金黄色葡萄球菌的检验过程
1、形态染色鉴别：
革兰阳性球菌，葡萄串状排列。
2、菌落特征鉴别：
在血平板上菌落中等大小、光滑湿润、菌落呈金黄色、菌落周围有透明溶血环。
3、鉴定试验鉴别：
甘露醇发酵试验阳性，血浆凝固酶试验阳性，触酶阳性球菌，耐热核酸试验酶阳性，新生霉素试验敏感。
扩展资料：
金黄色葡萄球菌的检验规定：
根据 GB4789.10-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验》第一法定性检验和第二法平板计数法进行实验操作。
其中定性检验的主要步骤有检样处理、增菌、分离、镜检、肠毒素检验等，定量实验主要步骤有：检样处理、接种、培养、计数和确认试验等，常规的计数培养方法时间需要48 h左右。
卫生部于2012年12月21日实施的《速冻面米制品食品安全国家标准》，将金黄色葡萄球菌检测由定性转向定量，规定每批产品抽检5个样品中，至多只能有1个样品每克生制品中检出的金黄色葡萄球菌含量在1000至10000个之间。
参考资料来源：百度百科-金黄色葡萄球菌
参考资料来源：百度百科-葡萄球菌属
参考资料来源：知网学问-金黄色葡萄球菌鉴别方法探讨
参考资料来源：百度百科-食品卫生微生物学检验金黄色葡萄球菌检验
金黄色葡萄球菌的检验 ① 金黄色葡萄球菌的检验 样品处理：无菌取25g或25mL食品样品，放入225mL灭菌生理盐水中均质，制成10-1稀释液。 增菌培养：将10-1稀释液接入7.5%NaCl肉汤或胰蛋白胨肉汤中，37°C培养24小时。 分离培养：将上述稀释液或培养液分别划线血平板和Baird-Parker平板，置37°C培养24~48小时。金黄色葡萄球菌在血平板上呈金黄或白色菌落，大而凸起，表面光滑，周围有溶血圈。在Baird-Parker平板上菌落为圆形，直径2~3mm，颜色灰或黑色，周围有一浑浊带。 染色观察：从平板上挑取可疑性菌落进行革兰氏染色，金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性，显微镜下呈葡萄状排列无芽胞、荚膜，直径0.5~1μm。 血浆凝固酶试验：吸取0.5mL兔血浆与0.5mL金黄色葡萄球菌肉浸液肉汤24小时培养物充分混匀，置36±1°C培养，每隔半小时观察一次，连续观察6小时，出现凝固，即将小试管倾斜或倒置时，内容物不流动，判为阳性。同时做阴阳性对照。 url]耐热核酸酶试验：将24小时肉汤培养物沸水浴处理15min，用接种环划线刺种于甲苯胺兰-DNA平板，36±1°C培养24小时，在刺种线周围出现淡粉色者为阳性。本试验金黄色葡萄球菌为阳性。 ② 金黄色葡萄球菌肠毒素检测 金黄色葡萄球菌肠毒素的检测主要有动物试验、血清学试验、免疫荧光试验及酶联免疫吸附等方法，在此就不一一赘述。
1、样品制备：
称取25g样品至盛有225mL 7.5%氯化钠肉汤中，固体样品研磨或置均质器中做成1:10的样品混悬液。若供计数检验，可按十进制递增稀释法将样品匀液再进行适当稀释。
2、 增菌与分离培养：
将上述样品匀液于36℃±1℃培养18h～24h。金黄色葡萄球菌在7.5%氯化钠肉汤中呈混浊生长。将上述培养物，分别划线接种到Baird-Parker平板和血平板，血平板 36℃±1℃培养18h～24h。Baird-Parker平板36℃±1℃培养24h～48h。
金黄色葡萄球菌在Baird-Parker平板上，菌落直径为2mm～3mm，颜色呈灰色到黑色，边缘为淡色，周围为一混浊带，在其外层有一透明圈见图[4]。用接种针接触菌落有似奶油至树胶样的硬度，偶然会遇到非脂肪溶解的类似菌落；但无混浊带及透明圈。长期保存的冷冻或干燥食品中所分离的菌落比典型菌落所产生的黑色较淡些，外观可能粗糙并干燥。在血平板上，形成菌落较大，圆形、光滑凸起、湿润、金黄色（有时为白色），菌落周围可见完全透明溶血圈见图[5]。挑取上述菌落进行革兰氏染色镜检及血浆凝固酶试验。
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3、 鉴定：
(1) 染色镜检：
金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性球菌，排列呈葡萄球状，无芽孢，无荚膜，直径约为0.5μm～1μm。见图6
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(2) 血浆凝固酶试验：
取0.5ml兔血浆，放入小试管，再加入BHI培养物0.2mL~0.3mL，振荡摇匀，置36℃±1℃培养，每隔半小时观察一次，连续观察6小时，出现凝固即将小管倾斜或倒置，内容物不流动，判为阳性，同时做阴阳对照见图7。
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附上检验程序图
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定性法检测金黄色葡萄球菌是要先增菌，定性法意思就是检测有和无。如果样品中有金葡，但是很少，必须经过增菌大量繁殖后，才能通过鉴定培养基检测出目标菌。
答：鉴定金黄色葡萄球菌的依据是形态染色、菌落特征、鉴定试验。1、菌落特征，金黄色葡萄球菌为圆形光滑较小菌落，直径一般只有1mm左右，白色或金黄色，菌落周围有透明溶血环。2、形态染色，革兰阳性球菌，葡萄串状排列。3、鉴定试验，凝固酶阳性、发酵甘露醇、耐热核酸酶阳。
答：金葡耐盐，先用306增菌，然后划线BP平板，典型菌落为黑色中心、混浊带和透明环，挑取典型菌落进行凝血实验。沙门想要前增菌，选择性增菌TTB、SC，然后分离坚定BS、XLD，BS典型菌落为黑色、有金属光泽、是培养基变黑，XLD典型菌落为黑色菌落。挑取典型菌落进行生化鉴定，TSI为上红下黄、有或无硫化氢，...
答：1. 采样量：每个样品应采集100克或100毫升以上的量。2. 采样部位：在不同部位分别取样，然后将多个部位的样品混合成一个复合样品，再进行检测。3. 无菌操作取样：使用无菌工具（如勺子、刀片或剪刀）从包装内部或外表面采集样本，防止污染。4. 样品处理：将采集到的所有样本放入无菌容器中，加入适量的...
答：1.样品处理：无菌取25g或25mL食品样品，放入225mL灭菌生理盐水中均质，制成10-1稀释液。2.增菌培养：将10-1稀释液接入7.5%NaCl肉汤或胰蛋白胨肉汤中，37°C培养24小时。3.分离培养：将上述稀释液或培养液分别划线血平板和Baird-Parker平板，置37°C培养24~48小时。金黄色葡萄球菌在血平板上呈金黄...
答：金黄色葡萄球菌的鉴别要点涉及多种实验方法，旨在确认其特性。首先，血浆凝固酶试验是关键指标，分为结合型和游离型，可通过玻片法或试管法检测。在玻片法中，菌落与血浆混合，出现凝集为阳性；试管法则观察菌液与兔血浆混合后是否在6小时内凝固。耐热核酸酶试验则对24小时培养物进行处理，若刺种线周围出现...
答：大肠杆菌的形态是杆状的，经革兰氏染色菌体颜色变成红色，说明大肠杆菌是革兰氏阴性（G-）细菌。金黄色葡萄球菌的形态是球状的，经革兰氏染色菌体颜色变成蓝紫色，说明金黄色葡萄球菌是革兰氏阳性（G+）细菌。革兰氏染色法之所以能将细菌分为G+菌和G-菌，是因为一般认为革兰氏染色是基于细菌细胞壁特殊...
答：转接入血平板，（37±1℃）恒温箱中培养24h。培养方式 中海生物甘露醇高盐琼脂可用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养 蛋白胨和牛肉粉提供氮源、维生素和生长因子；D—甘露醇为可发酵糖类；氯化钠维持均衡的渗透压；琼脂是培养基的凝固剂；酚红为pH指示剂。
答：取样在高盐培养基上培养。能够存活、颜色金黄的菌落基本就是金黄色葡萄球菌。如果要测含量，那么要将乳制品梯度稀释，分别涂布平板，取能清晰分辨菌落个数，菌落之间无融合现象的培养基计数。这时可以认为每一个菌落都是由一个金黄色葡萄球菌分裂得到。再有稀释倍数和样品的体积，就可以计算了。
答：1、对于一些加热或冷冻的乳品样品，先用7.5%NaCl肉汤举行预增菌。2、使受硬伤、冷冻的金黄色葡萄球菌复苏，再举行检测。
答：应用PCR技术进行确认：通过PCR技术可以检测金黄色葡萄球菌的DNA序列并进行确认，PCR技术的应用可以提高检测的灵敏度和特异性。纯化：分离的金黄色葡萄球菌需要进行纯化，纯化过程中需要避免外界环境的污染，并使用合适的培养基，在合适的温度和氧气条件下进行培养。检测细胞毒素：金黄色葡萄球菌可以产生多种细胞...
