菌落总数的检测
菌落总数的测定,一般将被检样品制成几个不同的10倍递增稀释液,然后从每个稀释液中分别取出1mL置于灭菌平皿中与营养琼脂培养基混合,在一定温度下,培养一定时间后(一般为48小时),记录每个平皿中形成的菌落数量,依据稀释倍数,计算出每克(或每ml)原始样品中所含细菌菌落总数。基本操作一般包括:样品的稀释--倾注平皿--培养48小时--计数报告。国内外菌落总数测定方法基本一致,从检样处理、稀释、倾注平皿到计数报告无何明显不同,只是在某些具体要求方面稍有差别,如有的国家在样品稀释和倾注培养进,对吸管内液体的流速,稀释液的振荡幅度、时间和次数以及放置时间等均作了比较具体的规定。检验方法参见:GB4789.2-2010 《食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定》
菌落总数的测定,一般将被检样品制成几个不同的10倍递增稀释液,然后从每个稀释液中分别取出1mL置于灭菌平皿中与营养琼脂培养基混合,在一定温度下,培养一定时间后(一般为48小时),记录每个平皿中形成的菌落数量,依据稀释倍数,计算出每mL(或每克)原始样品中所含细菌菌落总数。菌落总数的测定,一般将被检样品制成几个不同的10倍递增稀释液,然后从每个稀释液中分别取出1mL置于灭菌平皿中与营养琼脂培养基混合,在一定温度下,培养一定时间后(一般为48小时),记录每个平皿中形成的菌落数量,依据稀释倍数,计算出每mL(或每克)原始样品中所含细菌菌落总数。
基本操作一般包括:样品的稀释——倾注平皿——培养48小时——计数报告。检验方法可参见:GB4789.2-94 《中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验
菌落总数测定》,SN0168-92 《中华人民共和国进出口商品检验行业标准 出口食品菌落计数》。
平皿计数法
菌落总数(standardplate-countbacteria):水样在营养琼脂上有氧条件下37℃培养48h后,所得1mL水样所含菌落的总数。
仪器和装置
高压蒸汽灭菌器。
干热灭菌箱。
培养箱(36±1)℃。
电炉。
冰箱。
放大镜或菌落计数器。
pH计或精密pH试剂。
灭菌试管。
平皿直径9cm。
培养基与试剂
营养琼脂成分蛋白胨10g、牛肉膏3g、氯化钠5g、琼脂10~20g、蒸馏水1000mL。
制法将上述成分混合后,加热溶解,调整pH为7.4~7.6,分装于玻璃容器中(如用含杂质较多的琼脂时,应先过滤),经103.43kPa(121℃)灭菌20min,贮存于冷暗处备用。
检验步骤
1)水样处理。
a.饮用水。以无菌操作方法用灭菌吸管吸取1mL充分混匀的水样,注入来菌平皿中,倾注约15mL已熔化并冷却到45℃左右的营养琼脂培养基,并立即旋摇平皿,使水样与培养充分混匀。每次检验时应做一平行接种,同时另用一个平皿只倾注营养琼脂培养基作为空白对照。
待冷却凝固后,翻转平皿,使底面向上,置于(36±1)℃培养箱内培养48h,进行菌落计数,即为1mL水样中的菌落总数。
b.水源水。以无菌操作方法吸取1mL充分混匀的水样,注入盛有9mL灭菌生理盐水的试管中,混匀成1∶10稀释液。
吸取1mL1∶10的稀释液注入盛有9mL灭菌生理盐水的试管中,混匀成1∶100稀释液。按同法依次稀释成1∶1000、1∶10000稀释液等备用。如此递增稀释一次,必须更换一支1mL灭菌吸管。
用灭菌吸管取未稀释的水样和2~3个适宜稀释度的水样各1mL,分别注入灭菌平皿内。以下操作同生活饮用水的检验步骤。
2)菌落计数及报告方法。作平皿菌落计数时,可用眼睛直接观察,必要时用放大镜检查,以防遗漏。在记下各平皿的菌落数后,应求出同稀释度的平均菌落数,供下一步计算时应用。在求同稀释度的平均数时,若其中一个平皿有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平皿作为该稀释度的平均菌落数。若片状菌落不到平皿的一半,而其余一半中菌落数分布又很均匀,则可将此半皿计数后乘2以代表全皿菌落数。然后再求该稀释度的平均菌落数。
不同稀释度的选择及报告方法:
首先选择平均菌落数在30~300者进行计算,若只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时,则将该菌落数乘以稀释倍数报告之(见表82.2中实例1)。
若有两个稀释度,其生长的菌落数均在30~300之间,则视二者之比值来决定。若其比值小于2应报告两者的平均数(如表82.2中实例2)。若大于2则报告其中稀释度较小的菌落总数(如表82.2中实例3)。若等于2亦报告其中稀释度较小的菌落数(见表82.2中实例4)。
若所有稀释度的平均菌落数均大于300,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表82.2中实例5)。
若所有稀释度的平均菌落数均小于30,则应以按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表82.2中实例6)。
若所有稀释度的平均菌落数均不在30~300,则应以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表82.2中实例7)。
若所有稀释度的平板上均无菌落生长,则以未检出报告之。
如果所有平板上都菌落密布,不要用“多不可计”报告,而应在稀释度最大的平板上,任意数其中2个平板1cm2中的菌落数,除2求出每平方厘米内平均菌落数,乘以皿度面积63.6cm2,再乘其稀释倍数作报告。
菌落计数的报告:菌落数在100以内时按实有数报告,大于100时,采用两位有效数字;在两位有效数字后面的数值,以四舍五入方法计算。为了缩短数字后面的零数也可用10的指数来表示(见表82.2“报告方式”栏)。
表82.2 稀释度选择及菌落总数(CFU)报告方式
菌落总数检测操作视频
答:菌落总数是一种衡量食品、水源、土壤等中微生物数量的指标。其中最常用的方法是平板计数法。下面以菌落总数的计算方法为例进行说明:1. 准备工作:将需要检测的样品取适量加入生理盐水中,进行搅拌均匀。2. 筛选平板:选择适合的培养基,熔化后待温度适宜后,将样品倒入平板里面,摇晃平板使培养基均匀分布...
答:微生物检验中菌落总数的不确定度如何评定 在ISO/IEC17025《校准和检测实验室能力的通用要求》中明确指出实验室出具的检测报告应包含有关评定校准或测试结果的不确定度说明,故对测量结果进行不确定度的评定成为检测实验室的重要内容。下面是我为大家带来的关于微生物检验中菌落总数的不确定度如何评定的知识,...
答:日常生活中我们需要进行菌落总数检测的除了我们关心的各种食物外,还有水、化妆品、空气等。每种都有对应的检测标准和方法。此外,还有关于公共场所的卫生标准里也有一些物品是需要进行菌落计数的,比如旅馆里的浴缸,毛巾,拖鞋,卧具,茶具,理发店的理发用具等等,对于这些物品的菌落计数,我们一般会采用用...
答:大肠菌群测定的操作细则 大肠菌群系指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。该菌主要来于人畜粪便,故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量,推断食品中有否污染肠道致病菌的可能。食品中大肠菌群数系以100mL(g)检样内大肠菌群最可能数(MPN)表示。1 设备和材料 1....
答:采用不同的降低菌落总数的方法。菌落总数与健康之间的关系非常密切。如果食品中存在大量的细菌,就有可能引起人体的感染,导致身体出现不适甚至出现疾病。因此,为了保障消费者的健康,重要食品的检测和监管必不可少,以确保食品的卫生质量符合标准,同时也提醒广大市民注意食品的卫生问题。
答:菌落总数用平皿法,单位是个/ml(每毫升或毫克里面有多少的完整的菌落),方法是:在无菌操作的前提条件下,吸取1ml的原液加入到9cm的平皿里,在倒入3-5ml(37℃)的营养琼脂,在37℃的温箱里培养24小时,取出来计算它的菌落单位总数就行.大肠杆菌用发酵法,单位是MPN/100ml(每100毫升或毫克的样品里面最大...
答:、测量细菌常用的单位是:μm 菌落总数测试片检测方法 方法编号:5011 1 适用范围:可用于各类食品及原料中菌落总数的测定。也可用于与食品接触的容器、操作台和其他设备表面的卫生检测。2 方法原理:将营养培养基、凝胶和氯化三苯基四氮唑(TTC)显色剂等加载在试纸片,经加样、培养后,细菌菌落在测试...
答:其具体含义可以这样理解:在特定的培养基上,每个活菌通过繁殖形成肉眼可见的一个菌落,因此菌落数量就是活菌数量,其单位是cfu。这个单位对于微生物学的研究非常重要,因为它能够帮助研究人员了解微生物的数量情况,进而了解微生物的生长情况和对环境的影响。另外,菌落总数的检测在食品工业、医疗保健等领域...
答:这种方法检测的菌落总数是≤10cfu/cm2。卫生手消毒监测的目的是确保手部清洁,以最大程度地减少病原菌和细菌的传播。因此,在有效的手消毒程序后,手中的菌落数应该非常少或为零。通过实施有效的卫生手消毒方案,减少细菌的传播和感染率,保护个人和公共健康。
答:用1mL灭菌吸管吸取1:10样品匀液1mL,注入含有9mL稀释液的试管内,振摇后成为1:100的样品匀液,以此类推,做出1:1000等稀释度的样品匀液,每次换一支吸管。2、接种:一般食品选2~3个稀释度进行检测,含菌量少的液体样品(如饮用纯水和矿泉水等)可直接吸取原液进行检测。将菌落总数测试片(BB202)...