细胞培养基的主要成分

kuaidi.ping-jia.net  作者:佚名   更新日期:2024-05-31
动物细胞培养基的成分有哪些

动物细胞培养基有平衡盐溶液、天然培养基、合成培养基、无血清培养液等四种。
平衡盐溶液:目前常用的平衡盐溶液有乳酸钠和复方氯化钠溶液(1.86%乳酸钠溶液和复方氯化钠溶液之比为1:2)与碳酸氢钠和等渗盐水溶液(1.25%碳酸氢钠溶液和等渗盐水之比为1:2)两种。
天然培养基:天然培养基也称复合培养基,是含有化学成分还不清楚或化学成分不恒定的天然有机物。
天然培养基主要取自动物体液或从动物组织分离提取。其优点是营养成分丰富,培养效果良好,缺点是成分复杂,来源受限。
合成培养基:合成培养基(synthetic medium),又称为组合培养基,是通过顺序加入准确称量的高纯度化学试剂与蒸馏水配制而成的,其所含的成分(包括微量元素在内)以及他们的量都是确切可知的。合成培养基一般用于实验室中进行的营养、代谢、遗传、鉴定和生物测定等定量要求较高的研究。
无血清培养液:无血清培养液是不含血清而含有支持细胞增殖和生物反应的多种营养成分(如生长因子、组织提取物等)的细胞培养液。
无血清培养液由基础培养液和附加成分组成,取代血清的补充物:
1、激素和生长因子;
2、结合蛋白类;
3、低分子量营养因子;
4、贴壁和铺展因子等。

细胞培养液简介

实验室常用的细胞培养液的主要成分是氨基酸、葡萄糖、无机盐、维生素和微量元素等。为了维持稳定的pH,培养液中一般有一个pH缓冲系统,同时常加入少量的酚红作为pH指示剂。另外培养液中一般需要加入一定量的血清。


培养液中的氨基酸除了13种细胞生长所必须的氨基酸外,往往加入一些非必需的氨基酸以促进细胞的生长。在必需的氨基酸中,L-谷氨酰胺在溶液中不稳定(在4℃培养溶液中半衰期为3个星期,37℃中为1个星期),需要在使用时加入。

葡萄糖在培养液中的含量一般为1g/L(低糖)或4.5g/L(高糖)。它是细胞代谢重要的能量来源。

细胞培养液中都有一个平衡盐系统,用于维持细胞的渗透压、维持pH和细胞正常的代谢等。最常用的平衡盐系统有Dulbecco's phosphate buffered saline (D-PBS); Earle's balanced salts (EBSS) 和 Hanks' balanced salts (HBSS)。它们都含有细胞所必需的5种离子:钠离子、钾离子、钙离子、镁离子和磷酸根。培养液中的pH缓冲系统一般是碳酸氢钠和HEPES等。

培养液中的维生素包括叶酸、维生素B、烟酰胺和吡哆醇等。培养液中的微量元素元素包括Cu2+ ,Zn2+ ,和Mn2+等。

血清中含有生长因子、促进细胞帖壁的因子、矿物质、激素、脂类等,另外血清可以抑制胰酶的活性。

一般培养液都含酚红作为pH指示剂,它是细胞培养液状态的一个很好的标志。过长时间的培养或者微生物的污染都会使培养液的pH发生改变。需要注意的是,酚红可以模拟类固醇激素(尤其是雌性激素)的作用,所以如果培养的细胞对雌性激素敏感(比如实验本身就是研究雌性激素对细胞的作用),就应当使用没有酚红的培养液。

细胞培养基既是培养细胞中供给细胞营养和促使细胞生殖增殖的基础物质,也是培养细胞生长和繁殖的生存环境。
组成及作用
氨基酸
组成蛋白质的基本单位。不同种类的细胞对氨基酸的要求各异,但有几种氨基酸细胞自身不能合成,必须依靠培养液提供,这几种氨基酸称为必需氨基酸。其中谷氨酰胺是细胞合成核酸和蛋白质必需的氨基酸,在缺少谷氨酰胺时,细胞生长不良而死亡[1]。
必需氨基酸包括L-谷氨酰胺、L-组氨酸、L-异亮氨酸、L-亮氨酸、L-赖氨酸、L-蛋氨酸、L-苯丙氨酸、L-苏氨酸、L-色氨酸、L-缬氨酸等。
维生素
维持细胞生长的生物活性物质,在细胞代谢中起调节及控制作用。在细胞培养中,尽管血清是维生素重要来源,但是许多培养基中添加了各种维生素以适合更多的细胞系生长。
脂溶性维生素如:A、D、E、K。
水溶性维生素如:B1、B2、B6、B12、泛酸、叶酸、生物素、C、烟酰胺等。
许多维生素参与构成各种酶的活性基团的成分,没有它们,酶便没有活性,代谢活动将无法进行。
VA是细胞合成糖蛋白时寡糖基的载体,对上皮细胞有重要的维护作用。VD参与调节钙的吸收。VE是抗氧剂,可防止组成生物膜的磷脂中不饱和脂肪酸被氧化。VK缺乏会引起低凝血酶原及凝血时间延长。
叶酸是合成四氢叶酸的重要原料,四氢叶酸在核酸的生物合成和蛋白质的生物合成过程中起重要作用。
生物素是一些特异羧化酶的组成部分,参与糖代谢和脂肪酸的合成过程。
碳水化合物
碳水化合物是细胞生长主要能量来源,其中有的是合成蛋白质和核酸的成分。主要有葡萄糖、核糖、脱氧核糖、丙酮酸钠和醋酸等。
无机离子
钠、钾、镁、钙、磷等基本的无机离子,这些都是细胞组成所必须并参与细胞的代谢。
培养液中无机盐的主要功能是帮助细胞维持渗透压平衡。此外,通过提供钠,钾和钙离子,帮助细胞调节细胞膜功能。培养液的渗透压是一个非常重要的因素, 细胞通常可耐受260mOsm/kg −320 mOsm/kg。标准培养液的渗透压在此范围内波动。特别注意:向培养液中加入其它物质有可能会明显改变培养液的渗透压,特别是溶于强酸或强碱中的物质。
Na+是细胞外液中最主要的阳离子,对维持渗透压的恒定有决定性的作用。K+主要分布在细胞内液,细胞内K +的对于激活某些酶是必需的,它在调节细胞内环境的酸碱平衡也有极重要意义。Ca2+ 在细胞外液中的作用是将组织内部细胞之间相互粘着,在细胞内参与许多重要的细胞生理活动,如传导、参与肌肉细胞收缩等。Mg2+ 是构成细胞间质的重要成分,对于细胞间相互稳定结合有很重要的意义。磷的化合物对细胞物质代谢和生理功能调控的功用是十分广泛而不可缺少。

细胞培养基主要是包括一些盐及细胞生存所需的必要营养物质,可以在体外培养细胞使其维持正常的生理状态    



  • 病毒、细菌、植物细胞、动物细胞、组培的培养基成分是什么
    答:回答:病毒培养基:动物病毒用鸡胚培养基(鸡胚),植物病毒用植物组织培养(植物组织)。噬菌体用细菌培养基(大肠杆菌,牛肉膏,蛋白胨,无机盐。)。 细菌培养基:牛肉膏蛋白胨培养基(葡萄糖,牛肉膏,蛋白胨,无机盐,水,维生素) 植物细胞培养基:一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐包括微量元素)以及生长...
  • 培养全能干细胞的培养基是什么,为什么
    答:培养全能干细胞的培养基是什么 动物细胞培养液:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、血清或血浆.植物组织培养液的成分:水、无机盐、蔗糖、植物激素(生长素,细胞分裂素)等.干细胞对培养条件要求较高,常用的胚胎肝细胞培养基有mTeSR 1培养基,主要成分有:DMEM、bFGF,EGF、血清、双抗、LIF、谷...
  • 常用细胞培养基成分
    答:蛋白质主要是白蛋白和球蛋白。氨基酸是细胞合成蛋白质的基本成分,氨基酸中有12种是细胞本身不合成的,必须由培养液提供。激素有胰岛素、生长激素和多种生长因子如表皮生长因子、成纤维细胞生长因子、增殖刺激因子(MSA)、类胰岛素生长因子(IGFl、IGF2)等。水解乳蛋白、胶原是另外两种较好的天然培养基成分。...
  • 植物组织培养技术培养基组成
    答:(1)植物组织培养技术依据的原理是植物细胞具有全能性,其培养基的主要成分有:大量元素、微量元素、有机物、植物激素和琼脂等.类型有:MS培养基、发芽培养基和生根培养基.配制好的培养基要进行 高压蒸汽灭菌.(2)菊花组织培养接种时:始终在酒精灯火焰旁进行,对接种工具要用火焰灼烧法灭菌.(3)...
  • 培养基包括哪些成分,各有什么作用,如何配制
    答:这些元素参与培养物机体的建造,构成植物细胞中的核酸、蛋白质、叶绿体、酶系统和生物膜所必需的元素。2 有机营养成分 在配制培养基时,不仅要加入无机营养成分,还要加入一定量的有机营养物质,以利于培养物的生长和分化。2.1 糖类 在组织快繁中,被培养的培养物大多不能进行光合作用,能进行的也不能...
  • 如何选择动物细胞培养基?
    答:1. 细胞培养基的组成 细胞培养基一般由基础培养基、补充物和附加物三部分组成。基础培养基是细胞培养基的主体。其主要成分为无机盐和有机物。无机盐包括钾、钠、钙、镁、铁、锌等10余种必须微量添加的元素;有机物包括氨基酸、糖类、维生素等,其中氨基酸是细胞培养中最重要的有机物质。基础培养基可以...
  • 培养基是由哪些成分组成的?
    答:在离体条件下,不同种植物的组织对营养有不同的要求,甚至同一种植物不同部分的组织对营养的要求也不相同。培养基的种类、成分直接影响到培养材料的生长发育,因而是植物组织培养中的最主要部分。在过去的半个多世纪中,人们已经研制出了适合不同培养目的的各种培养基配方。这些培养基一般都由无机营养、...
  • RPMI-1640培养基的培养基成分
    答:RPMI-1640 细胞培养基成分 (配制时添加碳酸氢钠2000mg/L) 序号 化合物名称 含量 (mg/L) 序号 化合物名称 含量 (mg/L) 1 L-精氨酸 290.00 21 硝酸钙 100.00 2 L-门冬酰胺 50.00 22 无水硫酸镁 48.84 3 L-门冬氨酸 20.00 23 无水磷酸二氢钠 ...
  • 培养基的主要成分是什么?
    答:培养基的成分是营养物质、水、凝固物质、抑制剂、指示剂。营养物质,营养物质提供细菌生长繁殖所需的能量、合成菌体的原料以及激活细菌酶的活性和调节渗透压等作用,细菌需要的营养物质主要有氮源、碳源、无机盐及生长因子,例如,蛋白胨、肉浸液、血液、生长因子。培养基的主要成分特点 水是良好的溶剂,...
  • 细胞培养基有哪几种?
    答:细胞培养的各种各样的人工培养基可以分为以下四种类型:含血清的培养基:胎牛血清是动物细胞培养基最常见的补充成分。它用来作为一种成本相对较低的补充成分,提供动物细胞培养最佳的培养基。这些补充剂能够为不稳定或不溶于水的营养物质提供载体或螯合剂,提供激素和生长因子,蛋白酶抑制剂,并结合并中和...