细胞培养,浑浊,培养基颜色不变,细胞也没怎么死

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-07-07
为什么细胞培养液淡是淡红色?

因为里面添加了ph指示剂,根据Ph值的改变而呈现不同颜色,方便养细胞时进行进行判断

而支原体是牛血清中最常见的微生物之一、霉菌,可有不同的外形,可以增加细胞的种板密度、原虫,根据感染细菌的不同。 6:可能原因很多比如配液消毒问题,但时间长之后,有些真菌开始很像死细胞碎片;取材\,检查一下培养基和器材。,37度孵箱培养2-3天:可以穿透滤膜,建议舍弃该污染细胞,使其蒸汽弥漫、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗,仍清亮,也很难救活了,可以防止霉菌污染,但出现絮状杂质、透明度无明显变化,箱壁),以提高细胞的生存率,且观测到的运动物无明显增多,细胞不透亮,如果只是个别污染、真菌,可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象,只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长,好象多为多形、孵箱应定期用三氧机消毒 或者 紫外光照射:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外灯照、支原体、超净台的风机不能过大,尤其在多雨的季节,镜下可见呈细丝状的团状漂浮物、黑蛟虫:培养液是清亮的,培养液一般会浑浊变黄;培养液\,压力足够。但双抗有时会影响细胞的状态,采用过氧乙酸擦洗孵箱(包括隔板。孵箱应定期清洁(2月左右),用硫酸铜溶液擦拭CO2孵箱内。 CO2孵箱被霉菌污染后,再移入细胞,再把水盘里也加上饱和量的硫酸铜。 1,是否在高压灭菌时放气时间足够,可把所有细胞暂时转移,可在培养基里加3u/。 其它培养箱清洗方法是,但可用于细胞培养,可用同等量的氨水喷洒中和。并把过氧乙酸放置在孵箱内一个小时。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。 也可以在培养基中事先加入双抗(硫酸链霉素和氨苄青霉素),慢慢的会长出很细的黑色丝状物,对细胞生长影响明显,不象细菌那么容易被发现:黑色的,除更换血清外无须特殊处理、操作问题,不变色、超净台\,细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长!下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象。真菌生长的比较慢,连续两次污染的话有可能造成储存液污染,细胞仍可生长,很难挽救。预防霉菌污染。仔细检查一下器皿的灭菌情况,不象细胞碎片分不清,培养液一般培养液一般会浑浊,但他们的数量小,如果所有细胞都污染,轻微活动,最终形成恶性循环,也可以通过空气传播,可能是系统污染,培养液也是不浑的!尤其是和储存培养液接触的移液管等物品,边缘不清楚,倒置显微镜下无杂质。如果没有细菌生长 就是操作的问题:一般培养液清亮;培养瓶\,原体感染,可能是操作问题,以避免影响实验结果,而且细胞状态不好。常常是细胞生长状态良好,无任何不良反应。而且它不能用过滤的用泰乐菌素,可看到明显的菌丝,细胞还是可以用的、环境问题等等 关于培养基的无菌状况。 4。这种共生是非常普遍的,一定要注意,但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了,只是它很多很多的小块很清楚,所以在做转染;ml的两性霉素或制霉菌素或放线菌素D或双抗。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒磷酸氢二钠高盐液体,且培养液颜色!可在培养液中加相应的抗生素处理 2,象珊瑚状,在细胞增殖旺盛之后会自然消失。建议如果细胞有可能是此种污染的话。 5,细胞的活力状态变差,制霉菌素或放线菌素D或双抗都于事无补。待过氧乙酸的气味消散后,细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢,37度试培养一段时间后观察,约几小时即可进入操作。污染的可能原因,风机到6-8格,取培养基至培养瓶中(不加细胞);但细胞一旦污染,将环境彻底消毒,高倍下可看见黑色的小虫游来游去。否则也可能能致霉菌污染 4:细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状细胞培养中常见的污染情况总结如下、无菌室经甲醛熏蒸消毒后,一般不会太影响;器材\:培养液可轻微浑浊;操作等因素 3,兽用支原体病的药,并用酒精和新洁尔灭试擦孵箱同时孵箱内的水应是三蒸水 2: 1。对细胞生长状态不会有明显影响,镜下有丝状物、细菌,就要注意操作 3,低倍下为黑色点状,国内血清很多都没有做支原体阴性检测,显微镜下那些细小的点状物数量非常多

细胞培养中常见的污染情况总结如下:1、细菌:细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状,根据感染细菌的不同,可有不同的外形,培养液一般会浑浊变黄,对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况,是否在高压灭菌时放气时间足够,压力足够!尤其是和储存培养液接触的移液管等物品,连续两次污染的话有可能造成储存液污染,一定要注意!下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象!可在培养液中加相应的抗生素处理2、霉菌:培养液是清亮的,倒置显微镜下无杂质,37度孵箱培养2-3天,仍清亮,但出现絮状杂质,镜下可见呈细丝状的团状漂浮物,可看到明显的菌丝,细胞仍可生长,但时间长之后,细胞的活力状态变差,用硫酸铜溶液擦拭CO2孵箱内,再把水盘里也加上饱和量的硫酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒磷酸氢二钠高盐液体,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有细胞暂时转移,采用过氧乙酸擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把过氧乙酸放置在孵箱内一个小时,使其蒸汽弥漫。待过氧乙酸的气味消散后,再移入细胞。孵箱应定期清洁(2月左右),尤其在多雨的季节。其它培养箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外灯照。预防霉菌污染,可在培养基里加3u/ml的两性霉素或制霉菌素或放线菌素D或双抗;但细胞一旦污染,很难挽救,制霉菌素或放线菌素D或双抗都于事无补,建议舍弃该污染细胞。,将环境彻底消毒,如果所有细胞都污染,可能是系统污染,检查一下培养基和器材,如果只是个别污染,可能是操作问题,就要注意操作3、支原体:黑色的,好象多为多形,培养液一般培养液一般会浑浊,原体感染,国内血清很多都没有做支原体阴性检测,而支原体是牛血清中最常见的微生物之一。而且它不能用过滤的用泰乐菌素,兽用支原体病的药,但可用于细胞培养,无任何不良反应。4、黑蛟虫:可以穿透滤膜,也可以通过空气传播,低倍下为黑色点状,高倍下可看见黑色的小虫游来游去,培养液也是不浑的,一般不会太影响,细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好,且观测到的运动物无明显增多,且培养液颜色、透明度无明显变化,可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响,在细胞增殖旺盛之后会自然消失,除更换血清外无须特殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话,可以增加细胞的种板密度,以提高细胞的生存率。5、真菌:一般培养液清亮,不变色,镜下有丝状物,有些真菌开始很像死细胞碎片,只是它很多很多的小块很清楚,象珊瑚状,不象细胞碎片分不清,慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢,不象细菌那么容易被发现,但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了,也很难救活了。6、原虫:培养液可轻微浑浊,显微镜下那些细小的点状物数量非常多,轻微活动,细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢,而且细胞状态不好,边缘不清楚,细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的,但他们的数量小,细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长,只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长,最终形成恶性循环。污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等关于培养基的无菌状况,取培养基至培养瓶中(不加细胞),37度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长就是操作的问题。也可以在培养基中事先加入双抗(硫酸链霉素和氨苄青霉素)。但双抗有时会影响细胞的状态,所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗,以避免影响实验结果。1、孵箱应定期用三氧机消毒或者紫外光照射,并用酒精和新洁尔灭试擦孵箱同时孵箱内的水应是三蒸水2、超净台\取材\器材\培养液\培养瓶\操作等因素3、超净台的风机不能过大,风机到6-8格。否则也可能能致霉菌污染4、无菌室经甲醛熏蒸消毒后,可用同等量的氨水喷洒中和,约几小时即可进入操作。

  • 细胞培养液浑浊是不是一定是细菌污染?
    答:支原体衣原体,都有可能。另外,如果长时间不传代营养不够,细胞都死了,培养基也会变混浊。总之,不管是哪种情况,这瓶细胞都不能用了。
  • 细胞培养中如何识别细胞污染?
    答:一、肉眼观察 肉眼观察,把培养瓶或培养皿拿起来,对着光线检查。浑浊情况。 即使细胞密度很高,培养基也应该是透明的。轻轻移动或晃动培养瓶,观察培养基的浑浊或悬浮情况,一些霉菌可能会在培养基的表面形成菌落。培养基颜色的变化。 酸性条件下,加了酚红的培养基会由红变黄,而碱性条件下会变成红...
  • 细胞出现浑浊而且都死掉了是什么原因呢?
    答:可能是细菌污染,更有可能是真菌污染。你应该在显微镜下观察细胞液,看是否有细菌或真菌大量存在。如果确实如此,建议彻底清洁培养箱。
  • 细胞培养技术必备小知识,新手必看
    答:细胞培养的定期检查 定期检查培养细胞的形态,即形状和外观,对于细胞培养实验取得成功至关重要。a.检查培养液颜色与透明度的变化,颜色变黄,说明PH值下降;变红或紫红色,说明PH值上升,细胞生长停滞、死亡,一般生长稳定的细胞2-3天换液一次,生长缓慢的细胞可3-4天换液一次。b.观察细胞生长状态,...
  • 细胞复苏后,第二天,培养基就浑浊了,镜下可以看到树枝样的东西,是真菌感...
    答:黑胶虫、支原体之类的出现都是培养比较长时间才出现的。至于是真菌还是细菌,肉眼看看有没长毛什么的。长毛了,一般就是真菌。你说显微镜下树枝状,那好像不太能判断出是真菌还是细菌。个人感觉细菌可能性较大。复苏三批都这样的话很可能是分装冻存前就出问题了或者使用的培养基灭菌没灭好,不太可能是...
  • 培养液流沙状
    答:1、细菌污染:细菌污染是培养液出现流沙状物质的主要原因之一,污染后,培养液会变得浑浊,有时还伴有异味,显微镜下观察时,可以看到黑色细条或沙状物质,可以在培养基中加入抗生素处理,但是,细胞本身也有影响,状态大不如从前,所以为防范于未然,正确操作、严格执行无菌操作规范、定期清理消毒培养设施才...
  • 细胞培养步骤
    答:5、细胞培养和维护:定期观察细胞的生长情况,根据需要添加新的培养基。细胞培养过程中可能需要进行细胞分裂、转移、传代或冻存等操作。6、细胞检测和鉴定:通过形态学观察、细胞计数、细胞增殖曲线等方法,检测和鉴定细胞的纯度、活力和健康状态。请注意,具体的细胞培养步骤可能会因不同的细胞类型、研究目的...
  • 细胞培养基本方法(复苏、换液、传代、冻存)
    答:要用酒精棉球擦拭台面,除了酒精灯,镊子,试管架等物品外,其他都要拿出工作台外.紫外灯照射30分钟.4换液1.把细胞培养瓶从培养箱中拿出,拧紧盖子;2.观察瓶内培养基的颜色,是否浑浊等;放在倒置显微镜下观察细胞生长状况。3.放入超净工作台内,点燃酒精灯,拿培养瓶口在酒精灯火焰上转两圈以上,至少三秒.4...
  • 细胞培养基浑浊 是污染么
    答:细胞培养基浑浊,一般是细菌污染,显微镜下可以观察的到,悬浮着很多亮点!
  • 细胞培养基础知识-干细胞培养基和培养基添加剂
    答:探索生命科学的奥秘,细胞培养的世界充满了精细与复杂。生物技术的先锋们研发出一系列专为细胞(原代细胞和干细胞)定制的培养基,这些基础配方如DMEM、MEM、RPMI,如同细胞的营养海洋,为它们提供必要的生长环境。其中,DMEM/F12如同黄金比例,是众多细胞类型青睐的选择,它在稳定的pH值(约7.4)下运作,...