单克隆抗体
975年，瑞士科学家乔治•克勒和英国科学家凯撒•米尔斯坦，把产生抗体的B淋巴细胞与多发性骨髓瘤细胞进行融合，形成杂交瘤细胞。这种细胞兼有两个亲代细胞的特征，既有骨髓瘤细胞无限生长的能力，又有B淋巴细胞产生抗体的功能。因此，这种杂交瘤细胞就能在细胞培养中产生大量单一类型的高纯度抗体。这种抗体叫“单克隆抗体”。
把单克隆抗体与抗癌药物或毒素结合起来，就成为威力强大的抗体“导弹”。把这种抗体“导弹”注射到癌症患者的血液中，它就会发挥导弹一样的作用，在患者体内追踪并附着于癌细胞上，然后与抗体结合的抗癌药物或毒素杀伤和破坏癌细胞，而且很少损伤正常组织细胞。这种抗体“导弹”具有高度选择性，对癌细胞命中率高，杀伤力强的优点，没有一般化学药物那样不分好坏细胞，格杀勿论的缺点。美国约翰•霍普金斯医院应用抗体“导弹”治疗晚期肝癌病人，收到了惊人的效果。肝脏肿瘤显著缩小，生存期延长，而且没有副作用。单克隆抗体技术的发明，是免疫学中的一次革命，打破了过去只能在身体内产生抗体的方法，而成功地在体外用细胞培养的方法产生抗体，同时繁殖快，可以产生在体内达不到的高滴度和高专一性的水平。
单克隆抗体是由无性繁殖的单克隆杂交瘤细胞群产生的高纯度单一抗体。
特点为特异性强、纯度高。单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备，杂交瘤（hybridoma）抗体技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群，可制备针对一种抗原表位的特异性抗体即单克隆抗体。制备过程1. 免疫动物免疫动物是用目的抗原免疫小鼠，使小鼠产生致敏B淋巴细胞的 过程。 一般选用6-8周龄雌性BALB/c小鼠，按照预先制定的免疫方案进行免疫注射。 抗原通过血液循环或淋巴循环进入外周免疫器官，刺激相应B淋巴细胞克隆，使其活化、增殖，并分化成为致敏B淋巴细胞。2.细胞融合采用二氧化碳气体处死小鼠，无菌操作取出脾脏，在平皿内挤压研磨，制备脾细胞悬液。 将准备好的同系骨髓瘤细胞与小鼠脾细胞按一定比例混合，并加入促融合剂聚乙二醇。在聚乙二醇作用下，各种淋巴细胞可与骨髓瘤细胞发生融合，形成杂交瘤细胞。3.选择性培养选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤细胞，一般采用HAT选择性培养基。在HAT培养基中，未融合的骨髓瘤细胞因缺乏次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶，不能利用补救途径合成DNA而死亡。 未融合的淋巴细胞虽具有次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶，但其本身不能在体外长期存活也逐渐死亡。 只有融合的杂交瘤细胞由于从脾细胞获得了次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶，并具有骨髓瘤细胞能无限增殖的特性，因此能在HAT培养基中存活和增殖。4.杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化在HAT培养基中生长的杂交瘤细胞，只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞，因此，必须进行筛选和克隆化。通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。采用灵敏、快速、特异的免疫学方法，筛选出能产生所需单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞，并进行克隆扩增。经过全面鉴定其所分泌单克隆抗体的免疫球蛋白类型、亚类、特异性、亲和力、识别抗原的表位及其分子量后，及时进行冻存。5.单克隆抗体的大量制备单克隆抗体的大量制备主要采用动物体内诱生法和体外培养法。(1)体内诱生法 取BALB/c小鼠，首先腹腔注射0.5ml液体石蜡或降植烷进行预处理。1-2周后，腹腔内接种杂交瘤细胞。杂交瘤细胞在小鼠腹腔内增殖，并产生和分泌单克隆抗体。约1-2周，可见小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水，即可获得大量单克隆抗体。(2)体外培养法 将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养。在培养过程中，杂交瘤细胞产生并分泌单克隆抗体，收集培养上清液，离心去除细胞及其碎片，即可获得所需要的单克隆抗体。但这种方法产生的抗体量有限。各种新型培养技术和装置不断出现，大大提高了抗体的生产量。
抗体主要由机体的B淋巴细胞合成，每个B淋巴细胞有合成一种抗体的遗传基因。当机体受抗原刺激时，抗原分子上的许多决定簇分别激活各个具有不同基因的B细胞。被激活的B细胞分裂增殖形成该细胞的子孙，即克隆。如果选出一个合成一种抗体的细胞进行培养，就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群，即单克隆。单克隆细胞所合成的抗体即为单克隆抗体。
1975年Kohler和Milstein首先报道，用细胞杂交技术，使经绵羊红细胞(SRBC)免疫的小鼠脾细胞，与小鼠骨髓瘤细胞融合，创建了第一个B细胞杂交瘤细胞株，获得了抗SRBC的单克隆抗体。这是免疫学，乃至医学史上的一个里程碑。
单克隆抗体的特点是：理化性状高度均一、生物活性单一、与抗原结合的特异性强、便于人为处理和质量控制，并且来源容易。这些优点使它一问世就受到高度重视，并成为解决生物学和医学等许多重大问题的重要手段。
制备建议去：http://www.pep.com.cn/200503/ca667615.htm看
补充：医生的“生物武器” 一提到“生物武器”，人们或许会想到。“细菌战”。是的，用病菌或细菌产生的毒素伤害人、畜的战争叫“细菌战”，所用的病菌及其携带者、细菌毒素等则称为“生物武器”或“细菌武器”。但在这里我们讲的医生的生物武器是指用当代分子生物学、细胞学、免疫学等理论与技术所建立的用于疾病诊断以及治疗的最新手段，这些手段代表了医学发展新水平以及今后发展的新方向之一。 生物导弹 导弹指的是可以依*控制系统制导的，能十分准确地击中预定目标的高速飞行武器。导弹的种类很多，如地对空、空对空导弹等，这些都是用于真正的战争的。我们这里讲的是用于找出疾病或是治疗疾病，尤其是癌症的医学诊治药物或方法，这便是“生物导弹”，或称为“单克隆抗体”。 那么什么是“单克隆抗体”呢？为什么又称它为“生物导弹”？原来我们人体中存在有一种十分有用的“健康卫士”，它称为B淋巴细胞。当外来细菌、病毒、或是异性物质侵入我们人体时，它们便立即产生一种对抗这些细菌、病毒或异性物质的“抗体”。抗体可把它们溶解或杀灭。正是由于抗体有这种功能，科学家们便想出了一种“细胞杂交”的方法，使这种抗体可以源源不断地产生。什么是“细胞杂交”、它又为什么可不断产生抗体呢？顾名思义，“细胞杂交”就是用两种不同的细胞将它们融合成一种细胞。为了制造特异性的抗体，科学家们将B淋巴细胞与一种瘤细胞融合在一起，于是所产生的“杂交细胞”一方面具有瘤细胞不断生长繁殖的性质（科学家们称之为“永生不死性”），一方面又有B细胞产生专一抗体的性质。科学家们再将这种杂交细胞所产生的抗体提纯出来，这便是单克隆抗体了。 由于单克隆抗体是B细胞针对某一细菌、或某一特殊癌细胞而产生的，因此它就会像“导弹”一样只跟踪激发B细胞产生抗体的目标（或为细菌、癌细胞等），而不会伤及“无辜”的其他细胞。另外，为了使我们能看到单克隆抗体与目标（如癌细胞）的结合，以便医生作出准确诊断，科学家们让单克隆抗体与可以显示的物质结合在一起，如荧光素、放射性核素等，这样医生们便知道疾病（如癌症）的部位、大小等。若是将单克隆抗体与抗癌药物、毒素等结合在一起，然后将这种结合用于人体，那么单克隆抗体就会追踪目标，并且将抗癌药物或毒物带到癌症部位，将癌细胞杀死。 目前单克隆抗体在医疗中正起着巨大的作用，然而也还存在着一些问题。例如由于提纯很困难，有时难免带有杂质，这样诊断与治疗效果便不会太好，此外，癌细胞等坏家伙还会发生“变异”，就像孙悟空七十二变那样，让你不认识它，这样单克隆抗体也就会找不到目标了。最后，外来入侵者如细菌、病毒及癌细胞还会产生“抗抗体”来中和单克隆抗体，就如“反导弹”一样来对付“导弹”。如何克服这些难题，还需要经过人们长期不懈的努力。 基因探针诊断技术与基因治疗 汉弗莱是美国1963～1969年的副总统。1967年他发现尿血（小便中有血液），医生用膀胱镜检查，诊断为“慢性增生性膀胱炎”，就是说不是癌症。不幸地是10年后他再检查时已确诊为“浸润性膀胱癌”了，就是说癌症已到了晚期，最终不治而谢世。 时隔十几年后的今天，美国新一代的医生将汉弗莱当年尿细胞标本，以及活组织标本和手术后的肿瘤标本再用一种最新的技术检查，发现这些标本中都存在一种称之为P53基因的突变，从而证实汉弗莱早在第一次尿血时已罹患膀胱癌了。那么为什么当年诊断不出汉弗莱生膀胱癌呢？原因就是那时还没有一种先进的称之为“聚合酶链反应”（简称为PCR）技术。 在我们人体细胞中至少存在有两种与癌症发生、发展密切相关的脱氧核糖核酸（即DNA）片段，即癌症相关基因。其中之一是导致肿瘤形成的“癌基因”，另一种是抑制肿瘤发生与发展的“肿瘤抑制基因”，平时人们称为“抑癌基因”或“抗癌基因”。如果细胞中癌基因过分活跃了，或是抑癌基因“丢失”了或某种原因而失去功能了，细胞便会恶变成癌。迄今科学家们已发现一百多个癌基因与十几个抑癌基因，其中一个称为P53的抗癌基因引起医生们的特别重视，原因是它的失活或突变与50％的人类肿瘤发生有关，其中包括肺癌、乳腺癌、膀胱癌、结肠癌等。PCR法主要原理是将癌细胞中DNA提取出来，再让它扩增，再通过与已知的探针杂交进行分析便知道被检查的细胞DNA有否异常了。因此，PCR法可以在细胞发生明显的形态改变之前便知道它是否恶变。 除了基因诊断外，基因治疗目前也正成为医生们治疗疾病的一种最新武器。 数年前美国有位小姑娘生了一种被称为“先天性腺苷脱氨酶缺陷病”，这种病人抵抗力是极为低下的，外来的致病因子如病菌、病毒等极易侵袭病人的机体而致使病人死亡。于是这位小姑娘接受了基因治疗。其方法是将病人体内的白细胞抽吸出来，在科学家的实验室里培养，然后将正常的腺苷脱氨酶基因导入白细胞，最后再将这种带有正常腺苷脱氨酶基因的细胞输回小姑娘体内。经治疗后不久，这位小姑娘不但完全正常，而且可以滑冰、舞蹈了。 基因治疗有两条途径，其一是生殖细胞的基因治疗。这是将正常基因导入遗传病患者的生殖细胞内。目前最常用的方法是微注射法。即在显微镜下，用一支很细很细的玻璃针将正常的遗传基因注入到受精卵内。目前这种方法在动物实验中已取得极大成功，甚至可产生有新特性的品系动物。但这种途径在人类还不成熟，因为还要考虑到许多复杂的伦理问题。 另一种方法就是体细胞的基因疗法。它是将正常基因导入患有遗传性疾病患者的体细胞内（如上述那样腺苷脱氨酶患者的白细胞），治疗患者的遗传缺陷。 尽管基因治疗目前还存在许多问题，但它代表了“根治”疾病的一种方向。今后需要人们努力去解决的问题是导入的基因要正确地插入受体细胞基因组的某一位置上，不然地话要么不起作用，要么会使插入部位相邻的基因受到影响，反而产生不良作用。此外，外来基因虽然插入进去了，但它是否会有功能，即科学家讲的它是否能“表达”，就是说它是否能“指导”细胞产生我们所期望的蛋白质，从而起到治疗疾病的目的？还有，即使外来基因插入到受体细胞中了，它会不会又“掉出来”？这是科学家们又一担心的问题，就是它“是否能稳定地整合”。上述这些问题都是需要我们在21世纪共同努力去解决的难题。
以上参考自：张全方，医疗技术，京华出版社P．16
针对一个抗原决定簇的抗体，多克隆抗体就是抗血清
经过特异抗原刺激后的效应B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,产生杂交瘤细胞.杂交瘤细胞所产生的特异性抗体叫做单克隆抗体.
答：这种细胞兼有两个亲代细胞的特征，既有骨髓瘤细胞无限生长的能力，又有B淋巴细胞产生抗体的功能。因此，这种杂交瘤细胞就能在细胞培养中产生大量单一类型的高纯度抗体。这种抗体叫“单克隆抗体”。把单克隆抗体与抗癌药物或毒素结合起来，就成为威力强大的抗体“导弹”。把这种抗体“导弹”注射到癌症患者的...
答：单克隆抗体是指从一株单细胞克隆所产生、针对复合抗原分子上某一种抗原决定簇的特异性抗体。其优越性为纯度高、专一性强、效价高。表现在：①大大提高了血清学试验在诊断某些疾病上的特异性和敏感性；②用来区分T细胞亚群；③获得纯化的抗体或使用针对肿瘤特异性抗原决定簇的单克隆抗体携带抗肿瘤药来治疗...
答：单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。1、单克隆抗体制备的宿主动物一般选用BALB/c小鼠，鼠单抗的应用范围相当广泛，一些国内外公司均开发出了兔的单克隆抗体制备技术。2、单克隆抗体是亲和层析中重要的配体，单克隆抗体对抗原的识别，与多克隆抗体有很大的不同。不...
答：高中生物单克隆抗体基础知识点如下：一、区别单克隆抗体和多克隆抗体。多克隆抗体：抗原刺激机体，产生免疫学反应，由机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组球蛋白，这就是免疫球蛋白，这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是抗体。当病原体入侵人体，能够刺激机体免疫系统产生大量的多...
答：单克隆抗体的特点是理化性状高度均一生物活性单一与抗原结合的特异性强便于人为处理和质量控制，并且来源容易这些优点使它一问世就受到高度重视，并广泛应用于生物学和医学研究领域 1 作为亲合层析的配体 单克隆抗体能与其相应。顾名思义，单克隆抗体就是指只有一个克隆位点结构的抗体由这个结构决定了其只能...
答：单克隆抗体意思 定义1：高度均质性的特异性抗体，由一个识别单一抗原表位的B细胞克隆所分泌。一般来自杂交瘤细胞。 定义2：只识别一种表位(抗原决定簇)的抗体，来自单个B淋巴细胞的克隆或一个杂交瘤细胞的克隆。
答：单克隆抗体是利用体外培养技术生产的抗体，它由于是由一个细胞分裂而来的，所有只含有一种抗体。单克隆抗体的优点是：理化性状高度均一、生物活性单一、与抗原结合的特异性强、便于人为处理和质量控制，并且来源容易。这些优点使其广泛应用于抗肿瘤等领域 缺点就是生成的抗体只针对1种抗原决定簇，比较单一。
答：抗原决定簇是关键。单克隆抗体是针对一个抗原决定簇，由一个B细胞分化增殖的子代细胞克隆而产生的抗体，具有高特异性。而多克隆抗体可由多个B细胞产生，其包含的抗原决定簇也有很大的不同，故选择特异性要差很多。
答：区别如下：CD45.1和CD45.2抗体都是鼠抗鼠CD45单克隆抗体，分别为两种亚型，不同小鼠品种表达的亚型不同。CD45.1适用FVB鼠，CD45.2适用C57和Balb/c鼠。效果没有区别。直接买CD45 30F11抗体就行了，两种都包括。鼠杂交瘤单克隆抗体是将来源于免疫接种过的小鼠的B 细胞与骨髓瘤细胞融合，继而筛选...
答：单克隆抗体是针对多克隆抗体来分类的 顾名思义，单克隆抗体就是指只有一个克隆位点结构的抗体。由这个结构决定了其只能识别某一特定抗原表位。所以单克隆抗体的特点就是超高的特异性和灵敏度。主要应用于酶联免疫吸附试验、放射免疫分析、免疫组化和流式细胞仪等技术。
