动物细胞培养需要哪些条件
kuaidi.ping-jia.net 作者：佚名 更新日期：2024-06-28
微生物、动物、植物细胞培养的异同点如下：
◆不同点：首先在培养基上,微生物是固体、半固体培养基都有,成分主要是水、无机盐、生长因子、碳源、氮源等.如果是病毒的话要用细菌进行培养；动物的话用天然培养基加生长因子比较好,一般是液体培养基,成分主要是水、葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清；而植物培养基用合成培养基就可以了,一般是固体培养基,成分主要是矿质元素、蔗糖、纤维素、植物激素、有机添加剂.其次是各自培养的原理上的不同,微生物细胞培养的原理是微生物细胞的增殖,动物细胞培养的原理是细胞的增殖,植物细胞培养原理是细胞的全能性.
最后,微生物细胞培养主要是获得其代谢产物或次级代谢产物或得到细胞本身；植物细胞培养是获得新个体或细胞产品,应用与快速繁殖试管苗、细胞产品、人工种子、转基因植物的培育等.动物细胞培养是获得大量新生细胞或细胞产品,应用是获得细胞的产物或细胞等.另外,动物细胞分散用到的是胰蛋白酶,植物是纤维素酶等.
◆ 相同点：两者都需要培养基、都需要无菌操作,防止染菌、培养时候都需要适当的温度等条件.
◆ 综上所述见下表：
微生物 动物细胞 植物细胞
大小（um） 1~10 10~100 10~100
悬浮生长 可以 多数细胞需附着表面才能生长 可以,但易结团,无单个细胞
营养要求 简单 非常复杂 较复杂
生长速率 快,倍增时间为0.5~5小时 慢,倍增时间为15~100小时 慢,倍增时间为24~74小时
代谢调节 内部 内部,激素 内部,激素
环境敏感 不敏感 非常敏感 能忍受广泛范围
细胞分化 无 有 高
剪切力敏感 低 非常高 高
传统变异,筛选技术 广泛使用 不常使用 有时使用
细胞或产物浓度 较高 低 低
由于它们所用的培养基不同,培养是所要求的条件不同所以在批量生产我们所需的目的产物时就要选择相应的生物反应器.在选择生物反应器时要注意到生物反应器在生物反应过程的剪切力、传质问题如气-液质量传递和液-固质量传递.生物反应器是利用生物催化剂为细胞培养（或发酵）或酶反应提供良好的反应环境的设备,通常称为发酵罐或酶反应器.用于污水生物处理的曝气池或厌气消化罐也可作为生物反应器的一类.生物反应器是生物反应过程中的关键设备,它的结构、操作方式和操作条件对生物技术产品的质量、转化率和能耗有着密切关系.现在就三种生物反应器进行说明.
（一）微生物细胞培养生物反应器的选择
生物处理的主体是具有特定功能的各种微生物,由于氧化分解恶臭,微生物细胞一方面获得了生物所需的能量,另一方面获得细胞增殖所需的细胞物质,从而维持了细胞的正常生命活动.微生物有其自身的新陈代谢,代谢活动都是在酶的作用下进行的,只有创造适宜的生存条件,使酶的机能得以充分发挥,微生物才能正常生长,才能利用恶臭物质作为生长所需的能源、碳源和氮源等,因此微生物细胞培养生物反应器的选择首先要确保微生物生长的基本条件.根据微生物的培养特点,一般选择生物反应器为膜生物反应器和光合微生物生物反应器等.
（二）动物细胞培养生物反应器的选择
动物细胞与微生物细胞有很大的差异,对体外培养有严格的要求,如动物细胞对剪切非常敏感,反应器的选择不能有像微生物细胞那样高的剪切力,因此,传统的微生物细胞生物反应器应该经过改造才能适用动物生物反应器.动物细胞培养分为三种类型,一类是悬浮培养,指细胞在培养器中自有悬浮生长的过程,要勇于非贴壁依赖性细胞,此类细胞体外生长不需贴壁,可以采用微生物的方法在培养基中悬浮培养.此类细胞培养可以选择的相应反应器为：搅拌反应器、中空纤维反应器、陶质矩形通道蜂窝状反应器、气升式反应器；另一类是贴壁培养,指必须贴附在固体介质表面上生长的细胞培养,主要适用于贴壁依赖型细胞（亦称贴壁型细胞）,大多数动物细胞都属于这一类型.这类细胞生长需要附着于某些带适量正电荷的固体和半固体表面,细胞贴附生长后,不再是原有的形态,一般呈单一化,主要有成纤维细胞型、上皮型、游走型和多形型等.此类细胞培养可以选择的生物反应器为：搅拌反应器（微载体培养）、玻璃珠床反应器、中空纤维反应器、陶质矩形通道蜂窝状反应器等；再有一类是固定化培养,这类培养既适用于贴壁依赖性细胞,又适用于非贴壁依赖性细胞的包埋培养方式,具有细胞生长密度高、抗剪切力和抗污染能力强的优点.这一类细胞培养的生物反应器选择为：流化床反应器、固化床反应器等.
（三）植物细胞培养生物反应器的选择
植物细胞培养生物反应器最初大多数采用微生物反应器.由于植物细胞与微生物细胞形态结构不同,植物细胞较微生物细胞大,对氧需求小,对剪切力却很敏感,因此不能像微生物培养那样采用高剪切的搅拌,因而,混合显得更重要.目前,由于植物细胞悬浮技术的发展,单细胞培养的成功加上各种新型生物反应器的问世,使得植物细胞有可能像微生物那样在发酵罐中大规模连续培养.用于植物细胞培养的反应器主要有搅拌式、非搅拌式及其他新型生物反应器,另外还有植物细胞固定化反应器和膜生物反应器等.
总之,在选择相应的生物反应器之前要了解该种细胞培养的特点及其注意事项来选择相应的反应器.
动物细胞的培养
答：由于动物细胞生活的内环境还有一些成分尚未研究清楚，所以需要加入动物血清以提供一个类似生物体内的环境，因此在使用合成培养基时，通常需加入血清、血浆等一些天然成分。2.动物细胞培养液的特点：液体培养基、通常含动物血清。3.动物细胞培养的条件：①无菌、无毒的环境：对培养液和所有培养用具进行无菌处理...
动物细胞培养的注意事项
答：原代动物细胞培养：1、实验材料要新鲜，从活体分离材料后要低温保存，并尽快进行细胞分离实验。2、无菌操作。操作时用的培养液，可加平时细胞培养液5倍含量的青链霉素。3、用酶法分离细胞时，注意酶液的浓度和控制消化时间。贴块法分离细胞时，注意动作要轻柔，不要伤到细胞组织，组织块边缘尽量平整有...
动物细胞体外培养条件?
答：此外动物血清中也包含了一些动物的激素和酶，可以促进细胞的发育。②动物细胞培养液的特点：液体培养基、含动物血清。③动物细胞培养的条件：无菌、无毒的环境；营养物质（合成培养基）；温度和pH（36.5±0.5℃，7.2~7.4）；气体环境（氧气和二氧化碳）等。
下列有关动物细胞培养条件的叙述,正确的是
答：无毒的培养环境，A错误；动物细胞培养的培养液中通常需加入血清、血浆等天然成份，B正确；培养液中需通入95%空气和5%的CO2，CO2维持培养液的PH，C错误；多数细胞适宜生存的pH值为7 .2～7.4，D错误。考点：动物细胞培养 点评：本题考查了动物细胞培养条件的相关知识，属于对识记层次的考查。
动物细胞培养的基本过程
答：取动物胚胎或幼龄动物器官、组织。将材料剪碎，并用胰蛋白酶（或用胶原蛋白酶）处理（消化），形成分散的单个细胞，将处理后的细胞移入培养基中配成一定浓度的细胞悬浮液。悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，当贴壁细胞分裂生长到互相接触时，细胞就会停止分裂增殖，出现接触抑制。此时需要将出现接触...
体外细胞培养需要什么条件
答：大多数细胞适宜的pH范围往往是7.2～7.4。在开放式培养中，以5%的二氧化碳气体比例为宜。营养条件 1、培养基 细胞培养基包含细胞生长所需的各种营养物质，包括碳水化合物、氨基酸、无机盐、维生素等。针对不同细胞的营养需求，有多种合成培养基可供选择，如EBSS、Eagle、MEM、RPMll640、DMEM等。2、其他...
1987年美国科学家戈登(Gordon)等人首次从小鼠的乳汁中获得了一种医用...
答：（1）乳腺生物反应器是指哺乳动物乳汁中含有转基因的表达产物．（2）基因表达载体的组成包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等成；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；因为只有母羊才能分泌乳汁，因此导入前必须对山羊胚胎进行性别鉴定．（3）动物细胞培养的条件：无菌无毒、适宜的温度和pH...
植物细胞和动物细胞培养条件和培养基有哪些异同点
答：1.培养基不同：植物细胞（固体培养基），动物细胞（液体培养基） 2.培养基的成分不同：动物细胞培养必须利用动物血清，植物组织培养则不需要，而需要加入植物生长激素 3.产物不同：植物组织培养最后一般得到新的植物个体，而动物细胞培养因为动物体细胞一般不能表达其全能性，因此得到的是只含同一种的...
下列不属于动物细胞培养必需的条件是 [ ] A.无菌、无毒的环境B.适宜...
答：D
人体细胞有细胞壁吗?
答：这就是植物细胞在细胞膜外面，有一层厚而坚硬的细胞壁，而动物细胞没有细胞壁。动物细胞的结构有细胞膜、细胞质、细胞器、细胞核；它们的主要作用是控制细胞的进出、进行物质转换、生命活动的主要场所、控制细胞的生命活动。细胞内部有细胞器，细胞核，双层膜，包含有由DNA和蛋白质构成的染色体。
◆不同点：首先在培养基上,微生物是固体、半固体培养基都有,成分主要是水、无机盐、生长因子、碳源、氮源等.如果是病毒的话要用细菌进行培养；动物的话用天然培养基加生长因子比较好,一般是液体培养基,成分主要是水、葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清；而植物培养基用合成培养基就可以了,一般是固体培养基,成分主要是矿质元素、蔗糖、纤维素、植物激素、有机添加剂.其次是各自培养的原理上的不同,微生物细胞培养的原理是微生物细胞的增殖,动物细胞培养的原理是细胞的增殖,植物细胞培养原理是细胞的全能性.
最后,微生物细胞培养主要是获得其代谢产物或次级代谢产物或得到细胞本身；植物细胞培养是获得新个体或细胞产品,应用与快速繁殖试管苗、细胞产品、人工种子、转基因植物的培育等.动物细胞培养是获得大量新生细胞或细胞产品,应用是获得细胞的产物或细胞等.另外,动物细胞分散用到的是胰蛋白酶,植物是纤维素酶等.
◆ 相同点：两者都需要培养基、都需要无菌操作,防止染菌、培养时候都需要适当的温度等条件.
◆ 综上所述见下表：
微生物 动物细胞 植物细胞
大小（um） 1~10 10~100 10~100
悬浮生长 可以 多数细胞需附着表面才能生长 可以,但易结团,无单个细胞
营养要求 简单 非常复杂 较复杂
生长速率 快,倍增时间为0.5~5小时 慢,倍增时间为15~100小时 慢,倍增时间为24~74小时
代谢调节 内部 内部,激素 内部,激素
环境敏感 不敏感 非常敏感 能忍受广泛范围
细胞分化 无 有 高
剪切力敏感 低 非常高 高
传统变异,筛选技术 广泛使用 不常使用 有时使用
细胞或产物浓度 较高 低 低
由于它们所用的培养基不同,培养是所要求的条件不同所以在批量生产我们所需的目的产物时就要选择相应的生物反应器.在选择生物反应器时要注意到生物反应器在生物反应过程的剪切力、传质问题如气-液质量传递和液-固质量传递.生物反应器是利用生物催化剂为细胞培养（或发酵）或酶反应提供良好的反应环境的设备,通常称为发酵罐或酶反应器.用于污水生物处理的曝气池或厌气消化罐也可作为生物反应器的一类.生物反应器是生物反应过程中的关键设备,它的结构、操作方式和操作条件对生物技术产品的质量、转化率和能耗有着密切关系.现在就三种生物反应器进行说明.
（一）微生物细胞培养生物反应器的选择
生物处理的主体是具有特定功能的各种微生物,由于氧化分解恶臭,微生物细胞一方面获得了生物所需的能量,另一方面获得细胞增殖所需的细胞物质,从而维持了细胞的正常生命活动.微生物有其自身的新陈代谢,代谢活动都是在酶的作用下进行的,只有创造适宜的生存条件,使酶的机能得以充分发挥,微生物才能正常生长,才能利用恶臭物质作为生长所需的能源、碳源和氮源等,因此微生物细胞培养生物反应器的选择首先要确保微生物生长的基本条件.根据微生物的培养特点,一般选择生物反应器为膜生物反应器和光合微生物生物反应器等.
（二）动物细胞培养生物反应器的选择
动物细胞与微生物细胞有很大的差异,对体外培养有严格的要求,如动物细胞对剪切非常敏感,反应器的选择不能有像微生物细胞那样高的剪切力,因此,传统的微生物细胞生物反应器应该经过改造才能适用动物生物反应器.动物细胞培养分为三种类型,一类是悬浮培养,指细胞在培养器中自有悬浮生长的过程,要勇于非贴壁依赖性细胞,此类细胞体外生长不需贴壁,可以采用微生物的方法在培养基中悬浮培养.此类细胞培养可以选择的相应反应器为：搅拌反应器、中空纤维反应器、陶质矩形通道蜂窝状反应器、气升式反应器；另一类是贴壁培养,指必须贴附在固体介质表面上生长的细胞培养,主要适用于贴壁依赖型细胞（亦称贴壁型细胞）,大多数动物细胞都属于这一类型.这类细胞生长需要附着于某些带适量正电荷的固体和半固体表面,细胞贴附生长后,不再是原有的形态,一般呈单一化,主要有成纤维细胞型、上皮型、游走型和多形型等.此类细胞培养可以选择的生物反应器为：搅拌反应器（微载体培养）、玻璃珠床反应器、中空纤维反应器、陶质矩形通道蜂窝状反应器等；再有一类是固定化培养,这类培养既适用于贴壁依赖性细胞,又适用于非贴壁依赖性细胞的包埋培养方式,具有细胞生长密度高、抗剪切力和抗污染能力强的优点.这一类细胞培养的生物反应器选择为：流化床反应器、固化床反应器等.
（三）植物细胞培养生物反应器的选择
植物细胞培养生物反应器最初大多数采用微生物反应器.由于植物细胞与微生物细胞形态结构不同,植物细胞较微生物细胞大,对氧需求小,对剪切力却很敏感,因此不能像微生物培养那样采用高剪切的搅拌,因而,混合显得更重要.目前,由于植物细胞悬浮技术的发展,单细胞培养的成功加上各种新型生物反应器的问世,使得植物细胞有可能像微生物那样在发酵罐中大规模连续培养.用于植物细胞培养的反应器主要有搅拌式、非搅拌式及其他新型生物反应器,另外还有植物细胞固定化反应器和膜生物反应器等.
总之,在选择相应的生物反应器之前要了解该种细胞培养的特点及其注意事项来选择相应的反应器.
答：由于动物细胞生活的内环境还有一些成分尚未研究清楚，所以需要加入动物血清以提供一个类似生物体内的环境，因此在使用合成培养基时，通常需加入血清、血浆等一些天然成分。2.动物细胞培养液的特点：液体培养基、通常含动物血清。3.动物细胞培养的条件：①无菌、无毒的环境：对培养液和所有培养用具进行无菌处理...
答：原代动物细胞培养：1、实验材料要新鲜，从活体分离材料后要低温保存，并尽快进行细胞分离实验。2、无菌操作。操作时用的培养液，可加平时细胞培养液5倍含量的青链霉素。3、用酶法分离细胞时，注意酶液的浓度和控制消化时间。贴块法分离细胞时，注意动作要轻柔，不要伤到细胞组织，组织块边缘尽量平整有...
答：此外动物血清中也包含了一些动物的激素和酶，可以促进细胞的发育。②动物细胞培养液的特点：液体培养基、含动物血清。③动物细胞培养的条件：无菌、无毒的环境；营养物质（合成培养基）；温度和pH（36.5±0.5℃，7.2~7.4）；气体环境（氧气和二氧化碳）等。
答：无毒的培养环境，A错误；动物细胞培养的培养液中通常需加入血清、血浆等天然成份，B正确；培养液中需通入95%空气和5%的CO2，CO2维持培养液的PH，C错误；多数细胞适宜生存的pH值为7 .2～7.4，D错误。考点：动物细胞培养 点评：本题考查了动物细胞培养条件的相关知识，属于对识记层次的考查。
答：取动物胚胎或幼龄动物器官、组织。将材料剪碎，并用胰蛋白酶（或用胶原蛋白酶）处理（消化），形成分散的单个细胞，将处理后的细胞移入培养基中配成一定浓度的细胞悬浮液。悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，当贴壁细胞分裂生长到互相接触时，细胞就会停止分裂增殖，出现接触抑制。此时需要将出现接触...
答：大多数细胞适宜的pH范围往往是7.2～7.4。在开放式培养中，以5%的二氧化碳气体比例为宜。营养条件 1、培养基 细胞培养基包含细胞生长所需的各种营养物质，包括碳水化合物、氨基酸、无机盐、维生素等。针对不同细胞的营养需求，有多种合成培养基可供选择，如EBSS、Eagle、MEM、RPMll640、DMEM等。2、其他...
答：（1）乳腺生物反应器是指哺乳动物乳汁中含有转基因的表达产物．（2）基因表达载体的组成包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等成；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；因为只有母羊才能分泌乳汁，因此导入前必须对山羊胚胎进行性别鉴定．（3）动物细胞培养的条件：无菌无毒、适宜的温度和pH...
答：1.培养基不同：植物细胞（固体培养基），动物细胞（液体培养基） 2.培养基的成分不同：动物细胞培养必须利用动物血清，植物组织培养则不需要，而需要加入植物生长激素 3.产物不同：植物组织培养最后一般得到新的植物个体，而动物细胞培养因为动物体细胞一般不能表达其全能性，因此得到的是只含同一种的...
答：D
答：这就是植物细胞在细胞膜外面，有一层厚而坚硬的细胞壁，而动物细胞没有细胞壁。动物细胞的结构有细胞膜、细胞质、细胞器、细胞核；它们的主要作用是控制细胞的进出、进行物质转换、生命活动的主要场所、控制细胞的生命活动。细胞内部有细胞器，细胞核，双层膜，包含有由DNA和蛋白质构成的染色体。
