摇菌一定要挑单菌落吗
买的商业感受态可以直接摇菌扩增么
答:可以。挑单菌落摇菌,用摇的菌液做感受态细胞是可以的,把剩余的感受态先涂板,获得的单菌落再拿去摇菌,继而保种。
单菌落摇菌最短
答:单菌落摇菌最短需要48小时。培养皿中有几个大肠杆菌单菌落,直径3mm,挑取到斜面接种,用过接种针和牙签,但是都不大完美,我觉得不是挑取单菌落而是蘸取了单菌落。不知道大家是怎么操作的如果要挑取完整的菌落,难道要把下面的琼脂也一起挑取出来如果是挑到LB培养基的话,我习惯于用枪头,还可以顺便...
农杆菌EHA105一般摇菌多长时间可以用于侵染?OD值控制在多少?
答:我一般直接挑个单菌落大摇。要看你菌的情况。一般下午四点以后要吧。第二天九点去。如果浓了就用AAM来稀释一下。od0.4差不多。但是日本人发过文章,用的0.1。反正就是浓了就少侵染一会儿,淡了就多一会儿。但是我个人觉得淡点好儿,时间也不要太长,这样之后的转化效率虽然差点儿,但是污染率...
细菌培养的过程,从冷冻的菌 到摇瓶实验 经过几个步骤?最好详细点_百度...
答:3. 挑单菌落:在超净台中挑选典型单菌落,置入10毫升中试管(内有5毫升液体培养基)中,在37摄氏度摇床,转速200转培养12小时或者过夜,肉眼能看到试管浑浊。3.按照1:20的比例将中试管中的菌液移到250毫升三角瓶(放入100毫升液体培养基),,培养条件同前。注意:所有的接种操作均需要在层流罩中,...
大肠杆菌工程菌,我摇菌摇的出来 涂平板不出来了 这是什么原因
答:具体问题具体分析,微生物的事情旁人很难做出定论。我只能列出几个可能:1、白黄色的一层东西应该就是你所需的菌落,只不过菌落太多连成一片成了菌苔。你可以做个涂片镜检以下。毕竟你的摇瓶摇了19小时,已经到了稳定期的后期了呢,菌体数量有十的十次方左右了。如果你的目的是要得到单菌落,那就...
挑取单菌落后接种到液体培养基中培养要多久
答:16至20h。根据查询农业官网显示,从37℃培养16至20h的新鲜平板中挑取一个单菌落到1mlLB液体培养基中过夜摇菌。
试管摇菌为什么要放枪头或者牙签
答:这个问题很简单。是在做单克隆菌,用牙签或者枪头挑取的单菌落到试管中的,有些菌依然附着在牙签或枪头上所以要把它放进去。接种环也可以挑单菌落,也有附着,关键是它放不进去,手拿的地方还容易被污染。
pcr产物转化,摇菌1个小时吗
答:如果实在没有IPTG和X-gal,也最好能先挑几个单菌落去做菌落PCR,从中选取阳性的菌落去做液体摇菌,提质粒,找一个目标判断上有的酶做一个单切,同时用自连的空载作为对照,看是否能够切开。如果菌体克隆切开了,空载切不开,才能说明找到了阳性克隆。送去测序才比较可靠。否则直接送去测序,很可能...
摇菌半天可以摇好吗
答:可以。单菌落摇不超过12小时,摇久了很容易质粒丢失,且摇久了的菌会分泌酶完全降解青霉素,会影响菌的最终表达,导致实验的失败。摇菌可以使底物更好地发挥作用和使得更多氧气可以溶于发酵液中。
去年的菌本来蛋白的可溶性没有问题的 但是现在摇菌诱导的蛋白可溶性几 ...
答:会影响菌的活性。即使转化的平板放置也不要超过一周。不要图方便,做表达还是小心一点。如果非要冻存,那么拿出来以后也至少先划个线,挑单菌落再做表达。另外,看一下之前的实验记录,是否其他步骤出了问题。比如诱导的温度、IPTG浓度等。这些因素对蛋白的可溶性也影响比较大。
网友看法:
路毓13160668151:
农杆菌摇菌转速及摇菌时间? -
乳山市邹往:: 很抱歉,无法提供农杆菌摇菌转速及摇菌时间的相关信息,但是可以提供一些有关无抗生素和有抗生素情况下的摇菌时间的信息.在无抗生素的情况下,可以200转28℃摇12小时,这时OD可到0.8~1左右,然后在12小时之后每1小时测量一次OD,直到达到所需的OD=1.如果有抗生素的话,可以摇16小时,然后按照上面的方法进行后续操作.以上信息仅供参考,如果需要更多详细信息,建议寻求专业人士的帮助.
路毓13160668151:
质粒DNA的转化实验中在含Amp的选择性培养基上出现菌落,但阴性对照也有菌落出现,这说明什么?原因是什么 -
乳山市邹往:: 阴性对照涂布的应该是没有转质粒的空菌吧? 我觉得可能有三个原因: 1,你的amp平板失活,可能是你加抗生素的时候培养基温度太高.如果这样,你的平板就相当于是无抗的. 2,无菌操作失误,带入了其他有抗性的杂菌. 3,你的空菌被转入质粒的菌污染了.或者你的菌本身有污染. 鉴定的方法很珐攻粹纪诔慌达苇惮俩简单,重点是你的阴性对照菌.做个菌落pcr看有没有目的带,或者直接挑单菌落用amp培养基(要保证不失活)摇菌过夜看长不长.
路毓13160668151:
大肠杆菌菌种液的配制具体步骤. - 作业帮
乳山市邹往::[答案] 复苏:配制LB固体培养基,高压蒸汽灭菌,倒平板.挑取菌种,在培养基上划线.37℃培养24h至长出菌落.摇菌 配制LB液体培养基.高压蒸汽灭菌.无菌试管内加入3ml LB培养基,挑取单菌落加入培养基中,37℃,200rpm摇菌过夜.扩大培...