loading+buffer和marker
请教buffer和marker在跑电泳时的作用,还有loading buffer和loading mar...
答：loading buffer的功能主要有两个。第一，里边的指示剂溴酚蓝和二甲苯酚起到指示的作用，显示电泳的进程，以便我们适时终止电泳；第二，里边的成分甘油可以加大样品密度，使样品密度大于TAE，从而沉降到点样孔中，防止样品飘出点样孔。没听说过什么loading marker， marker是用来标示大小的，相当于在旁边放...
...糖凝胶电泳中常说的Marker是什么?还有Loading Dye 在实验中起到什么...
答：loading dye 是跑琼脂糖凝胶用来染DNA的染料,它是和loading buffer按一定的比例混合而成的.有的进口试剂buffer里已经加了loading dye的,就不用加了.试剂说明书都有说明的..琼脂糖凝胶电泳marker是用来做参考的，类似于标尺的作用。marker会跑出很多条带，对应带的片段长度是一定的（不 ...
sds-page样品加loading buffer marker加多少
答：加1/4体积的5倍。GoldViewII是一种可代替溴化乙锭EB的新型花青类核酸染料，采用琼脂糖电泳检测DNA时，GoldViewII与核酸结合后能产生很强的荧光信号，其灵敏度比EB强5-10倍。
Marker, DNA, EB, Loading buffer作用
答：标记（Marker），染色体上一个可以被识别的区域（比如限制性内切酶的酶切点，基因的位置等）。标记的遗传能够被检测出来。标记可以是染色体上有表达功能的部分（比如基因），也可以是没有编码蛋白质功能但遗传特性能够被检测出来的部分。DNA分子的功能是贮存决定物种的所有蛋白质和RNA结构的全部遗传信息；策划...
为什么蛋白marker在不同buffer中分子量不同
答：反正就是防止别的孔的样品跑到空白泳道,很难看的.所以在空白处也点上1倍的loading buffer 你按照一个固定的数字做下来,点样的时候开始要摸索一下,多点几个样,看看点多少微升合适,因为你的菌液浓度什么的我们也不知道.你要有条件,可以给蛋白定量,因为跑电泳蛋白浓度过高会很难看,浓度低了看不清楚.
跑SDS-PAGE电泳,加热变性的,我知道样品要加loading buffer,marker...
答：Marker中是不需要加 上样缓冲液的。
加Marker和加样的时候样品总是飘出来是怎么回事?
答：如果是点样时漂出，一般是loading buffer不足，导致样品密度不够大。也可能样品中混有乙醇之类杂质。如果是电泳过程中漂出，可能是胶不够水平，比如放置时发生倾斜，或制胶时点样孔一侧偏厚。排除了上样液比重问题之后，如果混入了乙醇很正常的，但平时少见“飘样”现象。最后一步乙醇沉淀步骤之后，...
为什么我做western blot的marker不是很直,都有点弯,是胶不够匀么?还 ...
答：marker不直是因为你的marker泳道不是位于最边上或者marker的一边有空泳道，即该泳道没有加Loading Buffer，办法为：将marker加在最边上或者在其左右两边有空泳道的地方加上Loading Buffer（Loading Buffer也是一倍加入，即如果为2倍的Loading Buffer，可加一体积水和一体积的Loading Buffer）
大家在处理细菌菌液时都是怎么做之后再做sds
答：处理细菌菌液时都是怎么做之后再做sds marker看你买的是什么样的,有的还是粉末状呢,那个用水溶解后也需要加loading buffer沸水浴处理的.不过现在卖的很多都是那种直接点样的.说明书一般都有说的,一般10微升.loading buffer就是上样缓冲液的英文.另外,你的实验步骤里面,你打错了,第三步是10000rpm*2...
PCR时loadingbuffer的位置就代表DNA的位置吗
答：不是～loading buffer是前沿指示剂～琼脂糖凝胶中预先加入EB等基因染料～在紫外照射下会显现相应地DNA条带～再根据Marker的大小来估计目的条带的大小～
网友看法：
谢岚15294269529：
蛋白电泳中mark还要加buff嘛 -
德安县梅邰：: 蛋白电泳中mark也是用某几种已知分子量的蛋白做的,做完之后是要按一定比例混合并加好Loading buffer再保存的.正常是不需要再加Buffer的,看颜色是深蓝色的就是说明已经加过Loading buffer了.
谢岚15294269529：
蛋白marker需要加loading buffer吗
德安县梅邰：: 现在用预染MAKER,不用加loading buffer的,也不用变性! 未预染marker需要加loading buffer. loading buffer的功能主要有两个.第一,里边的指示剂溴酚蓝和二甲苯氰FF起到指示的作用,显示电泳的进程,以便我们适时终止电泳;第二,里边的成分甘油可以加大样品密度,使样品密度大于TAE,从而沉降到点样孔中,防止样品飘出点样孔.另外,有的Buffer是加有SDS的,一般都会写明.SDS主要是促使聚合酶变性,因为没有除尽的聚合酶会结合在DNA双链上影响它的迁移速率.细胞裂解后的裂解液,加loading 100℃加热,也是为了中止酶促反应,防止提取的蛋白质降解.
谢岚15294269529：
loading - buffer的配置方法? -
德安县梅邰：: 琼脂糖电泳的loading buffer? 跑DNA? 请说详细点 1. 一般可以直接购买,有些公司卖Taq酶时送的. 2. 参考分子克隆手册 3. 6*loading buffer配制方法之一 0.05% 溴酚蓝(Bromophenol Blue) 0.05% 二甲苯腈蓝FF(Xylene Cyanol FF) 36% 甘油 30mM EDTA 10*loading buffer 配制方法参考 SDS 1% 甘油 50% 溴酚蓝 0.05%
谢岚15294269529：
buffering和loading有什么区别? -
德安县梅邰：: buffer是电子应用里面的缓冲存储器,buffering的意思就是读取缓存中,其实就是让你等,loading的应用范围比较大,也有让你等的意思,因为在数据领域里面,loading就是加载数据中,但是还有填装的意思,比如军事里面的填装弹药就可以用loading
