什么是单克隆抗体?

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-08-06
什么叫单克隆抗体?

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单克隆抗体的基本概念 抗体是由B淋巴细胞分化形成的浆细胞合成、分泌的。每一个B淋巴细胞在成熟的过程中通过随机重排只产生识别一个抗原的抗原受体基因。动物脾脏有上百万种不同的B淋巴细胞系,重排后具有不同基因不同的B淋巴细胞合成不同的抗体。当机体受抗原刺激时,抗原分子上的许多决定簇分别激活各个具有不同基因的B细胞。被激活的B细胞分裂增殖形成效应B细胞(浆细胞)和记忆B细胞,大量的浆细胞克隆合成和分泌大量的抗体分子分布到血液、体液中。如果能选出一个制造一种专一抗体的浆细胞进行培养,就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群,即单克隆。单克隆细胞将合成针对一种抗原决定簇的抗体,称为单克隆抗体

单克隆抗体是由无性繁殖的单克隆杂交瘤细胞群产生的高纯度单一抗体。
特点为特异性强、纯度高。单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤(hybridoma)抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群,可制备针对一种抗原表位的特异性抗体即单克隆抗体。制备过程1. 免疫动物免疫动物是用目的抗原免疫小鼠,使小鼠产生致敏B淋巴细胞的 过程。 一般选用6-8周龄雌性BALB/c小鼠,按照预先制定的免疫方案进行免疫注射。 抗原通过血液循环或淋巴循环进入外周免疫器官,刺激相应B淋巴细胞克隆,使其活化、增殖,并分化成为致敏B淋巴细胞。2.细胞融合采用二氧化碳气体处死小鼠,无菌操作取出脾脏,在平皿内挤压研磨,制备脾细胞悬液。 将准备好的同系骨髓瘤细胞与小鼠脾细胞按一定比例混合,并加入促融合剂聚乙二醇。在聚乙二醇作用下,各种淋巴细胞可与骨髓瘤细胞发生融合,形成杂交瘤细胞。3.选择性培养选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤细胞,一般采用HAT选择性培养基。在HAT培养基中,未融合的骨髓瘤细胞因缺乏次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶,不能利用补救途径合成DNA而死亡。 未融合的淋巴细胞虽具有次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶,但其本身不能在体外长期存活也逐渐死亡。 只有融合的杂交瘤细胞由于从脾细胞获得了次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶,并具有骨髓瘤细胞能无限增殖的特性,因此能在HAT培养基中存活和增殖。4.杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞,只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞,因此,必须进行筛选和克隆化。通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。采用灵敏、快速、特异的免疫学方法,筛选出能产生所需单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞,并进行克隆扩增。经过全面鉴定其所分泌单克隆抗体的免疫球蛋白类型、亚类、特异性、亲和力、识别抗原的表位及其分子量后,及时进行冻存。5.单克隆抗体的大量制备单克隆抗体的大量制备主要采用动物体内诱生法和体外培养法。(1)体内诱生法 取BALB/c小鼠,首先腹腔注射0.5ml液体石蜡或降植烷进行预处理。1-2周后,腹腔内接种杂交瘤细胞。杂交瘤细胞在小鼠腹腔内增殖,并产生和分泌单克隆抗体。约1-2周,可见小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水,即可获得大量单克隆抗体。(2)体外培养法 将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养。在培养过程中,杂交瘤细胞产生并分泌单克隆抗体,收集培养上清液,离心去除细胞及其碎片,即可获得所需要的单克隆抗体。但这种方法产生的抗体量有限。各种新型培养技术和装置不断出现,大大提高了抗体的生产量。

单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤(hybridoma)抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。
用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群,可制备针对一种抗原表位的特异性抗体即单克隆抗体。
单克隆抗体是人工制备的杂交瘤细胞生产的,杂交瘤细胞是由一个经抗原激活后的B细胞与一个骨髓瘤细胞融合形成。单克隆抗体优点:纯度高,灵敏度高,特异性强,交叉反应少,制备的成本低。缺点:对技术有一定的要求,而且通过抗原的化学处理很容易丢失表位

单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原决定簇的抗体。
单克隆抗体通常采用杂交瘤技术制备。用人工方法使骨髓瘤细胞(纯系小鼠的腹水瘤型浆细胞)与已用抗原致敏并能分泌某种抗体的淋巴细胞(常用致敏动物的脾细胞,起作用的是其中的B细胞)融合而成的。这种融合细胞既具有肿瘤细胞能大量、无限繁殖的特性,又具有B细胞能合成分泌特异性抗体的能力。由于一个B细胞克隆只针对一个抗原决定簇产生相对应的抗体,所以一个B细胞与骨髓瘤细胞融合而成的单个杂交瘤细胞,也只产生某种单一的抗体。采用适当方法把杂交瘤细胞分离出来,进行单个细胞培养,使之大量繁殖,则在该培养液中增殖而形成的细胞克隆,只产生完全均一的、单一特异性的抗体,即得到单克隆抗体。

由经过特定的抗原处理过的效应B细胞和骨髓瘤细胞杂交得到的杂交瘤细胞产生的具有特异性识别某抗原上的某一个特定抗原决定簇的抗体。由于是由单一杂交瘤细胞产生的纯抗体,故称单克隆抗体。

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  • 什么是单克隆抗体
    答:单克隆抗体是指将特定的效应T细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行动物细胞融合,形成杂交瘤细胞,该杂交瘤细胞可以长时间存在并合成特定抗体。
  • 什么叫单克隆抗体?
    答:单克隆细胞将合成针对一种抗原决定簇的抗体,称为单克隆抗体。
  • 单克隆抗体是什么意思?
    答:单克隆抗体意思 定义1:高度均质性的特异性抗体,由一个识别单一抗原表位的B细胞克隆所分泌。一般来自杂交瘤细胞。 定义2:只识别一种表位(抗原决定簇)的抗体,来自单个B淋巴细胞的克隆或一个杂交瘤细胞的克隆。
  • 单克隆抗体是什么
    答:单克隆抗体是一种由单一克隆细胞产生的均一抗体。单克隆抗体是生物技术领域的一个重要成果。下面是关于单克隆抗体的详细解释:详细解释:1. 定义与来源:单克隆抗体是指从单一的免疫细胞克隆产生的同一种高度纯化的抗体。当免疫系统遭遇外来抗原时,会产生抗体进行防御。单克隆抗体技术通过特定的实验室手段...
  • 什么是单克隆抗体
    答:单克隆抗体是一种由单一克隆的B细胞衍生而来的抗体。单克隆抗体的详细介绍如下:单克隆抗体是一种高度特异性的抗体,与传统的多克隆抗体相比,其独特之处在于其来源的单一性和高度的均一性。单克隆抗体的制备过程涉及将特定的抗原刺激机体后,引发机体的免疫反应,进而产生特定的B细胞。这些B细胞经过特定的...
  • 单克隆抗体是什么东西呀
    答:纯系的英文为Clone,音译就是克隆。由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体。单克隆抗体能目标明确地与单一的特异抗原决定簇结合,就象导弹精确地命中目标一样。另一方面,即使是同一个抗原决定簇,在机体内也可以由好几种克隆来产生抗体,形成好几种单克隆抗体混杂物,称为多克隆抗体。
  • 什么叫单克隆抗体?
    答:单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。1、单克隆抗体制备的宿主动物一般选用BALB/c小鼠,鼠单抗的应用范围相当广泛,一些国内外公司均开发出了兔的单克隆抗体制备技术。2、单克隆抗体是亲和层析中重要的配体,单克隆抗体对抗原的识别,与多克隆抗体有很大的不同。不...
  • 什么是单克隆抗体?
    答:由单个细胞克隆产生的抗体叫单克隆抗体。他可以和相应抗原的单个抗原决定簇相结合。单克隆抗体在分子结构、氨基酸序列和特异性等方面都是一致的。参考资料:http://www.ydbiotech.com/tupian/Article_Show.asp?ArticleID=66
  • 什么是多克隆抗体?什么是单克隆抗体?说明其在诊断鉴定病毒中的作用...
    答:Koheler等用淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,形成了能在体外无限生长,又能分泌特定抗体的杂交瘤细胞。通过筛选和分离,得到单个细胞杂交瘤系,它能产生针对单一抗原决定簇的抗体,即单克隆抗体。由于单克隆抗体只识别抗原上的单一抗原决定簇,特异性强,少或不产生交叉反应,且可长期无限量供应,因此,单...
  • 什么叫单克隆抗体,有何意义
    答:单克隆抗体(以下简称单抗)药物是抗体类药物中最重要的一类。按照人源化程度的不同,单抗药物可以分为鼠源单抗、嵌合单抗、人源化单抗和全人源单抗:1>鼠源单抗:为早期的单抗药物,由于其为异源蛋白,因此在人体中具有免疫原性,易引发人体的抗鼠单抗免疫反应。综合来看,因鼠源单抗副作用大、半衰期短...