抗原和生物素偶联为什么先偶联BSA
单单回答这个问题来说是一个抗原！半抗原是指小分子物质，比如盐酸克伦特罗、三肽囊素等小分子物质称半抗原，半抗原免疫动物需要和大分子物质（BSA或者OVA等）进行偶联才能进行有效免疫！
生物素（biotin，B）广泛分布于动、植物组织中，常从含量较高的卵黄和肝组织中提取，分子量244．31Da．生物素分子有两个环状结构（如图），其中Ⅰ环为咪唑酮环，是与亲和素结合的主要部位；II环为噻吩环，C2上有一戊酸侧链，其末端羧基是结合抗体和其他生物大分子的惟一结构，经化学修饰后，生物素可成为带有多种活性基团的衍生物——活化生物素。活化生物素可以在蛋白质交联剂的介导下，与已知的几乎所有生物大分子偶联，包括蛋白质，核酸，多糖，脂类等。亲和素（avidin，AV）亦称抗生物素蛋白、卵白素，是从卵白蛋白中提取的一种由4个相同亚基组成的碱性糖蛋白，分子量为68kD，等电点pI=10.5；耐热并耐受多种蛋白水解酶的作用．尤其是与生物素结合后，稳定性更好。生物素与亲和素间的作用是目前已知强度最高的非共价作用，亲和常数（K）为1015mol/L，比抗原与抗体间的亲和力（K=10.5～11L/mol）至少高1万倍。并且，二者的结合稳定性好专一性强，不受试剂浓度，PH环境，抑或蛋白变性剂等有机溶剂影响。由于每个亲和素能结合4个分子的生物素，这一特点可以用于构建一个多层次信号放大系统。因此，BAS即可用于微量抗原、抗体及受体的定量、定性检测及定位观察研究，亦可制成亲和介质用于上述各类反应体系中反应物的分离、纯化。亲和素由于带有一个糖链侧链，导致容易和细胞表面的多糖发生非特异性亲和。因此，链霉亲和素被开发出来。链霉亲和素（streptavidin，SA）是由链霉菌streptomyces avidinii分泌的一种蛋白质，分子量为65kD。链霉亲和素分子由4条相同的肽链组成，其中每条肽链都能结合一个生物素，并且不带任何糖基，因此与亲和素一样，一个链霉亲和素分子也能结合4个生物素分子，二者亲和常数（K）亦为1015mol/L。链霉亲和素的适用范围比亲和素更为广泛。
KLH/BSA/Ovalbumin etc 偶联
小肽/半抗原必须耦合到载体蛋白（KLH，BSA，Ova），才可以获得高效的抗体。一般来说，多肽可以与蛋白偶联的条件如下：1 有一个自由的氨基或羧基2 半胱氨酸上的-SH也可以与载体蛋白偶联目前我公司提供高质量的偶联载体蛋白（KLH，BSA，OVA）
BSA (Bovine Serum Albumin)，即牛血清白蛋白，属于最稳定的和可溶的白蛋白。其分子量为67 x 103 Da （含有59个Lys）。大约有30-35个主要氨基可用于与链接剂发生共轭反应, 使得BSA成为一种很流行的弱抗原化合物载体蛋白。
BSA的不利之处在于在很多实验中，它被封闭剂使用，如果多肽-BSA偶联物的抗血清用于这样的检测分析中，通常会出现假阳性，因为这些血清含有抗BSA的抗体。
KLH (Keyhole Limpet Hemocyanin)，即血蓝蛋白，是在某些软体动物、节肢动物(蜘蛛和甲壳虫)的血淋巴中发现的一种游离的蓝色呼吸色素。血蓝蛋白含两个直接连接多肽链的铜离子，与含铁的血红蛋白类似，它易于氧结合，也易与氧解离，是已知的可与氧可逆结合的铜蛋白，氧化时呈青绿色，还原时呈白色。其分子量450 000～130 000。由于KLH比BSA有更高的免疫原性，因而是最常被选用的载体蛋白。
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答：即其具备免疫反应性，完全抗原既有免疫原性又有免疫反应性。要制备针对半抗原的单抗，常把半抗原和大分子载体（一般为蛋白，常用BSA,OVA,KLH等）偶联，这样新的大分子就具备了免疫原性，用它去免疫动物，才能激发动物的免疫应答，也才会产生针对该半抗原的B细胞克隆。
答：因为多肽抗原分子量很小,免疫效果不明显,所以一般多肽作为抗原时要与大分子进行偶联,比如KLH、BSA等.现在你做的ELISA测KLH是检测血清中的抗体是抗多肽还是KLH的
答：关键需要看偶联的蛋白的特性。需要根据蛋白特性来选择不同的偶联方法，不同的偶联方法针对的功能基团不同，位置当然更加不固定了，活化剂种类更多。人工抗原合成常用的载体：载体表面应首先应具有化学活性基团，这些基团可以直接与抗生素(antibiotic)或农药分子偶联，这是化学偶联制备抗原的前提；其次，载体应...
答：在体外研究中的高脂模拟挑战：BSA偶联棕榈酸钠/油酸钠的析出与溶解问题详解 为了更真实地模拟人体内的高甘油三酯和游离脂肪酸环境，体外研究常需添加高浓度的游离脂肪酸，如油酸。作为细胞模型中的关键试剂，油酸钠和棕榈酸钠（棕榈酸钠，Sodium palmitate）的使用需面对一些技术难题。首先，油酸和棕榈酸虽在...
答：⑶加入特异性抗原试剂:它只与固相上的特异性IgM结合。洗涤。 ⑷加入针对特异性的酶标抗体:使之与结合在固相上的抗原反应结合。洗涤。 ⑸加底物显色:如有颜色显示,则表示血清标本中的特异性IgM抗体存在,是为阳性反应。编辑本段应用亲和素和生物素的ELISA 亲和素是一种糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每个...
答：显示生物素欧联的物质（即抗原）。2．桥式卵白素---生物素（bridged avidin biotin BRAB）技术，是利用卵白素作为桥梁，连接生物素偶联物质和生物素化的过氧化酶，而显示于生物素偶联的物质。生物帮上面有这方面的详细介绍， http://www.bio1000.com/enterprise/ 生命科学企业动态,生物公司动态 ...
答：可以看下面这个示意图：如果没有生物素，链霉亲和素上带有的HRP酶是有限的，因为两个蛋白都有一定的空间结构，空间位阻可能会导致蛋白的某些生物学功能丧失，所以链霉亲和素能够偶联上的HRP数量受限。但是如果用生物素标记HRP，再把生物素-HRP与链霉亲和素一起孵育，这个时候是两个蛋白被生物素这个小分子...
答：可以大大提高缩合效率[8-9],有利于偶联反应的进行...[25]去甲雄三稀醇酮的半抗原与牛血清白(BSA)...ChristopherD.Hupp等[28]利用EDC合成吲哚生物碱的新...
答：因此把亲和素和生物素与ELISA偶联起来,就可大提高ELISA的敏感度。 亲和素-生物素系统在ELISA中的应用有多种形式,可用于间接包被,亦可用于终反应放大。可以在固相上先预包被亲和素,原用吸附法包被固相的抗体或抗原与生物素结合,通过亲和素-生物素反应而使生物素化的抗体或抗在相化。这种包被法不仅可增加吸附的...
答：广泛应用于免疫学、细胞生物学和分子生物学的实验研究领域，以及作为亲和分离制剂，用于相应配基的分离与纯化。以下重点介绍生物素化抗体、抗原及酶结合物的制备方法。1）生物素化抗体制备 (1)BNHS溶液lmg／ml以二甲亚砜(DMSO)制备。(2)将待偶联的抗体溶液以0．1m01／LpH9．0NaHCO。配成1—2mg／m1...
