如何从血清中提取RNA
kuaidi.ping-jia.net 作者：佚名 更新日期：2024-07-06
血清RNA提取实验前，血清如何保存？
像以上全血的RNA提取有两种思路：
1）直接处理抗凝的全血，即加入如Trizol的裂解液直接往下做。此方法有个缺点：处理的体积血液体积有限，一般1ml Trizol处理100ul血液，最多不超过200ul.
2) 先去除血液中的红细胞分离出其中的白细胞（即淋巴细胞），然后提取白细胞的RNA。此方法的缺点：只能提取得到淋巴细胞的RNA，血液中游离的如病毒RNA无法提得。
血清RNA提取，biog的具体操作步骤如下：
1. 请自行准备：无水乙醇、无RNA酶1.5mL离心管。2. 取出洗涤液，按以下操作：a) 洗涤液A：21mL加入9mL无水乙醇；35mL加入15mL无水乙醇；42mL加入18mL无水乙醇。b) 洗涤液B：9mL加入21mL无水乙醇；15mL加入35mL无水乙醇；18mL加入42mL无水乙醇。c) 配制好的洗涤液如出现沉淀，可在37℃溶解，摇匀后使用。3. 取无RNA酶的1.5mL离心管，加入200μL样本，4μLRNA Carrier混合均匀，再加入300μL 裂解液及20μL 消化液，漩涡震荡10秒，充分混匀，56℃水浴10 分钟至完全裂解。4. 加入1000μL无水乙醇，轻轻颠倒混匀，如有半透明悬浮物，不影响RNA的提取与后续实验。5. 将吸附柱放入收集管内，将760μL上述溶液转入吸附柱内，静置2 分钟，12,000 rpm 4℃离心1 分钟，弃收集管内废液.6. 将剩余760μL溶液转移至吸附柱内，重复步骤5。7. 将吸附柱放回收集管内，加500μL 洗涤液A至吸附柱内，12,000 rpm 4℃离心1 分钟，弃收集管内废液。8. 将吸附柱放回收集管内，加500μL 洗涤液B至吸附柱内，12,000 rpm 4℃离心1 分钟，弃收集管内废液。9. 将吸附柱放回收集管内，12,000 rpm 4℃离心2 分钟，离去残留的洗涤液。10. 取出吸附柱，放入新的无RNA酶的1.5 mL 离心管内，加入30-50μL 洗脱液，静置3 分钟，12,000 rpm 4℃ 离心2 分钟，收集RNA溶液。11. -70℃保存，或直接用于下一步实验。
现在我们做实验大多不用繁琐的手提方法了，BIOG cfDNA Easy Kit可以用于提取血清中的RNA
我的实验是从血清中提取microRNA, 用过biog的，结果还可以。
提取RNA的血清如何冻存
答：沉淀细胞,用PBS 洗一次,再用少量的PBS 悬浮细胞,然后加5~10 倍体积的RNAlater 保存。白细胞 如果将白细胞从红细胞和血清中分离出来,并按组织培养细胞一样处理后,白细胞便能有效地保存在RNAlater 中。不要将全血、血浆或血清中的RNA 保存在RNAlater 中,因为它们蛋白含量过高,与RNAlater 混合后易形成不溶的沉淀...
血清中是否含有DNA
答：血清-血清,指血液凝固后,在血浆中除去纤维蛋白原分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白已被除去的血浆。这里说的很清楚，血清从血浆得到。而血浆是由血液去除了细胞成分的。只有细胞才有dna。当然前面说的前提都是正常人，如果血液中有病毒，那肯定还是有可能有dna的。
求助:从全血里面提取DNA和血清/血浆提取DNA有
答：如果要提取血细胞中的核酸，需要选择血细胞核酸提取试剂或全血核酸提取试剂；如果要从血清或血浆中提取游离核酸或游离肿瘤核酸则要选择血浆或血清核酸提取试剂；如果需要检测外周血中有无病毒或细菌感染，一般也是选择血浆或血清核酸提取试剂。如果要提取DNA，需要选择DNA提取试剂，要提取RNA，则要选择RNA提取...
做PCR看大鼠PPARγ的表达 抽提RNA的时候是该用血清还是血浆呢?_百度...
答：应该是血细胞啊，血清是免疫球蛋白，血浆是水啊，盐啊，脂肪，蛋白质的混合物，你要提取总RNA应该从血细胞中提取，就用没有凝固的全血就行，血液要用肝素抗凝，这样就行了，具体的量肝素说明书上有。
血清microRNA在常温下可以放多久
答：基本上离体就会很快降解的，而且含量很少。看你下游做什么了
血清RNA是怎么由细胞中进入到血浆中的?
答：胞吐或细胞裂解内容物溢出
...总RNA提取试剂,很多专业人士都极力推荐,究竟如何呀?
答：博凌科为 的 TRNzol－A+ 总RNA提取试剂. 高灵敏度的总R NA 提取试剂 TRNzol-A+具有裂解能力更强，灵敏度更高等特点。可用于从细胞和组织中提取出总RNA，在样品裂解或匀浆过程中，TRNzol-A+ 可保持RNA完整性，同时裂解细胞，溶解细胞内含物。TRNzol-A+试剂既适用于小量样品（50-100mg组织、5×106...
从血清中的提取到的RNA纯度不够
答：血清RNA提取纯度不够，可以换一种试剂盒，biog在提取纯度上还是很高的，能最大限度的去除蛋白，色素等杂质污染
怎么从病毒中提取RNA核酸
答：（5）根据酶具有特异性可知，DNA酶可以催化DNA水解．RNA酶可以催化RNA水解．如果核酸提取液和DNA酶混合在一起注入进活鸡胚，无病毒A存在，说明核酸提取液是DNA提取液，否则是RNA提取液．如果核酸提取液和RNA酶混合在一起注入进活鸡胚，无病毒A存在，说明核酸提取液是RNA提取液，否则是DNA提取液．...
全血样品中游离cf-DNA和cf-RNA保存管好不好用?
答：那你们是如何提取全血样本中的游离cf-DNA和cf-RNA？由于实验室经费有限，我们实验室暂时只用过BIOG cfRNA/cfDNA Easy Kit离心法
这里有个文献，不要抗凝
http://clincancerres.aacrjournals.org/content/5/8/1961.full
红细胞破裂将其中的mRNA,tRNA,rRNA释放出来，所以血清中有RNA
血液（全血，也就医学上说的外周血）中RNA的含量很低，1ml一般在3ug左右（1-7ug）。一般是处理抗凝血液。像以上全血的RNA提取有两种思路：
1）直接处理抗凝的全血，即加入如Trizol的裂解液直接往下做。此方法有个缺点：处理的体积血液体积有限，一般1ml Trizol处理100ul血液，最多不超过200ul.
2) 先去除血液中的红细胞分离出其中的白细胞（即淋巴细胞），然后提取白细胞的RNA。此方法的缺点：只能提取得到淋巴细胞的RNA，血液中游离的如病毒RNA无法提得。
血清RNA提取，biog的具体操作步骤如下：
1. 请自行准备：无水乙醇、无RNA酶1.5mL离心管。2. 取出洗涤液，按以下操作：a) 洗涤液A：21mL加入9mL无水乙醇；35mL加入15mL无水乙醇；42mL加入18mL无水乙醇。b) 洗涤液B：9mL加入21mL无水乙醇；15mL加入35mL无水乙醇；18mL加入42mL无水乙醇。c) 配制好的洗涤液如出现沉淀，可在37℃溶解，摇匀后使用。3. 取无RNA酶的1.5mL离心管，加入200μL样本，4μLRNA Carrier混合均匀，再加入300μL 裂解液及20μL 消化液，漩涡震荡10秒，充分混匀，56℃水浴10 分钟至完全裂解。4. 加入1000μL无水乙醇，轻轻颠倒混匀，如有半透明悬浮物，不影响RNA的提取与后续实验。5. 将吸附柱放入收集管内，将760μL上述溶液转入吸附柱内，静置2 分钟，12,000 rpm 4℃离心1 分钟，弃收集管内废液.6. 将剩余760μL溶液转移至吸附柱内，重复步骤5。7. 将吸附柱放回收集管内，加500μL 洗涤液A至吸附柱内，12,000 rpm 4℃离心1 分钟，弃收集管内废液。8. 将吸附柱放回收集管内，加500μL 洗涤液B至吸附柱内，12,000 rpm 4℃离心1 分钟，弃收集管内废液。9. 将吸附柱放回收集管内，12,000 rpm 4℃离心2 分钟，离去残留的洗涤液。10. 取出吸附柱，放入新的无RNA酶的1.5 mL 离心管内，加入30-50μL 洗脱液，静置3 分钟，12,000 rpm 4℃ 离心2 分钟，收集RNA溶液。11. -70℃保存，或直接用于下一步实验。
现在我们做实验大多不用繁琐的手提方法了，BIOG cfDNA Easy Kit可以用于提取血清中的RNA
我的实验是从血清中提取microRNA, 用过biog的，结果还可以。
答：沉淀细胞,用PBS 洗一次,再用少量的PBS 悬浮细胞,然后加5~10 倍体积的RNAlater 保存。白细胞 如果将白细胞从红细胞和血清中分离出来,并按组织培养细胞一样处理后,白细胞便能有效地保存在RNAlater 中。不要将全血、血浆或血清中的RNA 保存在RNAlater 中,因为它们蛋白含量过高,与RNAlater 混合后易形成不溶的沉淀...
答：血清-血清,指血液凝固后,在血浆中除去纤维蛋白原分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白已被除去的血浆。这里说的很清楚，血清从血浆得到。而血浆是由血液去除了细胞成分的。只有细胞才有dna。当然前面说的前提都是正常人，如果血液中有病毒，那肯定还是有可能有dna的。
答：如果要提取血细胞中的核酸，需要选择血细胞核酸提取试剂或全血核酸提取试剂；如果要从血清或血浆中提取游离核酸或游离肿瘤核酸则要选择血浆或血清核酸提取试剂；如果需要检测外周血中有无病毒或细菌感染，一般也是选择血浆或血清核酸提取试剂。如果要提取DNA，需要选择DNA提取试剂，要提取RNA，则要选择RNA提取...
答：应该是血细胞啊，血清是免疫球蛋白，血浆是水啊，盐啊，脂肪，蛋白质的混合物，你要提取总RNA应该从血细胞中提取，就用没有凝固的全血就行，血液要用肝素抗凝，这样就行了，具体的量肝素说明书上有。
答：基本上离体就会很快降解的，而且含量很少。看你下游做什么了
答：胞吐或细胞裂解内容物溢出
答：博凌科为 的 TRNzol－A+ 总RNA提取试剂. 高灵敏度的总R NA 提取试剂 TRNzol-A+具有裂解能力更强，灵敏度更高等特点。可用于从细胞和组织中提取出总RNA，在样品裂解或匀浆过程中，TRNzol-A+ 可保持RNA完整性，同时裂解细胞，溶解细胞内含物。TRNzol-A+试剂既适用于小量样品（50-100mg组织、5×106...
答：血清RNA提取纯度不够，可以换一种试剂盒，biog在提取纯度上还是很高的，能最大限度的去除蛋白，色素等杂质污染
答：（5）根据酶具有特异性可知，DNA酶可以催化DNA水解．RNA酶可以催化RNA水解．如果核酸提取液和DNA酶混合在一起注入进活鸡胚，无病毒A存在，说明核酸提取液是DNA提取液，否则是RNA提取液．如果核酸提取液和RNA酶混合在一起注入进活鸡胚，无病毒A存在，说明核酸提取液是RNA提取液，否则是DNA提取液．...
答：那你们是如何提取全血样本中的游离cf-DNA和cf-RNA？由于实验室经费有限，我们实验室暂时只用过BIOG cfRNA/cfDNA Easy Kit离心法
