有关细胞冻存复苏问题

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-06-28
细胞冻存与复苏过程,应注意哪些细节,以提高细胞存活率

首先说一下细胞在冻存过程中的主要威胁:
溶液效应:
原理和内容如图所示

胞外冰晶形成
冻存过程中细胞外形成胞外冰晶的形成会对细胞膜造成机械性损伤
脱水
胞内冰晶形成
原理和内容如图所示

因此在细胞冻存复苏过程中,要从以下几个方面防止上述损伤形成:
总的原则:慢冻快融,即冻存过程要逐步降温,能够使用程序降温仪当然最好了;复苏过程水温要控制适当,一般选择38℃,复苏过程要注意不断摇晃以缩短时间;
选择恰当的冻存保护剂,通常有DMSO,人血白蛋白,甘油,羟乙基淀粉,海藻糖,丙二醇等等,这个最好能自己通过多次摸索,找出一个适合自己所培养类型的细胞的稳定最优的配比组合;
冻存保护剂要提前预冷,滴加过程要缓慢等;
文库里有一篇文章,你可以学习一下:http://wenku.baidu.com/view/7aa84aeb5ef7ba0d4a733b3a.html

电力系统中各类电力负荷随时间变化的曲线。是调度电力系统的电力和进行电力系统规划的依据。电力系统的负荷涉及广大地区的各类用户,每个用户的用电情况很不相同,且事先无法确知在什么时间、什么地点、增加哪一类负荷。因此,电力系统的负荷变化带有随机性。人们用负荷曲线记述负荷随时间变化的情况,并据此研究负荷变化的规律性。

感受态细胞-70冻存的时候要加甘油防止结晶破坏细胞结构。复苏的时候要注意冰上溶解,并且不要有剧烈的震荡。
有些细胞可能是在琼脂板上短时间4°存放的,拿出后需要在37°复苏1小时再进行体积扩大。

冻存要先在4℃30min然后-20℃1h,最后-80℃过夜,然后移到液氮中,复苏的话就要提前准备好37℃水浴,从液氮中拿出细胞后马上到水浴中不断摇晃融化,动作一定要迅速,不然细胞就会死啦。我不知道楼上的童鞋说的是什么细胞,如果在冰上溶解细胞能活么?

  • 细胞冻存和复苏的原则是什么?论述其原则机制。
    答:【答案】:细胞冻存和复苏的原则是慢冻快融。细胞冻存是在超低温冷冻状态下长期保存细胞的方法。在-196℃的超低温下,细胞呈休眠状态,因而能长期保存。细胞在冷冻时,常因溶液中电解质浓度增高和冰晶形成而受到损伤,故冻存细胞须悬浮于无毒、低分子质量、高溶解度,并能迅速透入活细胞内的特定保护剂...
  • 有关细胞冻存复苏问题
    答:感受态细胞-70冻存的时候要加甘油防止结晶破坏细胞结构。复苏的时候要注意冰上溶解,并且不要有剧烈的震荡。有些细胞可能是在琼脂板上短时间4°存放的,拿出后需要在37°复苏1小时再进行体积扩大。
  • 为什么复苏细胞要慢速冷冻快速复苏
    答:当细胞冷到零度以下时,细胞器会脱水,细胞中可溶性物质浓度升高,在细胞内形成冰晶.缓慢冷冻可使细胞逐步脱水,细胞内不致产生大的冰晶.相反,冰晶会很大,导致细胞膜、细胞器的损伤和破裂.复苏快溶可防止小冰晶形成大冰晶(冰晶的重结晶).在冷冻细胞时,还应在冻存液中加入DMSO等冷冻保护剂.DMSO是一种渗...
  • 细胞的冻存与复苏要注意什么 – 手机爱问
    答:1. 取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2. 冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO)对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作 较大,因此...
  • 细胞冻存有段时间后要复苏养段时间再冻么
    答:细胞冻存有段时间后要复苏养段时间再冻 冻存的原则是:慢冻,主要是防止细胞在冷冻过程中形成冰晶,对细胞造成损害,加DMSO也是这个原理.复苏细胞的原则是:快融.主要是防止DMSO在液体状态下对细胞的毒害作用,快速使细胞进入复苏和生长状态.因此,细胞的冻存与复苏原则应该是慢冻快融.分别经过4度,-20度,...
  • 细胞冻存与复苏过程,应注意哪些细节,以提高细胞存活率
    答:胞内冰晶形成 原理和内容如图所示 因此在细胞冻存复苏过程中,要从以下几个方面防止上述损伤形成:总的原则:慢冻快融,即冻存过程要逐步降温,能够使用程序降温仪当然最好了;复苏过程水温要控制适当,一般选择38℃,复苏过程要注意不断摇晃以缩短时间;选择恰当的冻存保护剂,通常有DMSO,人血白蛋白,...
  • 细胞冻存复苏时,为什么坚持 缓冻速融的原则
    答:对细胞造成损害,加DMSO也是这个原理.复苏细胞的原则是:快融.主要是防止DMSO在液体状态下对细胞的毒害作用,快速使细胞进入复苏和生长状态.因此,细胞的冻存与复苏原则应该是慢冻快融.分别经过4度,-20度,-80度和液氮的依次过程进行冻存;经过37度水浴1分钟之内解冻细胞冻存液进行复苏....
  • 保姆级细胞冻存教程+细胞冻存与复苏问题汇总
    答:最佳时机的选择选择在细胞的“平台期”进行冻存,避开快速分裂和代谢变化,可以降低机械损伤的风险,让细胞在冷冻世界中更加稳定。手术组织的特殊处理对于手术组织,慢冻快融的程序降温方法至关重要。借助专业的设备,细胞在复苏时能在37℃的水浴中得到最佳的再生条件。液氮的永恒之谜理论上,液氮可以提供...
  • 和注意事项细胞复苏如何进行,有哪些需要注意的事
    答:一、\x09复苏 1.\x09把冻存管从液氮中取出来,立即投入37℃水浴锅中,轻微摇动.液体都融化后(大概1-1.5分钟),拿出来喷点酒精放到超净工作台里.2.\x09把上述细胞悬液吸到装10ml培养基的15ml的离心管中(用培养基把冻存管洗一遍,把粘在壁上的细胞都洗下来),1000转离心5分钟.3.\x09把上清液...
  • 人死之后冰冻起来,等将来技术成熟之后再解冻,能否复生?
    答:我总结人体冷冻保存,要解决的有细胞结晶受损和器官缺乏营养衰竭死亡的问题。这就需要在人体器官衰竭前迅速用对机体细胞无害冻存液替换掉体液,并且使整体达到冻存状态。而且,在复苏的时候也要注意修复受损的一些问题。目前,世界上已经有很多例人体冻存,但并未尝试过复苏。其实,广义的人体冻存已经应用...