步都需要认真仔细的无菌操作。
参考资料1:百度百科词条-原代培养
参考资料2:百度百科词条-传代培养

你好,你说的用酶消化法的人工纯化吧,
酶消化法是比较常用的纯化方法,不仅对贴壁细胞可行,能利用上皮细胞和成纤维细胞对胰蛋白酶的耐受性不同,是两者分开,达到纯化的目的;另外对贴壁细胞与半贴壁细胞及黏附细胞间的分离纯化也是十分有效的.
(1)上皮细胞与成纤维细胞的分离纯化:
两者在胰蛋白酶的作用下,由于成纤维细胞先脱壁,二上皮细胞要消化相当长的时间才脱壁,特别是在原代细胞初次传代和早期传代中两种差别尤为明显,故可采用多次差别消化方法将上皮细胞和成纤维细胞分开,方法步骤如下.
采用常规消化传代方式将0.25%胰蛋白酶注入培养瓶内两次,每次加1ml(25ml培养瓶),来回轻摇1-2次,使胰蛋白酶流过所有细胞表面,然后倒掉.
盖好瓶塞,将培养瓶放在倒置显微镜下观察,发现成纤维细胞变园,部分脱落,立即加入2ml有血清的培养基终止消化.
用弯头吸管轻轻吹打成纤维细胞生长区域(可事先在镜下用记号笔在培养瓶上划出记号).吹打时不要用力,也不要吹打上皮细胞生长区域.吹打结束后,再用少量培养基漂洗一遍,然后加入适量培养基于瓶内继续培养,也可重复上述操作再进行一次.
隔几日后或下次传代时,再进行上述操作,进过几次处理,就可将成纤维细胞去除或者将两者分开。
由步骤可知是传代前。希望对你有帮助,请采纳!

细胞系(cell line)指原代细胞培养物经首次传代成功后所繁殖的细胞群体。 也指可长期连续传代的培养细胞。所以细胞纯化是首次传代成功后所繁殖的细胞群体纯化或连续传代的培养细胞纯化。

  • 原代细胞和传代细胞培养有哪些区别
    答:因此,原代细胞培养主要用于研究细胞的原始状态及其特性,如研究某些疾病的发病机制等。原代细胞培养的技术难度较高,需要严格的无菌操作环境和专业的技术。由于其真实性高,因此常常被用于科学研究中的基础实验。二、传代细胞培养 传代细胞培养是将原代细胞从培养环境中扩增后,进行多次传代培养得到的细胞。这些...
  • 原代细胞培养和传代培养的方法及其:细胞培养和传代
    答:初代培养 原理 将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖,这一过程称原代培养。 仪器、材料及试剂 仪器:培养箱(调整至37℃),培养瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、纱布、手术器械...
  • 原代培养和传代培养的区别
    答:原代培养 通过组织块直接长出单层细胞或用酶或机械方法将组织分散成单个细胞开始培养,在首次传代前的培养可认为是原代培养。传代培养 原代培养形成的单层细胞汇合以后,需要进行分离培养,否则细胞会因生成空间不足或由于细胞密度过大引起营养枯竭,都将影响细胞的生长,这一程序常称为传代或传代培养。简单说...
  • 原代细胞培养小知识
    答:原代细胞的科学定义:原代细胞培养源于直接从机体取材,通常指未经过传代前的初次培养,细胞保持了原始的特性。在实际操作中,我们将从第1到第10代内的细胞统称为原代细胞。由于它们能模拟体内环境,原代细胞在生物医药领域发挥着重要作用,如药物筛选、代谢研究和癌症药物探索。培养原代细胞的要点:解冻时,...
  • 大学医学细胞生物学知识点
    答:4、细胞株:在体外一般可以顺利地传40—50代,并且仍能保持原来二倍体数量及接触抑制行为的传代细胞。5、原代细胞培养:直接从有机体取出组织,通过组织块长出单层细胞,或者用酶消化或机械方法将组织分散成单个细胞,在体外进行培养,在首次传代前的培养称为原代培养。6、传代细胞培养:原代培养形成的单层...
  • 动物细胞培养过程是什么?
    答:取动物组织块——剪碎组织——用胰蛋白酶处理分散成单个细胞——制成细胞悬液——转入培养液中(原代培养)——放入二氧化碳培养箱培养——贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞制成细胞悬液——转入培养液(传代培养)——二氧化碳培养箱.
  • 动物细胞培养中的原代培养是指十代以内的细胞培养?
    答:是的,原代培养是指直接从机体取下细胞、组织和器官后立即进行培养。因此,较为严格地说是指成功传代之前的培养,此时的细胞保持原有细胞的基本性质,如果是正常细胞,仍然保留二倍体数。但实际上,通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。最常用的原代培养有组织块培养和分散细胞培养。
  • 原代细胞和传代细胞培养有哪些区别
    答:体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代,以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞,并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后,由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭,将培养的细胞分散,从容器中取出,以1:2或l:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养,即为传代培养。细胞...
  • 原代细胞和传代细胞培养有哪些区别
    答:1、含义不同 原代培养是直接从生物体获取组织或器官的一部分进行培养,也称初代培养。原代培养是将培养物放置在体外生长环境中持续培养,中途不分割培养物的培养过程。有几方面含义:原代培养中的代并非细胞的代数,因为培养过程中细胞经多次分裂已经产生多代子细胞。传代培养是指需要将培养物分割成小的部分...
  • ...从原代培养物或细胞系中选择和纯化可以获得细胞株。 这句话对吗...
    答:非也非也,1直接从体内取出的细胞、组织和器官进行的第一次的培养物。2一旦已进行传代培养(Subculture)的细胞,便不再称为初代培养,而改称为细胞系3从一个经过生物学鉴定的细胞系用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增殖形成的细胞群,称细胞株,所以原代不可的细胞株,这是考点,另外细胞...