从自然界分离筛选微生物菌种的基本程序包括哪些?
流程
4.1 优良糖化酶菌株的分离与筛选
融化培养基→倒平板→打散孢子团粒→梯度稀释→涂布平板→培养观察→滴加碘液→挑菌落→接种→培养→糖化酶活力测定→菌种保存
4.2 酸乳制品中的乳酸菌的分离
制培养基→倒平板→梯度稀释→涂布平板→培养观察→挑菌落→接牛乳管→培养观察→传代培养→挑选凝乳管→乳酸测定→菌种保存
5 步骤
5.1 优良糖化酶菌株的分离与筛选
(1)融化淀粉察氏培养基,稍冷后倒平板与斜面数个。
(2)取种曲少许,加入10mL带玻璃球的无菌生理盐水的三角瓶中,用力振荡打散孢子团粒,使之形成均匀的孢子悬浮粒。然后将其用无菌纱布过滤于无菌试管中。
(3)将上述滤液以10倍稀释法知释至10-7,取后3个稀释度的稀释液各0.2mL,于淀粉察氏培养基平板上用无菌涂布器分别依次涂布2至3个皿,30℃培养1~2d。
(5)性能测定:测定各菌落的糖化酶活力。
5.2 酸乳制品中的乳酸菌的分离
(1)制备BCG牛乳营养琼脂培养基。
①称取脱脂奶粉10g,溶于50mL水中,加入1.6%溴甲酚绿酒精溶液0.07mL,0.075MPa压力下灭菌20min。
②另取琼脂2g,溶于50mL水中,加酵母膏1g,溶解后调pH值至6.8,0.1MPa压力下灭菌20min。
③趁热将上述两液以无菌操作混合均匀,倒平板6个,待凝固后,置37℃培养24h,若无杂菌生长,即可使用。
(2)将样品以10倍稀释法稀释至10-7,取其中10-7、10-6 2个稀释度的稀释液各0.1~0.2mL,分别置于上述各营养平板上,用无菌涂布器依次涂布2至3个皿,置43℃培养48h,如出现圆形稍扁平的黄色菌落及其周围培养基亦为黄色者初步定为乳酸菌。
(3)将典型菌落转至脱脂乳发酵管,43℃培养8~24h,若牛乳管凝固,无气泡,呈酸性,镜检细胞杆状或链球状,革兰氏染色呈阳性,则将其连续传代若干次,43℃培养,挑选出在3~4h能凝固的乳管,保存备用。
(4)乳酸菌的鉴定及生物量的测定。
(1)海滩等高盐(2)以淀粉为唯一炭源 高温(3)高压蒸汽灭菌 无菌(4)稀释涂布平板法 平板划线法 菌液浓度过高 增大稀释倍数(或培养过程被杂菌污染 严格无菌操作;或用接种针划下一区域前接种针没有灭菌 每划一个新区域前都要对接种针进行灭菌处理)(原因与操作要对应)(5)温度 纤维素的量与浓度、反应时间、pH
⑴采样:从适合微生物生长的环境采样⑵富增:根据其特性选择性的富集目的微生物
;⑶初筛:采用平板对富集的目的微生物纯种分离,确定其活性选出高产菌种,一般200株;
⑷复筛:对第一次分离的微生物菌种,再次筛选,一般40株;
⑸二级复筛:从40株选出5株⑹确定菌种,进行生产性能测定.
1,采样 2,增殖培养 3培养分离 4,筛选5,毒性试验
答:制菌种的基本设备通常包括灭菌设备、接种设备、培养设备和相关检测仪器,而基本程序则涵盖培养基制备、灭菌、接种、培养以及菌种保存等环节。在制备菌种的过程中,首先需要准备适合微生物生长的培养基。培养基的成分根据所需培养的微生物种类而定,可能包括碳源、氮源、矿物质、生长因子和水等。这些成分经过...
答:在自然界里,食用菌都不是单独存在的,而是和许多细菌、放射菌、霉菌等生活在一起的.所谓菌种分离,就是把这些和食用菌一起生活的杂菌分离出来,通过培养,获得纯的优良菌种.菌种分母种、原种、栽培种. (一)母种的分离培养 食用菌母种的分离,可分为孢子分离法、组织分离法以及基内菌丝分离等. 1.孢子分离法 孢子分离...
答:对自然界中的微生物,在未经人工诱变或杂交处理的情况下进行分离和纯化(见微生物的分离和纯化),然后进行纯培养和测定(见微生物测定法),择优选取微生物的菌种。这种方法简单易行,但获得优良菌种的几率小,一般难以满足生产的需要。3人工选育编辑分诱变育种和杂交育种两种。诱变育种以诱发基因突变为手段的微生物育种技术...
答:微生物药物的生产技术就是微生物制药技术。可以认为包括五个方面的内容: 第一方面 菌种的获得根据资料直接向有科研单位、高等院校、工厂或菌种保藏部门索取或购买;从大自然中分离筛选新的微生物菌种。 分离思路 新菌种的分离是要从混杂的各类微生物中依照生产的要求、菌种的特性,采用各种筛选方法,快速、准确地把所需要...
答:临床上致病菌往往和非致病菌混合在一起,如何从这些细菌中分离出目标菌是关键。免疫磁珠分离技术(IMBS)是近年来发展起来的在微生物检测领域中一种新技术。其基本原理是将特定病原体的单抗或多抗或二抗偶联到磁珠微球上,通过抗原抗体反应形成磁珠一目标病原体复合物或磁珠一一抗一目标病原体复合物,在外部磁场磁力的...
答:立即用稀释的84消毒液或石炭酸溶液浸泡消毒抹布毛巾拖把,沾有消毒液的抹布毛巾拖把等擦拭桌面、地面,用稀释的84消毒液洗手。一般生物安全防护实验室(不使用实验脊椎动物和昆虫),实验脊椎动物生物安全防护实验室。每类生物安全防护实验室根据所处理的微生物及其毒素的危害程度各分为四级。各级实验室的生物...
答:1.2 微生物工程的应用:涵盖了微生物工程在生物制药、环境保护、食品工业等多个方面的实际应用案例,展示了其广泛的影响力。§2 生产菌种的来源 2.1 筛选生产菌种:详细讲解了如何通过生物技术和筛选方法,从大量微生物中找到具有优良特性用于生产生物物质的菌种。2.2 菌种分离与培养:阐述了分离得到的...
答:此法多用于双糖、半固体、明胶等培养基的接种,方法与斜面接种类似。用接种针挑取菌落或菌液少许,由培养基表面中央直刺至管底(若为三糖铁并在斜面加以涂布),然后沿穿刺线拔出接种针(注:接种半固体看动力者不穿刺到底)。五、液体接种法 此法多用于单糖发酵试验等,接种方法与斜面接种方法基本...
答:从自然界或现有菌种中分离筛选菌种12三、微生物菌种的自然选育14四、微生物菌种的诱变选育15第三节工业微生物菌种的保藏20一、菌种保藏的原理20二、菌种保藏的方法20三、保藏菌种的质量控制22四、菌种的退化与复壮23第四节微生物菌种的接种、分离纯化与培养24一、接种24二、分离纯化27三、培养方法29本...
答:谢产物和抗生素、维生素、激素、生物碱、细胞毒素等次级代谢产物。(3)微生物机能的利用 如微生物对有毒化合物和高分子化合物的分解净 化、石油探矿和开采、细菌冶金、有机废弃物的综合治理、海洋和宇宙的开 发等。菌种诱变剂:如图 诱变机制要看你用的是那种诱变剂了!!老师教给我们的基本是下面这3...