测大肠杆菌要用菌落计数器吗?

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-08-26
建食品微生物实验室主要检测菌落总数和大肠杆菌需要哪些器材?

高压灭菌锅、生化培养箱、干燥箱、恒温水浴锅、显微镜、电子秤、称量纸、蒸馏水器、冰箱、无菌室、超净工作台 、酒精灯、烧杯、大小试管、锥形瓶、剪刀、镊子、1ml10ml吸管或移液枪、吸耳球、平皿、接种针

多管发酵法。
多管发酵法是一种检测水体中大肠杆菌的传统方法,这种方法是在44.5℃的含有荧光底物的培养基上连续培养24h,而后能产生分解荧光底物——葡萄糖醛酸酶,从而释放出荧光产物,进而使培养基在紫外光照射下产生特征荧光。此方法可被用来对原样品中的菌落数作统计学估计。
在单料或双料乳糖胆盐发酵管内发酵,分离培养试验,利用伊红美蓝培养皿分离,接着是在乳糖发酵管中进行二次发酵,最后通过芽孢染色、革兰氏染色、显微镜观察等来完成。多管发酵法对试验条件要求不高,成本低,但是检测时间较长,容易受其他条件干扰,进而影响到测定结果的精确度。

扩展资料:
注意事项:
1、检样时注意无菌操作。
2、稀释时采用的稀释液可以用磷酸盐缓冲液或生理盐水,接种时可采用九管法,设置三个梯度,分别为0.1g/mL、0.01g/mL、0.001g/mL,每一个稀释度的试管应充分混匀。
3、每次实验需要有阴性对照。
4、使用小倒管培养基配制时,为排净气泡,灭菌时不要把试管的盖子盖的太紧,灭菌后注意观察一下倒管中的气体是否排完全、
5、高压灭菌后等高压灭菌锅的压力表达到0,取出培养基放到冰箱冷却,效果会比较好。
参考资料来源:百度百科-大肠杆菌测试片
参考资料来源:百度百科-大肠杆菌

GB 4789—2012食品微生物学检验 大肠菌群计数 第二法 大肠菌群平板计数法,6.2.2.2将10 mL~15 mL 冷至45? ℃±0.5? ℃的结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA)倾注于每个平皿中。小心 旋转平皿,将培养基与样品匀液充分混匀。待琼脂凝固后,再加3 mL~4 mL? VRBA-MUG覆盖平板表层。 凝固后翻转平板,36? ℃±1? ℃培养18 h~24 h。
6.3平板菌落数的选择
选择菌落数在10 CFU~100 CFU之间的平板,暗室中360 nm~366 nm? 波长紫外灯照射下,计数平板 上发浅蓝色荧光的菌落。 BD- C1型大肠埃希氏菌计数器是北京启航博达科技有限公司生产的一种数字显示式自动细菌检验仪器。检测菌落的同时可以进行计数,上面:6W紫外灯通过窄带滤光片(面积:200X50MM)滤去可见光发出在30cm距离内产生360 nm~366 nm 波长紫外光,强度约为1200 μW/cm2,观察各种有荧光出现的检测结果,下面:由计数器、探笔、计数池,等部分组成,计数器采用CMOS集成电路和高保真语音芯片精心设计,计数时同步语音报读,LED数码管显示,字高13mm,清晰明亮,配合专用探笔,计数灵敏准确。记数池内有荧光灯照明,菌落对比清楚,便于观察。适用于食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠埃希氏菌计数(GB 4789—2012)大肠埃希氏菌平板计数法,使用方便、安全、可靠。 可应用于医疗卫生、食品安全监督、各级疾病控制中心、各级工商、检验检疫、自来水厂、矿泉水厂、饮料厂、海洋监测、质量监督、环境保护等部门

你只要把菌液稀释三个浓度,然后再倒平板,然后再算就好

GB 4789.3—2010 食品微生物学检验 大肠菌群计数 第一法 大肠菌群MPN 计数法不需要菌落计数器, 第二法 大肠菌群平板计数法,应选取菌落数在15 CFU~150 CFU 之间的平板,最多150个菌落,使用还是不使用菌落计数器计数你自己选择吧。

不需要,大肠菌群MPN 计数法不需要菌落计数,我们的微生物实验用的就是这个方法来测的!!!菌落计数器是用来测菌落数量的,不是测大肠杆菌的数量!!

  • 大肠杆菌检测需要哪些仪器及耗材
    答:常用仪器:灭菌锅、恒温培养箱、鼓风干燥箱,冰箱,电子天平,均质器,菌落计数器,PH计,显微镜,超净工作台。产品名称 无菌吸管、锥形瓶、玻璃培养皿、pH试纸、试管、烧杯、量筒、试管刷、洗耳球、试管架、均质袋、移液器,酒精灯、接种环。平板计数琼脂培养基......
  • 水中大肠杆菌的测定实验步骤
    答:经最后证实为阳性(产气,革兰氏阴性杆菌)的试管百分比乘以于8.2.5条中计数的平板菌落数,再乘以稀释倍数,即为每克(毫升)样品中大肠菌群数。例:10-4样品稀释液lmL,在VRBA平板上有100个典型和可疑菌落,挑取其中10个接种BGLB肉汤管,证实有6个阳性管,则该样品的大肠菌群数为:100×6/10×104/g(mL)=6.0×105/g...
  • 微生物实验室仪器配置 哪些必不可少
    答:菌落计数器可协助操作者计数菌落数量。通过放大,拍照,计数等方式准确的获取菌落的数量。04灭菌锅 微生物学所用到的大部分实验物品、试剂、培养基都应严格消毒灭菌。灭菌锅也有不同大小型号,用户需要根据自己的需要选购。05离心机 用于收集微生物菌体以及其他沉淀物。离心机有冷冻和常温之分。有些样品由于...
  • 乳品中大肠杆菌检测国标GB/T4789.38-2008的具体步骤及达标的标准_百度...
    答:可肉眼观察计数,或用菌落计数器、放大镜、PetrifilmTM 自动判读仪计数。蓝色有气泡的菌落确认为大肠杆菌,不论蓝色的深浅,部分蓝色的带气泡菌落也判定为大肠杆菌。圆形培养膜边缘及边缘以外的菌落不计数。当测试片出现大量气泡、不明显的小菌落,培养区呈蓝色时,需要进一步稀释样品匀液,重新检验。 14 ...
  • 如何检测大肠杆菌
    答:TEMPOCC法是TEMPO仪器上根据BAM方法专门用于24h计数食品中大肠杆菌群的方法。该法是为了获得和AOAC官方方法966.24及美国公共健康联合会检测乳制品检测方发(SMEDP)一致的效果。TEMPO系统根据阳性空的大小和数目来推算出原始样本中大肠杆菌群数目。/iknow-pic.cdn.bcebos.com/9922720e0cf3d7caaee9549ffc1fbe...
  • 大肠杆菌检测方法国标是用什么方法检测的
    答:大肠菌数指数:指每立升中大肠菌群数,采用乳糖发酵法检测。中国卫生标准是每1000ml饮水中不得超过3个大肠菌群,瓶装汽水和果汁中每100ml大肠菌群不能超过5个。3、全自动微生物定量分析仪(TEMPO)检测法 全自动微生物定量分析(TEMPO)仪大肠杆菌群计数检测有TEMPOTC和TEMPOCC两种方法。TEMPOTC的开发是...
  • 检测食品中大肠杆菌是什么样子的?
    答:平板菌落计数:选取菌落数在15CFU~150CFU之间的平板,分别计数平板上出现的典型和可疑大肠菌群菌落,其中典型菌落的特征为紫红色,菌落周围有红色的胆盐沉淀环,菌落直径为0.5mm或更大。证实实验:先在煌绿乳糖胆盐肉汤管上做好标注。将接种环置于红外灭菌器中灭菌,再用接种环从结晶紫中性红胆盐琼脂平板...
  • 大肠杆菌与大肠菌群检测方法
    答:GB4789.3-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》中的规定操作步骤:1、乳糖发酵试验:样品稀释后,选择三个稀释度,每个稀释度接种三管乳糖胆盐发酵管。36±1℃培养48±2h,观察是否产气。2、分离培养:将产气发酵管培养物转种于伊红美蓝琼脂平板上,36±1℃培养18-24h,观察菌落形态...
  • 大肠杆菌 乳酸菌如何做实验检测
    答:凡平板上有典型菌落者,则证实为粪大肠菌群阳性。4.2 结果报告 根据证实为粪大肠菌群的阳性管数,查MPN检索表,报告每100mL(g)粪大肠菌群的MPN值 乳酸菌的检测:一 概述 乳酸菌是指一群能分解葡萄糖或乳糖产生乳酸,需氧和兼性厌氧,多数无动力,过氧化氢酶阴性,革兰氏阳性的无芽胞杆菌和球菌。...
  • 海鲜牡蛎检测菌落总数和大肠杆菌用什么方法检测
    答:菌落总数用平皿法,单位是个/ml(每毫升或毫克里面有多少的完整的菌落)方法是:在无菌操作的前提条件下,吸取1ml的原液加入到9cm的平皿里,在倒入3-5ml(37℃)的营养琼脂,在37℃的温箱里培养24小时,取出来计算它的菌落单位总数就行。大肠杆菌用发酵法,单位是MPN/100ml(每100毫升或毫克的样品里面...