怎样分离大肠杆菌和芽孢杆菌,需要详细的步骤,谢谢!

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-07-07
用两种以上的方法分离大肠杆菌和枯草芽孢杆菌

1.划线分离法
2.稀释涂布法
分出单菌落以后再镜检看菌落是否已经纯化,没有的话在显微镜下挑取单菌继续培养直至纯化
具体的操作实验课应该有教过吧

1、按装个涂片,然后用革兰氏染色,枯草芽孢杆菌革兰是阳性菌,大肠杆菌是革兰是阴性菌,显微镜观察一下就知道了。
2、用线划分开,大肠杆菌的菌落是湿润紧实的,枯草芽孢杆菌的菌落是表面粗糙不透明。
3、枯草芽孢杆菌是革兰氏阳性菌,大肠杆菌是革兰氏阴性菌。通过杆菌试纸可以明显的分辨。
枯草芽孢杆菌菌体生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质,这些活性物质对致病菌或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用。
大肠杆菌是动物肠道中的正常寄居菌,其中很小一部分在一定条件下引起疾病 。大肠杆菌的血清型能够引起人体或动物胃肠道感染,主要是由特定的菌毛抗原、致病性毒素等感染引起的,除胃肠道感染以外,还会引起尿道感染、关节炎、脑膜炎以及败血型感染等。

扩展资料:
枯草芽孢杆菌具有孢子休眠期、生殖生长期两个生长时期,枯草芽孢杆菌会在生长环境恶劣、营养物质缺乏等不适宜的环境下进入孢子休眠期,并且形成具有极强抗逆作用、在高温、酸碱等极性环境下亦可生存的芽胞,从而适应环境得以生存。
一旦环境变得适宜生长、营养充足,芽胞会自动进入生殖生长期,芽胞重新生长为枯草芽孢杆菌。
大肠杆菌的生化代谢非常活跃。
大肠杆菌可以发酵葡萄糖产酸、产气,个别菌株不产气,大肠杆菌还能发酵多种碳水化合物,也可以利用多种有机酸盐。
大肠杆菌在常用的生化特性检测项目中,甲基红试验呈阳性,吲哚产生和乳糖发酵是阳性(个别菌株表现阴性),维-培试验是阴性,尿素酶和柠檬酸盐利用呈阴性(极个别菌株表现阳性),硝酸盐还原试验表现阳性,氧化酶表现阴性,氧化-发酵试验表现为F型。
参考资料:百度百科--枯草芽孢杆菌
百度百科--大肠杆菌

分离大肠杆菌:

1、划线分离法

将培养皿底部,用拇指和无名指固定成倾斜状态,在火焰旁,将培养皿稍微打开。在此同时,用环状接种针在火焰旁取少许菌悬液,迅速送入培养皿内,在平板培养基的一边,作第一次平行滑线3到5条。

转动培养皿约70度角用烧过冷却的接种针,通过第一次滑线部分作第二次平板划线,然后再用同样方法,通过第二次平行滑线部分作第三次平行划线和通过第三次平行划线部分作第四次平行划线。

划线时接种针应与平板表面成30度角左右,不要使接种针碰到培养皿边缘,也不要将培养划破,划线完完毕后,盖上皿盖,倒置于恒温箱培养。

2、涂布分离法

先将培养的菌液稀释通常稀释到10^-5到10^-7之间,然后取0.1ml不同稀释度的稀释菌液,放在培养皿的固体培养基上。

用玻璃刮刀涂布在培养基平面上进行培养,在适当的稀释度下,可产生相互分开的菌落,通常每个培养皿有20个以内的单个菌落最为合适。

将每个菌落分别接在斜面上扩增培养后,再做功能性实验。

分离芽孢杆菌:

先进行富集培养,挑取具有芽孢的菌落进行划线纯化培养,获得单菌落。

取富集菌液,至于75度到80度水浴15到20分钟,梯度稀释10^-3、10^-4、10^-5、10^-6、10^-7,选择三个合适的梯度混菌或涂布于营养琼脂麦芽汁培养基或直接涂布于酪素培养基上初筛也可划线分离。

每个梯度两个平皿,将平板倒置,于35度到37度的环境下24到48个小时。

对长出的菌落进行编号,选择生长快,菌落大,表面干燥、粗糙,不透明的聚落转接于斜面备。挑取少许菌苔涂片,做芽孢染色判断是否为芽孢杆菌。

扩展资料:

大肠杆菌的特性:

理化特性

1、大肠杆菌是短杆菌,两端呈钝圆形,革兰阴性。有时因环境不同,个别菌体出现近似球杆状或长丝状 。

2、大肠杆菌多是单一或两个存在,但不会排列呈长链形状;大多数的大肠杆菌菌株具有荚膜或微荚膜结构,但是不能形成芽孢。

3、多数大肠杆菌菌株生长有菌毛,其中一些菌毛是针对宿主及其他的一些组织或细胞具有黏附作用的宿主特异性菌毛 。

4、大肠杆菌的生化代谢非常活跃。大肠杆菌可以发酵葡萄糖产酸、产气,个别菌株不产气,大肠杆菌还能发酵多种碳水化合物,也可以利用多种有机酸盐。

芽孢杆菌的特性:

1、代谢快、繁殖快,四小时增殖10万倍,标准菌四小时仅可繁殖6倍。

2、无湿状态可耐低温-60℃、耐高温+280℃,耐强酸、耐强碱、抗菌消毒、耐高氧(嗜氧繁殖)、耐低氧(厌氧繁殖)。

3、体积比一般病源菌分子大四倍数,占据空间优势,抑制有害菌的生长繁殖。

参考资料来源:

百度百科-大肠杆菌

百度百科-芽孢杆菌



大肠杆菌和芽孢杆菌,这两个词不对等呢。芽孢杆菌是一个属,大肠杆菌是一个种!
拿常见的枯草芽孢杆菌来说。
可以利用菌落形态差异分开。用涂布法,得到单菌落,比较大的,白的,菌落较干燥、平坦,边缘不整齐的是枯草杆菌;菌落较小,颜色较浅,接近培养基颜色,湿润的是大肠杆菌。
可以利用芽孢杆菌耐热来得到芽孢杆菌。把混合样品在80度水中处理5分钟,再涂布平板,得到芽孢杆菌。这里不能保证全部杀死大肠杆菌,和样品中的成分和菌含量有很大关系。还是要用菌落识别的。
不管用哪种方法,得到单菌落后要进行2-3次划线分离纯化,镜检确定纯度和菌的形态。

他们分别是革兰氏阴性菌和阳性细菌,可以用杀死不同的抗生素来筛选;芽孢杆菌耐热,如果选芽孢杆菌的话,也可以加热一段时间把大肠杆菌杀死;也可以稀释溶液,在培养基上培养成单个的菌落,每个菌落都是纯的,之后检查一下就知道选出来的是什么菌了。

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    答:回复fine_2011 的帖子大肠杆菌用鉴定培养基伊红美兰,枯草芽孢杆菌芽孢染色显微镜下看形态,八叠球菌是唯一有芽孢的球菌,芽孢染色就行,不过得先设计环境让它长芽孢 查看原帖>>
  • 枯草芽孢杆菌和大肠杆菌的区别详细一些谢谢,简答题
    答:1、革兰氏染色后颜色不同:枯草芽孢杆菌是革兰氏阳性菌,染色后为紫色,大肠杆菌是阴性,染色后是红色。2、菌体大小不同:枯草芽孢杆菌菌体较大,大肠杆菌菌体很小。3、芽孢不同:枯草芽孢杆菌会形成芽孢,大肠杆菌不形成芽孢。
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    答:观察菌落形态 金黄色葡萄球菌:平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起,直径1~2mm。大肠杆菌:伊红美蓝遇大肠杆菌,菌落呈深紫色,并有金属光泽,可鉴别大肠杆菌是否存在。枯草芽孢杆菌:菌落表面粗糙不透明,污白色或微黄色,在液体培养基中生长时,常形成皱醭。
  • 大肠杆菌与枯草芽孢杆菌区别
    答:枯草芽孢杆菌,是芽孢杆菌属的一种。单个细胞0.7~0.8×2~3微米,着色均匀。无荚膜,周生鞭毛,能运动。革兰氏阳性菌,芽孢0.6~0.9×1.0~1.5微米,椭圆到柱状,位于菌体中央或稍偏,芽孢形成后菌体不膨大。菌落表面粗糙不透明,污白色或微黄色,在液体培养基中生长时,常形成皱醭。大肠杆...
  • 怎么检验饮料中的大肠杆菌??
    答:将待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内,接种量在l m J以上者,用双料乳糖胆盐发酵管,lm1及1mI以下者,用单料乳糖胆盐发酵管。每一稀释度接种3管,置36±l℃温箱内,培养24±2小时,如所有乳糖胆盐发酵管都不产气,则可报告为大肠菌群阴性;如有产气者,则按下列程序进行。2.分离培养。将产气的...