美蓝染色观察酵母菌形态实验得注意事项有哪些?关键点在哪里?

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-07-02
用美蓝染色观察酵母菌在显微镜下的形态????、、

显微镜下看到的是单细胞酵母 酵母不形成菌落的

酵母菌是不运动的单细胞真核微生物,其大小通常比常见细菌大几倍甚至十几倍。美蓝是一种无毒性的染料,它的氧化型呈蓝色,还原型无色。用美蓝对酵母的活细胞进行染色时,由于细胞的新陈代谢作用,细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型,因此,具有还原能力的酵母活细胞是无色的,而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色,借此即可对酵母菌的死细胞和活细胞进行鉴别。

一、目的和要求

1.观察酵母菌的出芽生殖方式,学习区分酵母菌死活细胞的实验方法。
2.掌握酵母菌的一般形态特征及其与细菌的区别。

二、基本原理

1.形态观察:酵母菌是不运动的单细胞真核微生物,通常比常见细胞大几倍甚至十几倍。大多数酵母菌以出芽方式进行无性繁殖,有的分裂繁殖;有性繁殖是通过接合产生子囊孢子。

2.死活鉴定:美蓝是一种无毒性的染料,它的氧化型呈蓝色,还原型呈无色。用美蓝对酵母的活细胞进行染色时,由于细胞的新陈代谢作用,细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。因此,具有还原能力的酵母活细胞是无色的,而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则成蓝色或淡蓝色。

三、菌种:酿酒酵母的斜面培养物
染液:吕氏碱性美蓝染液

四、操作步骤
制备酵母菌的菌悬液——在载玻片中央滴加1滴吕氏——碱性美蓝染色液——滴加1滴酵母菌的菌悬液于染色液中——盖上盖玻片——放置3分钟——高倍镜下观察——30分钟后再观察
关键步骤及注意事项

1、染液不宜过多或过少,否则,在盖上盖玻片时,菌液溢出或出现大量气泡。

2、用镊子取一块盖玻片,先将一侧与菌液接触,然后慢慢将盖玻片放下,使其盖在菌液上,盖玻片不宜平着放下,避免气泡产生。

五、实验报告:
绘图说明所观察的酵母菌的形态特征

六、预习
微生物大小的测定

  • 伊红美蓝是染什么的
    答:伊红美蓝是一种用于细胞染色的染料,又称瑞氏染料,是碱性染料美蓝(Methylene blue)和酸性染料黄色伊红(Eosin Y)的合称。用甲醇作瑞氏染料溶剂,即成瑞氏染液,或称伊红美蓝染液。伊红钠盐的有色部分为阴离子,无色部分为阳离子,其有色部分为酸性,故称伊红为酸性染料。美蓝通常为氯盐是碱性的,...
  • 求一个分离酵母菌用的培养基方案,最好原料是便宜易得的,本人不想要带有...
    答:2. 培养:用无菌吸管取0.1ml培养后的菌液,注入另一试管的乳酸马铃薯葡萄糖培养液中,置28至30℃下再培养24小时或稍长时间(注意不要过长,以免霉菌生长)。3. 观察:取少许菌液,用无菌操作法置于载玻片中央的0.1%美蓝染色液中,混匀后加盖玻片制成水浸片。使用低倍镜和高倍镜观察酵母菌的...
  • 如何分离酵母菌
    答:马铃薯葡萄糖琼脂培养基 参考资料:http://zhidao.baidu.com/question/43132266.html?si=6
  • 在进行酵母菌死活率统计时,随时间延长,统计结果会有什么变化?分析其中...
    答:因此,具有还原才能的酵母活细胞是无色的,而死细胞或代谢作用微弱的朽迈细胞则呈蓝色或淡蓝色,借此即可对酵母菌的逝世细胞和活细胞进行辨别。@美蓝浓度高了,代谢不太活泼的活细胞也会被染色,从而使视察到的死细胞较多,活细胞较少;反之,则代谢微弱的细胞也能还原美蓝,不被染色,从而使观察到的死细胞...
  • 为什么酵母经美蓝染色后会出现蓝色酵母和无色酵母?
    答:美蓝可以用于对酵母的活细胞进行染色,这是因为活细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝从蓝色的氧化型变为无色的还原型。然而,死细胞或代谢缓慢的老细胞,由于它们缺乏这种还原能力或还原能力极弱,无法使美蓝发生还原反应,因此它们被美蓝染成蓝色或淡蓝色。因此,在实验中会出现蓝色酵母和无色酵母。
  • 酵母菌和霉菌在孟加拉红培养基上培养的形态如何鉴别呢?
    答:粉红色基本上是酵母,白色基本上霉菌,大的,白的,青绿色的,边缘有菌丝的都是霉菌。小的,边缘光滑的是酵母。观察建议:1、用放大镜,有解剖镜更好。2、挑出培养基里的菌苔做水压化开加盖玻片在显微镜下看。有美蓝染色更好。3、培养时间到后改变培养温度,高点或低点继续培养,看长大后的菌丝或孢子...
  • 白假丝酵母菌的染色方法
    答:白假丝酵母菌的染色方法如下:1、菌液准备将各种假丝酵母菌标准菌株及临床分离株分别接种沙保弱琼脂,35℃培养48h,挑取菌落,混匀2ml无菌蒸馏水中,在浊度仪上调整菌液浓度为4个麦氏单位(约8×108/m1)。2、选择适合假丝酵母菌生长繁殖的液体沙保弱培养基(100ml蒸馏水中含葡萄糖5g,蛋白胨10g)作...
  • 吕氏碱性美蓝染液浓度和作用时间的不同,对酵母菌死细胞数量有何影响...
    答:我们做的时候0.5h后死细胞增多了,0.1%的也比0.05%的死亡率要高。但是美蓝是无毒染料,所以我感觉应该是浓度高的导致细胞加速脱水的原因
  • 如何培养微生物?
    答:实验二 土壤中微生物分离纯化培养实验三 菌种保藏实验四 细菌形态观察及单染色实验五 放线菌及霉菌形态观察实验六 革兰氏染色及芽孢染色实验七 酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴定实验八 微生物直接计数法及测微技术实验九 大肠杆菌生长曲线的测定实验十 水中细菌总数的测定实验十一细菌细胞的生化反应实验实验十二噬菌体...
  • 观察大肠杆菌和酵母菌时分别用什么染色剂?
    答:前者用伊红美蓝培养基 后者通常采用菌落形态去鉴定 当然都可以用原位探针,PCR等分子手段去做