大肠菌群检验记录如何习

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-08-26
测定大肠菌群数说明了什么问题?为什么要用大肠菌群作为检验指标???

因大肠杆菌在粪便中数量极多,故常用为检查水源是否被粪便污染的标志

大肠菌群检验方法:
  
由于大肠菌群指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌,即:需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。因此大肠菌群的检测一般都是按照它的定义进行。
  目前国内采用的进出口食品大肠菌群检测方法主要有国家标准和原国家商检局制订的行业标准。两个标准方法在检测程序上略有不同。

(一)国家标准:国家标准采用三步法,即:乳糖发酵试验、分离培养和证实试验。
  乳糖发酵试验:样品稀释后,选择三个稀释度,每个稀释度接种三管乳糖胆盐发酵管。36±1℃培养48±2h,观察是否产气。
  分离培养:将产气发酵管培养物转种于伊红美蓝琼脂平板上,36±1℃培养18-24h,观察菌落形态。
  证实试验:挑取平板上的可疑菌落,进行革兰氏染色观察。同时接种乳糖发酵管36±1℃培养24±2h,观察产气情况。
  报告:根据证实为大肠杆菌阳性的管数,查MPN表,报告每100ml(g)大肠菌群的MPN值。
  具体操作参见GB4789.3-94 《中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验 大肠菌群测定》

(二)原国家商检局制订的行业标准,等效采用美国FDA的标准方法,用于对出口食品中的大肠杆菌进行检测。本方法采用两步法:
  推测试验:样品稀释后,选择三个稀释度,每个稀释度接种三管LST肉汤。36±1℃培养48±2h,观察是否产气。
  证实试验:将产气管培养物接种煌绿乳糖胆盐(BGLB)肉汤管中,36±1℃培养48±2h,观察是否产气。以BGLB产气为阳性。查MPN表,报告每ml(g)样品中大肠菌群的MPN值。
  具体操作参见 SN0169-92 《中华人民共和国进出口商品检验行业标准 出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法》

选取菌落数在15-150 之间的测试片,计数其红色有气泡的菌落数,两个测试片的平均菌落数乘以稀释倍数即为每克(或毫升)样品中的大肠菌群菌落形成单位(CFU )数。如果所有稀释度测试片上的菌落数都小于15 ,则计数稀释度最低的测试片上的平均菌落数乘以稀释倍数报告;如果所有稀释度的测试片上均无菌落生长,则以小于1 乘以最低稀释倍数报告;
如果最高稀释度的菌落数大于150 ,计数最高稀释度的测试片上的平均菌落数乘以稀释倍数报告。计数菌落数大于150 的测试片时,可计数一个或两个具有代表性的方格内的菌落数,换算成单个方格内的菌落数后乘以20 即为测试片上估算的菌落数(圆形生长面积为20cm2 , )。
报告单位以CFU/g (或CFU/mL )表示。

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