试述ANA的种类及其常用的检测方法?常见的ANA荧光核型及其意义?

常见的核型有均质型、颗粒型、核膜型和核仁型。其临床意义分别为：（1）高效价的均质型主要见于SLE患者，低效价均质型可见于RA、慢性肝脏疾病、传染性单核细胞增多症或药物诱发的狼疮患者。（2）高效价的颗粒型主要见于MCTD，同时也见于SLE、硬皮病、SS等自身免疫性疾病。（3）高效价的核膜型几乎仅见于SLE，特别是活动期SLE，且提示病情活动。（4）核仁型在硬皮病中出现率最高，也可见于雷诺现象，偶尔出现于SLE。

红斑狼疮属于自身免疫性疾病，自身抗体在红斑狼疮的诊断、分型及治疗中有重要意义。其自身抗体可分为两大类：器官特异性自身抗体和非器官特异性自身抗体，红斑狼疮常见的自身抗体多属于非器官特异，主要有： 抗核抗体(ANA)是结缔组织病病人血清中最常见的自身抗体，细胞核是一个复杂的结构,其抗原成分包括核膜(糖蛋白)、核质(DNA)、核仁(RNA)。核质中的染色体又由组蛋白、非组蛋白外膜、双链DNA和着丝点等组成。因此,ANA实际上是一组包括抗以上各种核结构和组分的自身抗体。通过蛋内印迹技术分析这一组抗体的不同特异性组分,称之为ANA谱分析。 不同种类的ANA常和某些疾病或病症有关。ANA通常用大鼠或小鼠肝印片为底物的间接免疫荧光法检测,改变底物,如采用培养细胞HEP2及Wil2等作为底物，可测出用鼠肝印片不能检出的ANA。在SLE病人中ANA的阳性率因测ANA的底物不同而不同，但用鼠肝印片和培养细胞HEP2细胞作底物其阳性率分别为90%~95%和98%。值得注意的是仍有5%SLE病人其ANA检测阴性,这些病人的ANA阴性不是因为他们的疾病不活动或是治疗的结果,而是与这些病人对这些ANA检测的底物(啮齿类的上皮)抗原的免疫反应性较差有关。用间接免疫荧光法检测ANA时常可见到四种核型： 1.均质型在核分裂间期整个细胞核着色。它是抗去氧核糖核蛋白(DNP>、抗组蛋白抗体的表达,认为LE细胞形成有关的抗体，与SLE活动有关。低滴度发生在类风湿性关节炎(RA)、药物性狼疮及其他结缔组织病。 2.周边型间期细胞核着色成环状，常有一均质的核背景。它是抗双链DNA抗体和可溶性蛋白抗体的表达，与SLE活动相关,常提示病人的肾脏累及。 3.斑点型在间期细胞核中呈一致的或大小不等的斑点。

(1)ANA根据作用于核抗原成分不同可分为五种：①抗双链DNA抗体：对诊断SLE特异性高但敏感性较差；②抗单链DNA抗体：诊断SLE特异性差，可见于多种AID；③抗脱氧核糖核酸蛋白(DNP)：在其他AID及老年人中可检出；④抗核糖核酸核蛋白抗体(RNP)：为混合结缔组织病的特异标志，30%～50%的SLE患者ANA为抗RNP抗体；⑤抗Sm抗体：SLE的特异性标志，30%～40%的SLE病人可检出。
(2)目前ANA常用的检测方法有：免疫荧光法、放射免疫法、ELISA、免疫双扩散、对流免疫电泳及免疫印迹法等。
(3)ANA阳性的荧光现象分成4种主要的荧光核型：①周边型表示抗DNA抗体存在；②均质型表示有抗核蛋白抗原(DNP)抗体；③斑点(颗粒)型多为抗ENA抗体；④核仁型多为抗核小体抗体。系统性红斑狼疮(SLE)患者常出现周边型、匀质型或混合型，斑点型多见于混合结缔组织病，而硬皮病多为核仁型；周边型对SLE有较高的特异性。