大肠菌群测定方法
由于大肠菌群指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，即：需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。因此大肠菌群的检测一般都是按照它的定义进行。 [1]
国内采用的进出口食品大肠菌群检测方法主要有国家标准和原国家商检局制订的行业标准。两个标准方法在检测程序上略有不同。
（一）国家标准：国家标准采用三步法，即：乳糖发酵试验、分离培养和证实试验。
乳糖发酵试验：样品稀释后，选择三个稀释度，每个稀释度接种三管乳糖胆盐发酵管。36±1℃培养48±2h，观察是否产气。
分离培养：将产气发酵管培养物转种于伊红美蓝琼脂平板上，36±1℃培养18-24h，观察菌落形态。
证实试验：挑取平板上的可疑菌落，进行革兰氏染色观察。同时接种乳糖发酵管36±1℃培养24±2h，观察产气情况。
报告：根据证实为大肠杆菌阳性的管数，查MPN表，报告每1ml（g）大肠菌群的MPN值。具体操作参见
GB4789.3-2010《中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验 大肠菌群测定》
现行有效新国标：
（二）原国家商检局制订的行业标准，等效采用美国FDA的标准方法，用于对出口食品中的大肠杆菌进行检测。本方法采用两步法：
推测试验：样品稀释后，选择三个稀释度，每个稀释度接种三管LST肉汤。36±1℃培养48±2h，观察是否产气。
证实试验：将产气管培养物接种煌绿乳糖胆盐（BGLB）肉汤管中，36±1℃培养48±2h，观察是否产气。以BGLB产气为阳性。查MPN表，报告每ml(g)样品中大肠菌群的MPN值。
GB4789.3-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》中的规定操作步骤：
1、乳糖发酵试验：样品稀释后，选择三个稀释度，每个稀释度接种三管乳糖胆盐发酵管。36±1℃培养48±2h，观察是否产气。
2、分离培养：将产气发酵管培养物转种于伊红美蓝琼脂平板上，36±1℃培养18-24h，观察菌落形态。
3、证实试验：挑取平板上的可疑菌落，进行革兰氏染色观察。同时接种乳糖发酵管36±1℃培养24±2h，观察产气情况。
SN0169-92《中华人民共和国进出口商品检验行业标准出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法》规定操作：
1、推测试验：样品稀释后，选择三个稀释度，每个稀释度接种三管LST肉汤。36±1℃培养48±2h，观察是否产气。
2、证实试验：将产气管培养物接种煌绿乳糖胆盐（BGLB）肉汤管中，36±1℃培养48±2h，观察是否产气。以BGLB产气为阳性。查MPN表，报告每ml(g)样品中大肠菌群的MPN值。
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扩展资料：
大肠菌群并非细菌学分类命名，而是卫生细菌领域的用语，它不代表某一个或某一属细菌，而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致。一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。
大肠菌群是作为粪便污染指标菌提出来的，主要是以该菌群的检出情况来表示食品中有否粪便污染。大肠菌群数的高低，表明了粪便污染的程度，也反映了对人体健康危害性的大小。
粪便是人类肠道排泄物，其中有健康人粪便，也有肠道患者或带菌者的粪便，所以粪便内除一般正常细菌外，同时也会有一些肠道致病菌存在，因而食品中有粪便污染，则可以推测该食品中存在着肠道致病菌污染的可能性，潜伏着食物中毒和流行病的威胁，必须看作对人体健康具有潜在的危险性。
参考资料来源：/baike.baidu.com/item/%E5%A4%A7%E8%82%A0%E8%8F%8C%E7%BE%A4/7324866?fr=aladdin#4"target="_blank"title="只支持选中一个链接时生效">百度百科-大肠菌群
答：供参考：一、正确，但我认为还需要再多做一个稀释度,共采用三个稀释度 二、是要用24个平板，但是你1：10没有必要做6管，联系到一、你实际上做了四个稀释度。三、假设这12管经过革兰氏染色均为革兰氏阴性无芽胞杆菌，乳糖发酵管也均产气，那么就为大肠杆菌阳性，MPN表采用3个稀释度[1ml(g)、0...
答：1、MPN表中的接种量指的就是样品原液的量，如果是1ml，就是说10倍稀释度的需要接种10ml。2、九管法：一般选择10倍稀释液吸取10mL至3管双料,再吸取1mL3管至单料，然后100倍稀释液吸取1mL至3管单料。3、双料和单料是由吸取的液体体积来定的，不用换算成样品原液量。4、“那我第一次接种的话...
答：粪大肠菌群 Fecal Coliforms 1 定义 本规范采用下列定义 粪大肠菌群（Fecal coliforms）系一群需氧及兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌，在44.5℃±0.5℃培养24h～48h能发酵乳糖产酸并产气。该菌直接来自粪便，是重要的卫生指示菌。3 仪器 3.1 恒温水浴箱或隔水式恒温箱：44℃±0.5℃。3....
答：化妆品检测项目中粪大肠菌群的检测流程：10g/mL样品+90mL灭菌生理盐水 →10mL+10mL双倍乳糖胆（含中和剂）培养基→粪大肠菌群 44.5℃，48h培养 注：在化妆品检测项目中，如果样品含有油脂性的成分，如精油，在样品前处理中需加入液体石蜡、吐温80、生理盐水进行均质，使样品能够均匀分散开来。粪大肠菌...
答：就我所掌握的浅薄的一点东西，跟楼主探讨一下：1.据我所知标准好像都是三个梯度，食品大肠菌群检测是采用九管法，而水质大肠菌群采用的15管法。2.对于第二个问题，我有点糊涂了，国标中规定不同的食品中大肠菌群限值不同，我没有见过0.01这么小的数，一般好像都是每100g/mL不得检出，或者少于...
答：测定污染情况。大肠菌群是评价水质好坏的一个重要的卫生指标，也是反映水体被生活污水污染的一项重要监测项目，多管发酵法测定水中大肠菌群可间接得出水体受粪便污染的情况，在环境监测和卫生防疫方面具有重要意义。大肠菌群的定义为需氧或者兼性厌氧、在一定温度下能分解乳糖，并同时产生酸和气体的革兰氏阴性...
答：看来我们使用的方法是一样的，区别是你没有操作过，对吧 按你提问的顺序分列 一、 试管的规格大约为长度--cm,直径2--2.5cm,小玻璃管的长度大约2-3cm直径约0.3-0.5cm。操作的时候是把小的玻璃管（一端封闭)开口的一端朝大试管底部放入，至于需要多少支。要看你一次做几个样品，几个倍数，我们...
答：在进行食品中大肠菌群数的测定时，要进行复发酵实验，目的是排除能够产酸产气的杂菌对测定大肠菌群的干扰，确保检验结果准确、可靠。
答：灵敏度更高。稀释液虽然可以用灭菌生理盐水或用磷酸盐缓冲液，但是有研究表明磷酸盐缓冲液对细菌细胞有更好的保护作用，灵敏度更高。大肠菌群是需氧或者兼性厌氧、在一定温度下能分解乳糖，并同时产生酸和气体的革兰阴性菌。
答：不行的，饮用水大肠菌群使用的标准是GB/T5750.12-2006，每5管为一个稀释度。食品用的标准是GB4789.3-2010，以每3管为一个稀释度。它们所对应的MPN值表是不同的。此外，饮用水的最终报告是以MPN/100ml为单位报告，而食品则是以MPN/g(ml)来报告，两者相差100倍，在统计学上直接以倍数相乘是不...
